简介：目的构建长链非编冯RNABRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BREAS1的全长目的片段，将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDHCMVMC8EF1分别双酶切后进行连接，转化到感受态大肠杆菌后，通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落，提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒，并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2，分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BREAS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BREAS1全长序列，经过双酶切、连接、转化、筛选及I）NA测序，成功构建重组慢病毒载体质粒pCDH-BRE-AS1。通过荧光显微镜检测，几乎昕有经过嘌呤霉素筛选的OSRC2细胞均具有绿色荧光，显示其被重组慢病毒感染；荧光实时定量PCR显示，感染了RNABRE-AS1慢病毒的OSRC2细胞中，BREAS1的表达水平上升了38．5倍。EdU插入实验显示BREASl抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体，并证明BREAS1能抑制肾癌细胞增殖。

简介：膀胱恶性肿瘤的发病率在泌尿系肿瘤中发病率最高,其发病与环境因素和生活习惯等密切相关,其发生、发展机制目前尚不完全明确,临床上对膀胱肿瘤复发的预防也尚无可靠方法。因此,进一步深入了解其发生、发展和复发的确切机制非常重要。

简介：目的研究长链非编码RNA-NR_024158在肾肿瘤中的表达及其调控机制,并探讨其对肾肿瘤细胞增殖和迁移的影响。方法逆转录实时定量PCR检测NR_024158在肾肿瘤组织和细胞系中的表达;甲基化特异性PCR检测NR_024158启动子区甲基化状态;逆转录实时定量PCR检测非特异性去甲基化药物(5Aza.dc)处理后肾肿瘤细胞系中NR_024158表达的变化;MTS技术检测过表达NR_024158后细胞的生长情况;Transwell小室实验检测过表达NR_024158后细胞的迁移和侵袭情况。结果肾肿瘤组织和细胞系中NR_024158的表达较相对参照系(HK-2)降低;NR_024158启动子区存在甲基化;5Aza.dc处理后,肾肿瘤细胞系NR_024158的表达明显增加;过表达NR_024158后肾肿瘤细胞系的增殖和迁移、侵袭明显受到抑制。结论NR_024158在肾肿瘤中发挥抑癌基因样作用,其表达受甲基化调控。

简介：目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）H19促进膀胱癌细胞增殖的分子机制。方法（1）应用实时定量逆转录PCR（RT-qPCR）分别检测膀胱癌组织中lncRNAH19和miRNA-29c-3p的表达并分析其相关性。（2）应用RNA干扰和细胞转染技术抑制膀胱癌细胞系T24及5637中H19基因的表达,其后通过细胞增殖实验检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期变化;RTqPCR检测细胞中H19的表达变化。（3）在膀胱癌细胞系T24和5637中共表达miR-29c-3p和H19,运用荧光素酶报告系统验证miR-29c-3p对H19及细胞周期蛋白D2（CCND2）的靶向作用,应用Westernblot检测膀胱癌细胞系T24与5637中抑制H19表达后CCND2的表达变化。结果H19在膀胱癌中高表达,miR-29c-3p在膀胱癌中低表达,H19和miR-29c-3p的表达为负相关,H19与CCND2的表达为正相关。MiR-29c-3p可同时靶向H19及CCND2。在膀胱癌细胞系中过表达miR-29c-3p可以抑制H19的表达,miR-29c-3p在膀胱癌中起肿瘤抑制作用,而H19具有促进癌细胞增殖和改变细胞周期的能力,表现为癌基因样作用,抑制膀胱癌细胞系T24和5637中H19的表达可以在翻译水平减少CCND2的表达。结论lncRNAH19通过与CCND2竞争结合miR-29c-3p,降低miR-29c-3p对CCND2的表达抑制,从而在膀胱癌中发挥肿瘤促进作用。

简介：患者，男，62岁，以“左侧腰痛，血尿3个月”为主诉于2007年5月10日入院。无咳嗽、咳痰，胸闷、气短等伴随症状，既往无高血压、糖尿病、心脏病病史。CT提示左肾肿瘤，大小约10．0cm×9．0cm×8．0cm，同时伴多发双肺转移，

简介：目的探讨以自发破裂出血为主要临床表现的肾脏肿瘤的诊治。方法回顾性分析16例肾肿瘤自发性破裂患者的临床资料。所有患者均行B超和CT检查，3例行MRI检查以鉴别肾细胞癌与错构瘤，术前确诊12例。9例急诊行患肾切除术，5例行保留肾单位手术（nephronsparingsurgery，NSS），2例行选择性肾动脉栓塞术（transcatheterarterialembolization，TAE）。结果14例手术患者术后病理诊断。肾恶性肿瘤7例，错构瘤7例。16例均获随访，随访时间6～46个月，定期复查B超或CT，所有患者未见肿瘤复发，其中行TAE的2例患者，肿瘤明显缩小。结论自发破裂出血为主要临床表现的肾脏肿瘤中恶性肿瘤比例较高，螺旋CT是鉴别良恶性的主要方法。治疗以肾切除手术为主，良性肿瘤可考虑行NSS或TAE。

