简介：目的构建具有高效转染率且含有标记基因的携带白介素4受体拮抗剂（IL-4RA）基因的重组逆转录病毒载体pLNC-IL-4RA。方法将IL4RA基因插入pLNC—Laz逆转录病毒载体获得重组的逆转录病毒表达载体pLNC—IL-4RA，重组的逆转录病毒表达载体pLNC—IL4RA通过质脂体转染PA317细胞进行包装，PA317抗性克隆经过G418的抗性筛选产生并扩增，将含有病毒的PA317细胞培养液上清收集后转染NIH3T3细胞进行病毒滴度的测定。结果扩增后的G418抗性克隆经过检测和滴度测定结果显示含有目的基因的逆转录病毒最高的病毒滴度为1×10^4CFU／mL。选择含有最高病毒滴度的PA317细胞抗性克隆进行基因组的提取和鉴定，结果显示目的基因IL-4RA成功地整合到了宿主的基因组中。结论含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒载体经过PA317细胞包装后获得了较高的病毒滴度，为下一步哮喘模型的基因治疗打下了基础。
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