简介：目的：构建以绿色荧光蛋白eGFP为报告基因的毕赤酵母表达载体,为后续致病真菌功能基因的eGFP融合基因过表达作铺垫。方法：利用In-Fusion系统构建eGFP的表达载体PPICZαB-eGFP,氯化锂转化毕赤酵母X33,通过含Zeocin（100μg/mL）抗性的YPD培养基筛选,将得到的菌落X33-eGFP以引物3＇-AOX/5＇-AOX及eGFP-F/eGFP-R进行PCR,产物行琼脂糖凝胶电泳、测序验证eGFP片段是否成功插入,最后甲醛诱导表达。结果：以X33-eGFP为模板的PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果显示片段eGFP成功插入至载体中,测序验证无突变。经甲醛诱导后的毕赤酵母X33-eGFP在蓝色荧光激发下,可观察到发出绿色荧光。结论：成功建立了毕赤酵母X33-eGFP,且证明了eGFP片段可以在毕赤酵母AOX启动子中得到表达。

简介：目的研制人乳头瘤病毒16型（HPV16）L1／E7CTL重组杆状病毒载体。方法以包含HPV16标准病毒株的质粒pHPV16为模板，采用PCR技术扩增HPV16主要衣壳蛋白L1（1-471aa）的基因序列，同时人工合成E7蛋白CTL表位E749-57的编码序列，将两个目的基因逐步连接构建重组质粒pUC19HPV16L1／E7CTL，HPV16L1／E7CTL片段经质粒pFastBac1转位至BacmidDNA后通过PCR鉴定重组杆粒。结果成功构建了包含融合基因HPV16L1／E7CTL片段的克隆质粒puc19HPV16L1／E7CTL，制备了L1／E7CTL重组杆状病毒载体杆粒BACMIDDNA。结论采用分子克隆技术构建了包含L1／E7CTL的重组杆粒BACMIDDNA，有利于下一步融合蛋白的表达，制备一种能够更有效激发CTL杀伤作用的嵌合病毒样颗粒疫苗，为疫苗研制打下基础。

简介：目的探讨端粒酶RNA（hTR）和反转录酶（hTERT）在银屑病皮损中的表达情况以及它们与角质形成细胞增殖关系。方法应用原位杂交方法检测银屑病皮损hTR、hTERTmRNA的表达，应用免疫组织化学方法检测Kj-67抗原表达，并对hTR、hTERTmRNA的表达与Ki-67抗原表达进行相关性分析。结果hTR表达在基底细胞、棘细胞、颗粒层细胞和所有有核细胞的胞浆，与细胞的增殖情况无关；其表达强度和阳性细胞百分率各组之间无明显差异（P〉0．05）。而hTERT的表达与细胞增殖状态有关，主要表达在基底细胞层和棘细胞层下方，表达强度和阳性细胞百分率要明显高于正常皮肤（P〈0．05）。Ki-67抗原主要表达在细胞生发层和分裂旺盛的组织；它的表达与hTERT的表达呈正相关（r=0．674，P〈0．01）；而与hTR（r=-0．295，P〉0．05）无关。结论hTERTmRNA在银屑病皮损中的表达明显升高，与细胞增殖活性有关。hTR的表达和细胞增殖活性无关。

简介：目的探讨特应性皮炎患者皮损内白介素-10（IL-10）的表达及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应法测定20例特应性皮炎患者皮损内及16例正常对照者皮肤内IL-10mRNA的定量表达,采用湿疹面积及严重度指数（EASI）评分评估患者病情,分析特应性皮炎患者皮损内IL-10mRNA的定量表达与EASI评分相关性。结果特应性皮炎患者皮损内IL-10mRNA的表达明显高于对照组皮肤内的表达（t=2.88,P〈0.01）;特应性皮炎患者皮损内IL-10mRNA的定量表达与EASI评分呈正相关（r=0.4743,P=0.0346）。结论IL-10mRNA的过度表达可能参与了特应性皮炎的发病。

简介：目的探讨具有免疫调节作用的药用菌多糖薄芝糖肽及香菇菌多糖联合中药汤剂治疗寻常性银屑病，临床疗效。方法采用薄芝糖肽或香菇菌多糖联合中药汤剂治疗寻常性银屑病患者分别为52例，并以单独使用中药汤剂治疗本病患者52例为对照组。结果薄芝糖肽治疗组的有效率为75．0％，香菇菌多糖治疗组的有效率为63．46％，对照组有效率为44．23％。两治疗组有效率优于对照组（P〈0．05）。结论药用菌多糖联合中药治疗寻常性银屑病临床疗效满意。