简介：Topretreatspermatvarioustemperaturesbeforeexposuretohumanpapillomavirus(HPV)16DNAfragmentsandtoassesstheefficiencyofHPVcarrierspermtotransfectcumuluscells.Methods:Cumuluscellsfromfollicularaspirateswereobtained,pooledanddividedintoculturedishescontainingSybyGold-stainedHPVDNAcarryingspernthatwereeitherpretreatedat4℃,37℃or40℃(n=5).Thecellswereincubatedin5%Co2inairmixtureat37℃for24hours.TheeffeiciencyofspermtotakeupfluorescentHPVDNAwasdeterminedathour0.Afterincubation.cumuluscellviabilitywasassessedusingtheeosinmethodandthepercentagesoffluorescentcumuluscellsdetermined.Results:Ouverhalfofallthecumuluscellsbecamefluorescentwiththehighestpercentageinthe37℃group.Spermpretreatedat4℃hadthegreatestamountofHPVDNAfragments.Totalspernmotilitywassimilarforthe3pretreatmentgroups.Therewerenodifferencesincumulusviabilityamongthegroups.Conclusion:Spermpretreatedat37℃transferredthegreatestamountoffluorescentHPVDNAfragmentstothecumuluscells.TheHPVDNAwasobservedinthenuclearandcytoplasmiccompartments.ThedatasuggestedthepossibilityofspermasavectorforthetransmissionofHPVDNAtothecumuluscellssurroundingovulatedoocytes,whichmightleadtoearlyimplantationfailures.

简介：阴茎癌占男性恶性肿瘤的0．07％^[1]。随着我国经济条件、医疗卫生条件的改善以及不良卫生习惯的纠正，近年来发病率呈现下降趋势^[1]，但是在一些经济不发达地区，特别是偏远的乡村，阴茎癌仍是男性健康的重要威胁之一嗍。自g002年7月至2012年9月，我院共收治阴茎癌患者16例，现报道如下。

简介：1993年～1999年我们收治16例隐匿阴茎，年龄最大者22岁，最小1岁，平均8．5岁。2例幼儿因包皮外口狭小反复尿潴留，1例成人因婚后性生活不满意求治。术后随访．6年6例，4年7例，半年2例1阴茎外观如常人，皮肤无皱折及水肿，相应年龄之生理功能正常。

简介：目的探讨非嵌合型克氏综合征患者生育遗传学意义后代的可行性。方法1例就诊于华中科技大学同济医学院附属同济医院的男性患者,年龄29岁,多次精液分析提示无精子,查体双侧睾丸体积小,质硬,约2ml。性激素水平：卵泡刺激素37.34IU/L,黄体生成素15.69IU/L,明显升高;睾酮2.13ng/ml,稍微偏低。查染色体核型为47,XXY,Y染色体微缺失正常,确诊为非嵌合型克氏综合征。行显微睾丸取精术,同时配合女方取卵后行卵细胞胞质内单精子注射（intracytoplasmicsperminjection,ICSI）,随访1个月,观察患者术后并发症及其配偶妊娠情况。结果显微睾丸取精术中找到少量活动精子,次日女方取卵后行ICSI,3d后移植2枚新鲜胚胎。术后患者未出现阴囊血肿、感染等并发症,术后随访1个月患者睾酮水平较术前偏低,但性功能未受到影响。女方移植后2周查血HCG,为801mIU/ml;移植后4周超声提示宫内早孕,单胎,胚胎存活。结论非嵌合型克氏综合征患者可通过显微睾丸取精术获取精子,同时配合ICSI技术,生育自己遗传学意义的后代。

简介：腹膜透析是慢性肾衰竭肾脏替代治疗中不可缺少的方法之一,植入PD管后最常见的并发症包括PD管堵塞、移位等,其中大网膜黏连包裹是透析管堵塞的重要原因之一[1]。严重者需重新置管甚至退出腹膜透析,从而影响了患者的生存率及生活质量,

简介：目的提高对非霍奇金淋巴瘤合并原发性肾细胞癌的认识,总结其临床特点。方法回顾性分析1例非霍奇金淋巴瘤合并原发性肾细胞癌的诊治经过,并结合文献报道进行分析总结。结果本例患者初诊时误诊为非霍奇金淋巴瘤伴左肾侵犯,给予CHOP方案化疗3个周期后左肾肿块较前无明显变化,行左肾肿块穿刺活检,结果为肾透明细胞癌,遂在全麻下行左肾癌根治术,术后病理证实为左肾透明细胞癌,随访12个月,未见肿瘤复发及转移。结论非霍奇金淋巴瘤合并原发性肾细胞癌临床少见,但并非偶然,需要进一步的研究来阐明两者相关的危险因素,同时在临床工作中亦需提高对非霍奇金淋巴瘤合并原发性肾细胞癌的认识。

