简介:目的:建立一种快速、稳定、灵敏且可定量的检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。方法:根据马尔尼菲青霉ITS序列,设计并合成引物,通过常规PCR扩增目标序列后,将鉴定正确的目的基因片段克隆入pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,得出拷贝数与循环阈值之间的线性关系曲线表达式,并做灵敏性、特异性试验。结果:荧光定量PCR标准曲线阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为1.938,最低检测的拷贝数为8.5个/反应管。结论:建立了检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析感染程度及对治疗的指示作用奠定了良好的基础。
简介:目的:探讨TCT,HC2-HPV-DNA检测和阴道镜检查在宫颈癌及癌前病变筛查中的联合应用价值.方法:1236例女性作为研究对象,依次进行HC2-HPV-DNA检测、TCT检查、阴道镜检查和病理学检查.结果:HC2-HPV-DNA检测,TCT和阴道镜检查的阳性率均显著小于病理学检查阳性率(x2=40.084,P<0.01;x2=45.008,P<0.01;x2=50.344,P<0.01),上述三项检查中,均为阳性者19例(1.5%),任意两项阳性者35例(2.8%),任意一项阳性者78例(6.3%).结论:TCT,HC2-HPV-DNA检测和阴道镜检查均有一定的局限性,但上述方法联合应用将大大提高筛出率,为患者及时治疗赢得宝贵时间.
简介:Objective:Todetectandquantitategenitalherpessimplexvirus(HSV)DNAinspecimensfrom100patientsclinicallydiagnosedwithgenitalherpes.Methods:PolymeraseChainReaction(PCR)andenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)wereusedwithastandardcurveofDNAcopiesofHSVasquantitativecontrast.Results:Ninety-threecaseswereconfirmedHSVpositiveand7caseswerefoundtobenegative.Therewere58casesofHSV-2(62.4%)and35casesofHSV-1(37.6%)amongthe93positivecases.ThenumberofDNAplasmidsrangedfrom115to1.1×l0^5per250pLamongthe93positivesamples(mean=7.1×10^4/250μL).ThenumberofHSVDNAplasmidsrangedfrom136to1.1×l0^5copiesper250pL(mean=7.6×10^4)amongthosewithHSV-2,and115to9.4×10^4per250pL(mean=6.3×10^4)amongthosewithHSV-1.Meanwhile10μLofextractedanddissolvedDNArandomlytakenfrom8eachofHSV-2andHSV-1samplesweretested.ThenumberofHSV-2DNAplasmidsrangedfrom35copiesto2.7×10^4(Mean=l.8×10^4)andthenumberofHSV-1DNArangedfrom29to2.5×10^4(Mean=1.6×10^4).Inthe7negativecases,thequantityofHSVplasmidswaszero.Conclusion:ThesensitivityofELISAquantitation(93%)isequaltothatofSouthernblot.ThesensitivityofPCRfordiagnosisis91%,and88%forPCRtyping.
简介:Objective:ToexploretherelationshipbetweenquantitativeTreponemapallidumDNA(TP-DNA)PCRtestingandtheToludineRedUnheatedSerumTest(TRUST)inpatientswithsyphilisbeforeandaftertreatment,andevaluatetheclinicalvalueofquantitativeTP-DNAtestinginthediagnosisandtreatmentevaluationofsyphilis.Methods:29patientswithprimary(12cases)orsecondary(17cases)syphilis,whometthecriteriasetforthisstudywererecruitedassubjects.Allpatientsweretreatedwith2.4millionunitsbenzathinepenicillinIMweeklyfor3weeks.QuantitativetestsofTP-DNAinthepatients'plasmawereperformedusingFQ-PCRbeforeandafterthetreatment.SerologictestsincludingTRUSTandTPPAwerealsoperformed.Results:Beforethetreatment,9outof12primarysyphilispatients(75%)andallsecondarysyphilispatients(17/17)testedpositiveforTreponemapallidum(TP)byTP-DNAtesting.TheaveragequantitativetestvaluesofTP-DNAinprimaryandsecondarysyphilispatientswere(3.38±2.34)×10^4and(5.73±1.33)×10^6copies/ml,respectively.Afterthreemonthsoftreatment,1ofthe9primaryand5outof17secondarysyphilispatientswerepositiveuponTP-DNAtesting,respectively.TheaveragequantitiesofTP-DNAwere2.01×10^2copies/mlinprimaryand5.87×10^2copies/mlinsecondarysyphilispatientswithpositiveTRUSTandTP-DNAtests,and3.09×10^2copies/mlforthosewithnegativeTRUST,respectively.Afterninemonthsoftreatment,alltheprimaryandsecondarysyphilispatientswerenegativeuponTP-DNAtesting,whileallprimaryand14of17(82.35%)secondarysyphilispatientsshowednegativeTRUSTresults.Conclusion:ThattheresultsofTP-DNAtestsarenotconsistentwiththoseofTRUSTbeforeandaftertreatmentindicatesthatquantitativeTP-DNAtestingmayhavevaluableclinicalsignificanceintheearlydiagnosisandevaluationoftreatmentregimensforsyphilis.