简介：结节性硬化症（tuberoussclerosiscomplex,TSC）是一种常染色体显性遗传病,典型临床特征是癫痫、智能减退、面部血管纤维瘤及各系统的错构瘤。该病具有遗传异质性,由TSC1或TSC2基因突变引起。TSC1编码错构瘤蛋白（hamartin）,TSC2编码马铃薯球蛋白（tuberin）。这两种蛋白质在组织中广泛表达,于体内形成Hamartin-Tuberin复合体,若TSC1或TSC2基因发生突变,则影响Hamartin-Tuberin二聚体功能,使mTOR复合物1（mTORcomplex1,mTORC1）信号转导通路异常激活,导致结节性硬化症的发生。目前研究证实该病与TSC1或TSC2基因突变有关。该文就结节性硬化症的致病基因及基因突变研究进展作一综述。

简介：Objective:ToinvestigatetheexpressionofHPV16mRNAinnormalhumankeratinocytestransfectedwithpSV2-neo/16.Firsthumankeratinocyteswereculturedintheserum-freemediumM154.Second,theplasmidpSV2-neo/16wastransfectedintothehumankeratinocytesusingatransfectingreagent.Third,RT-PCRandSouthernBlottingwereusedtodetecttheexpressionofHPV16mRNAandDNAinthetransfectedkeratinocytes,respectively.Results:TheexpressionofHPV16mRNAwassuccessfullyamplifiedandan110bpwasditectedbyRT-PCR.A7.9kbfragmentwasconfirmedinthetransfectedkeratinocytesbySouthernBlotanalysis.Conclusion:HPV16mRNAandDNAweresuccessfullydetectedinthehumankeratinocytes.

简介：目的对人类免疫缺陷病毒（humanimmunodificiencyvirus,HIV）感染者中合并丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）感染的情况进行流行病学调查和统计学分析,评估合并感染的患病率和相关影响因素。方法对各医院在2006—2008年收治的门诊和住院HIV感染病例,用统一的流行病学调查表进行登记;并进行HCV抗体、肝功能和CD4细胞检测;多元回归法分析HIV合并HCV感染风险因素。结果HIV感染者978例,合并HCV的感染率为33.9%,静脉吸毒途径感染HIV占合并感染者的81.3%,30~45岁年龄组HIV合并感染率为42.6%,无业人员HIV合并感染率为61.9%,均明显高于其他组。结论年龄30~45岁和无正当职业的人群HIV合并HCV感染率较高,静脉吸毒是HIV合并HCV感染的主要传播途径。

简介：目的研究银屑病特异表达microRNA（miRNA）与靶基因及基因功能之间调控网络及作用机制。方法采用基因芯片技术筛选银屑病皮损组织和健康皮肤组织中差异性表达的miRNA,并通过生物信息学对差异表达的miRNA进行靶基因预测及靶基因功能富集分析,构建银屑病差异表达miRNA与靶基因及基因功能调控网络,得到网络核心调控的miRNA和受调控作用的核心靶基因及关键性基因功能。结果得出银屑病皮损组织中明显上调的关键miRNA10个,调控的关键基因12个,主要功能21项,明显下调的关键miRNA21个,调控的关键基因22个,主要功能28项结论特异性表达的miRNA主要调控的靶基因及其基因功能与银屑病发病密切相关,为银屑病基因层面的机制研究提供了有效的依据。

简介：近期,干细胞作为药物载体的研究得到了极大关注。目前的热点集中于研究和利用干细胞的肿瘤靶向性,从而达到精确地释放药物或造影剂的目的。同纳米颗粒所实现的靶向性相比,干细胞能够进入肿瘤组织,并定植于该处,而纳米颗粒则会被恶性细胞所吞噬、内化。

简介：麻风病是由麻风分枝杆菌引起的一种慢性传染性疾病。患者感染麻风分枝杆菌后发病与否和临床表型取决于宿主的遗传素质,目前通过候选基因研究、全基因组连锁研究、全基因组关联研究等方法发现多个麻风易感基因,为实现麻风病的一级预防奠定理论基础。本文就当前定位于不同染色体的易感基因进行分类综述。

简介：据新华网自英国布赖顿报道，在老鼠身上进行的最新实验表明，母亲对子女的关爱方式能决定他们成人后的心理健康程度，因为母亲的爱抚能永久改变婴儿的基因活动。

简介：目的探讨雌激素对人正常皮肤成纤维细胞骨形态发生蛋白-2（BMP-2）表达的影响。方法采集正常人皮肤标本，分离培养真皮成纤维细胞。分别在培养细胞中加入PBS、雌激素、BMP-2刺激，应用流式细胞仪观察细胞周期变化情况，通过反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法观察BMP-2mRNA表达情况。结果雌激素和BMP．2处理组细胞增生指数与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）。雌激素处理组BMP-2mRNA表达显著高于对照组（P〈0．05）。结论雌激素可上调人正常皮肤成纤维细胞BMP-2mRNA的表达，促进成纤维细胞增生。