简介:目的了解寻常痤疮患者面部皮肤特征表现,并进行定量评价。方法随机选取2011年1月~2012年6月在北京军区总医院激光美容中心进行痤疮治疗的180例痤疮患者和同一时期进行美容咨询的50名健康者,应用VISIA皮肤图像分析仪和SOFT5.5皮肤性质测试仪对患者和健康者皮肤性质进行定量分析和评价。结果VISIA数据显示与男性健康者相比,男性痤疮患者在纹理、毛孔和紫质均有明显差异性(P〈0.05),与女性健康者相比,女性痤疮患者在皱纹、毛孔、紫质和红色区均有明显差异性(P〈0.05);与女性痤疮患者相比,男性痤疮患者在色素斑、毛孔和紫质均有明显差异性(P〈0.05),与女性健康者相比,男性健康者在色素斑、皱纹、纹理、毛孔和紫质均有明显差异性(P〈0.05),而红色区未见明显差异性(P〉0.05);不同严重程度的痤疮患者差别主要在紫质和红色区;SOFT数据显示与男性健康者相比,男性痤疮患者在油脂有明显差异性(P〈0.05),与女性健康者相比,女性痤疮患者水分和油脂均有明显差异性(P〈0.05);与女性痤疮患者相比,男性痤疮患者在pH和油脂均有明显差异性(P〈0.05),与女性健康者相比,男性健康者在水分和油脂均有明显差异性(P〈0.05),而pH和弹性未见明显差异性(P〉0.05);不同严重程度的痤疮患者差别主要在水分和油脂。结论寻常痤疮患者面部皮肤特征较健康皮肤表现为皮肤pH、水分和油脂等肤质的差异性且具有明显的性别差异性。
简介:Objectives:Todevelopamulti-nestedpolymerasechainreactioninanassaytodetectearlyTreponemapallidumandHaemophilusducreyiDNAintheswabsofgenitalulcers.Methods:Fourpairsofouterandinnerprimers,specifictothebasicmembraneproteingeneofTreponemapallidumandtothe16srRNAgeneofHducreyiweresynthesized.Themulti-nestedPCRwasdevelopedandappliedtodetectTreponemapallidumandHaemophilusdicreyiinclinicalswabs.Result:ThetwosamplesofstandardstrainsofHaemophilusducreyiandoneTreponemapallidumwereamplifiedandshowed309-bprRNAgeneofHaemophilusducreyiand506-bpDNAofTreponemapalidum,respectively.Outof51samplesofgenitalulcerdetected,29showedTreponemapallidumpositiveproductandnoHaemophilusducreyiDNAwasfound.Conclusion:Themulti-nestedPCRforTreponemapallidumandHaemophilusducreyicouldbeusefulforearlydetectionanddistinguishingdiagnosisbetweensyphilisandchancroid.
简介:目的:通过流行病学定量和定性研究方法,探讨生殖道感染发病的危险因素,提出有针对性的干预建议。方法:定量研究通过对3类人群4744例育龄妇女的调查问卷、妇科检查和实验室检查,得到7种常见生殖道感染发病率的资料,经过统计学分析,研究与感染有关的危险因素;定性研究采用个人访谈、小组访谈和机构观察的方式,对5类人群共166人进行了有关生殖道感染流行情况和危险因素的调查。结果:深圳市一般人群育龄妇女的7种常见生殖道感染率是27,6%,宫颈感染率是5.0%。感染的危险因素与深圳的气候条件、研究对象的文化程度、初次性生活年龄、未婚性生活、最近3个月有新性伴、性乱、不使用安全套和有人流史有关;细菌性阴道病与使用宫内节育器有关;医疗机构服务人员对性病患者存在歧视现象,私人诊所不按规定处理医疗垃圾。结论:应加强道德和知识的宣传教育,提高安全套使用率,加强对医务人员的职业道德教育和对医疗垃圾的管理。
简介:目的应用VISIA皮肤图像分析仪和SOFT5.5皮肤性质测试仪对Pixel2940nm激光治疗痤疮瘢痕患者临床效果进行定量评价。方法随机选取45例痤疮瘢痕患者,应用Pixel2940nm激光进行治疗,每月治疗一次,分别在治疗后1周,1月和3月用VISIA皮肤图像分析仪和SOFT5.5皮肤性质测试仪对患者皮肤性质进行定量分析和评价。结果治疗后3个月与治疗后1周相比,治疗后1周患者皮肤pH值下降(P<0.05),水分降低(P<0.05),油脂增高(P<0.05),pH值与油脂有明显负相关(P<0.01),弹性无明显变化(P>0.05);治疗前后比较变化最明显的是紫质(P<0.05),治疗后1周与治疗前相比,皱纹、纹理有明显差异(P<0.05),治疗后1月与治疗前相比紫外线色素斑减少(P<0.05),治疗后3月与治疗前相比毛孔和棕色斑减少(P<0.05),色素斑和红色区无明显改变(P>0.05)。结论Pixel2940nm激光对痤疮瘢痕患者皮肤性质改变主要在治疗后1周,表现为皮肤水分减少、油脂增高、紫质减少和毛孔肤质改善,临床应用VISIA皮肤图像分析仪和SOFT5.5皮肤性质测试仪对痤疮瘢痕患者治疗前后皮肤性质进行定量分析,可作为Pixel2940nm激光治疗痤疮瘢痕的一个定量衡量标准,在诊断,指导治疗和疗效评估上具有一定意义。