简介：目的观察卡介菌多糖核酸联合氯雷他定治疗皮肤划痕症的临床疗效。方法治疗组给予卡介菌多糖核酸注射液0.5mg1次/隔日,肌肉注射,共注射18次,同时给予氯雷他定片10mg/d口服,连续治疗3周。对照组仅给予氯雷他定片10mg/d,连服3周。结果治疗组与对照组的疗效差别有显著性,治疗组疗效优于对照组(uc=3.27>1.96,P<0.05,α=0.05)。结论卡介菌多糖核酸联合氯雷他定治疗皮肤划痕症临床疗效确切。

简介：目的制备一种以卡波姆（carbomer）胶为基质的载体用于黑素细胞涂布法移植。方法体外培养正常人的黑素细胞,配制卡波姆胶半固体培养基;分别采用台盼蓝染色、噻唑蓝比色法[3-（4,5-Dimethyl-2-Thiazolyl）-2,5-DiphenylTetrazoliumBromide,MTT]检测1%卡波姆胶对黑素细胞毒性和增殖的影响;用Transwell培养板检测1%卡波姆胶对黑素细胞迁移的影响。结果1%卡波姆胶作用0~36h对黑素细胞活性和增殖无影响;1%卡波姆胶作用12h后对黑素细胞迁移无影响（P〉0.05）。结论采用卡波姆胶混合黑素细胞,不影响体外培养的黑素细胞功能,可以作为新型黑素细胞涂布法移植载体。

简介：目的:探讨精子质量及DAZ(deletedinazoospermia)基因与男性不育症的关系.方法:应用计算机辅助精子质量检测系统进行检测精子质量;用PCR方法检测DAZ基因.结果:不育组(n=600)精子质量明显低于正常生育组(n=25)(精子密度不育组34.43±43.43×106/ml,生育组92.86±62.45×106/ml,P＜0.01;活率分别为42.93±25.33%、75.25±12.75%,P＜0.01;各级精子所占百分比相比也有显著性差异),男性不育患者中DAZ基因缺失占一定比例(占13.91%),无精子症所占比例较大达36.6%.结论:精液分析是男性不育患者最基本的诊断手段,精子质量差是男性不育最基本的原因;DAZ基因与精子的生成有密切关系,也可引起男性不育.

简介：瘢痕疙瘩是一种创伤后局部皮肤成纤维细胞过度增生,以及胶原异常聚集所致的良性疾病。其病因复杂,发病机制至今尚未明确,遗传基因、细胞因子、炎症递质、免疫应答、环境因素等均起一定作用。其中,遗传因素被认为是导致瘢痕疙瘩发病的重要原因。瘢痕疙瘩具有一定的家族遗传倾向,存在家系多个成员患病、双胞胎同时患病、有色人种发病率较高等现象。有关瘢痕疙瘩基因表达、遗传易感性及基因多态性等方面的研究将为发现易感人群、早期预防及研究理想的防治策略提供宝贵的理论基础。

简介：目的观察卡介菌多糖核酸、黄柏胶囊联合复方氟美松软膏治疗慢性湿疹的临床疗效及安全性。方法选择门诊慢性湿疹患者64例，随机分为2组。治疗组32例给予卡介菌多糖核酸1mL隔日1次肌注，黄柏胶囊4粒口服，3次／d，外用复方氟关松软膏，2次／d。对照组32例仅外用复方氟美松软膏，用法用量同前。2组疗程均为6周。结果治疗组第2、4、6周总有效率均高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论卡介菌多糖核酸、黄柏胶囊联合复方氟美松软膏治疗慢性湿疹疗效满意。

简介：

简介：目的探讨多磺酸粘多糖乳膏与氧化锌软膏联合治疗成人慢性湿疹疗效。方法将70例成人慢性湿疹患者随机分为观察组和对照组,观察组采用多磺酸粘多糖和氧化锌联合治疗,对照组采用氧化锌单独治疗,治疗1周和4周后进行随访,比较2组患者治疗效果和不良反应。结果治疗1周和4周后,观察组的治疗有效率均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,治疗过程中70例患者均未出现明显的不良反应。结论多磺酸粘多糖与氧化锌治疗成人慢性湿疹临床效果显著,安全性高,具有较高的临床应用价值。