简介:Objective:Todevelopasensitive,specificandsimplemethodfordetectionofextremelylownumbersofT.palliduminclinicalspecimens,asasignificantadditiontotheserologictestsforsyphilisdiagnosis.Methods:Double-tubenestedPCR(DN-PCR)andsingle-tubenestedPCR(SN-PCR)assayswereperformedtoamplifyspecificfragmentsoftheDNApolymeraseIgene(polA)ofT.pallidum.SensitivityandspecificityofthetwoPCRassaysweretested.EightysixwholebloodspecimensfrompersonswithsuspectedsyphilisweredetectedbythetwonestedPCRmethods.TheTPPAtestwasusedasacomparisonfordetectingsyphilisinserafromcorrespondingpatients.Results:OnlyspecificampliconscouldbeobtainedduringamplificationoftheT.pallidumpolAgeneandthedetectionlimitwasapproximately1organismwhenanalyzedongelbythetwoPCRmethods.Of86clinicalspecimens,62werepositivebyTPPA.Ofthese,54and51werepositivebytheDN-PCRandSN-PCR,respectively,whichdoesnotrepresentastatisticallysignificantdifferencebetweenthetwoPCRtests.Of24TPPA-negativespecimens,5werepositivebybothDN-PCRassayandSN-PCRassay.Conclusion:TheSN-polAPCRmethodisextremelysensitive,specificandeasytoperformfordetectinglownumbersofT.palliduminclinicalbloodspecimensasacomplementarytoserologyforsyphilisdiagnosis.
简介:目的:探讨男性不育症患者精子DNA完整性与精子常规参数及形态的相关性。方法:纳入2016年1月至12月于我院就诊的男性不育症患者72例为观察组,同期体检健康男性100例为对照组。采用WLJY-9000型彩色精子质量检测系统检测精液常规参数及精子形态学参数,采用精子染色质扩散法(SCD)分析精子DNA完整性。对比观察组与对照组各检测指标差异。将观察组进一步划分为少精症组(n=16)、弱精症组(n=33)、白细胞精子症组(n=23),对比各小组检测指标的差异。分析观察组中精子DNA完整性与其它指标的相关性。结果:观察组精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比、精子DNA完整性均明显低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。少精症组精子浓度最低,弱精症组精子存活率最低,白细胞精子症组前向运动精子占比及正常形态精子占比最低,上述差异均有统计学意义(P〈0.05)。观察组精子DNA完整性与精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比均呈正相关(r=0.398、0.304、0.662、0.404,P均〈0.01)。结论:不孕症男性精子DNA完整性、精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比均明显下降,且精子DNA完整性与后4项观察指标均呈明显正相关。
简介:目的:考察全自动微粒子化学发光免疫实验(CMIA)与TP-IgM抗体检测(TP-ELISA)在梅毒检测中的应用效果差异。方法:采用TPPA法作为金标准检测1000例住院患者血清标准,评价CMIA与TP-ELISA在梅毒检测中敏感性和特异性。结果:金标准中1000例血清标本梅毒检出率为12.3%,CMIA阳性检出率为12.9%,TP-IgM为11.7%。CMIA法灵敏度为98.4%(121/123),特异性为99.1%(869/877),阳性预测值为93.8%(121/129),阴性预测值为99.8%(869/871)。TP-ELISA法灵敏度为89.4%(110/123),特异性为99.2%(870/877),阳性预测值为94.0%(110/117),阴性预测值为98.5%(870/883)。两组间灵敏度和阴性预测值存在显著差异(P〈0.05)。结论:CMIA的灵敏性和阴性预测值优于TP-ELISA法,可以替代TP-PA成为梅毒检测的血清学检测首选方法。
简介:目的探讨生物共振技术对92例慢性荨麻疹患者进行过敏原检测的临床应用。方法使用德国MORA—Super生物共振治疗仪自带过敏原物理信息960种,对92例患者逐一过敏原检测。其中11例同时做免疫印迹法过敏原检测。结果92例使用生物共振治疗仪检测均有阳性结果,过敏原阳性共计361人次,食入物类过敏原阳性206人次,吸入物类过敏原阳性101人次,化学物质过敏原阳性45人次,其他过敏原阳性9人次。11例患者在免疫印迹法过敏原检测中,7例测出过敏原阳性共计39人次,食入物类过敏原阳性23人次,吸入物类过敏原阳性16人次。结论利用生物共振技术检测过敏原,能测出各种引起过敏性疾病的致敏原,种类多、安全、无创、无不良反应,与免疫印迹法过敏原检测可以形成互补,有助于全面了解患者过敏状态。