简介：为评估中低风险（G1~G2期）的非肌层浸润性膀胱癌的远期复发率和进展率,开展了一项704例患者的单中心回顾性分析。入组为经尿道切除术后的原发性TaG1、TaG2、T1G1和T1G2期膀胱尿路上皮癌患者,通过尿脱落细胞学检查确定无并发原位癌,并通过膀胱镜检查和上尿路成像进行随访和监测。中位随访时间为64.9个月（最长120个月）,结果显示,在所有的患者中,59.3%无复发.

简介：闭合性肾损伤，除伤情严重者外，非手术治疗大部分能痊愈，且不留后遗症。本组对32例闭合性肾损伤患者，进行回顾性总结分析结果发现，对此类病人除采取镇静、止痛、止血、抗感染及适当补充血容量等治疗措施外，护理上我们首先对病人进行耐心细致的心理护理，详细介绍住院环境，认真传授本病的有关知识及实施治疗护理的必要性，

简介：目的：分析原发性小血管炎的临床、病理及实验室检查的特点，提高对此病的认识及诊治水平。方法：对我院1995年-2005年确诊的原发性小血管炎患者16例进行分析，其中男11例，女5例；年龄37岁～77岁，平均（59±10）岁；病程1～120周；10例行肾活检，采用ELISA法检测PR3-ANCA、MPO-ANCA、Anti-GBM三种抗原，肾脏病理行光镜（HE、PAS、PASM、Masson染色）和免疫荧光检查。结果：16例中肾脏受累14例（14／16）87．5％，表现为血尿、蛋白尿、少尿或无尿、肾脏体积增大、血肌酐升高，10例行肾活检病例中，新月体形成（8／10）80．0％、病理有坏死（2／10）20．0％；肾外表现中肺受累（5／16）31．3％、消化道受累（11／16）68．8％、发热（7／16）43．8％、乏力（9／16）56．3％、体重下降（5／16）31．3％、皮疹（1／16）6．3％、关节痛（2／16）12．5％、肌肉酸痛（4／16）25．0％、结膜炎（3／16）18．8％、听力下降（1／16）6．3％、咽痛（1／16）6．3％、外周神经炎（1／16）6．3％、贫血（13／16）81．3％、血沉增快（8／16）50．0％、C反应蛋白增高（10／16）62．5％、补体巴下降（2／16）12．5％、MPO-ANCA阳性（15／16）93．8％、PR3-ANCA阳性（1／16）6．3％、Anti-GBM阳性（1／16）6．3％。16例患者中9例采用甲基泼尼松龙0．5～1．0g冲击治疗1～3个疗程，其中7例配合血液净化，1例GBM抗体阳性患者还采用了血浆置换治疗；3例采用泼尼松1mg·kg^-1·d^-1联合环磷酰胺或骁悉治疗；2例采用中等剂量泼尼松（30-40mg／d）联合硫唑嘌呤50mg／d，1例症状较轻患者单用泼尼松15mg／d，1例拒绝治疗出院。预后：完全缓解（5／16）31．3％．显著缓解（8／16）50．0％，部分缓解（1／16）6．3％，无效（2／16）12．5％、其中1例死亡（1／16）6．3％，总体有效率〉80．0％，病死率6．3％。结论：原

简介：1病例患者,男,63岁,农民,主诉1月前因劳累后,出现两下肢浮肿,无发热、皮疹、咽痛、关节痛及腰痛,在当地医院作"青霉素”及对症治疗无效,且浮肿加重.1周来,发现尿色混浊,呈泡沫状,无排尿痛,经尿常规检查尿蛋白++++,拟诊肾病,收住入院.查体T36.9℃,P84次/min,R20次/min,BP177/74mmHg.神清,呼吸平稳,颜面无明显浮肿,巩膜皮肤未见黄染,未见出血点及瘀点,浅表淋巴结未及,咽不充血,扁桃体不肿大.心律整,未闻及病理性杂音.两肺音清.腹平软,肝脾肋下未及.肾区三联症(-),两下肢中度凹陷性水肿.神经系统未引出病理性反射.化验:血常规WBC5.7×109/L,N0.724,L0.276,Hb9.2g/dl,PLT191×103/μL.尿常规Pro+++,RBC+,24h尿蛋白定量6.62g,尿电泳为非选择性蛋白尿,尿al-微球蛋白22.74mg/L.

简介：目的探讨HPV-16感染与前列腺癌的相关性及基于HPV-16多肽微阵列芯片在前列腺癌患者血清筛查中的应用。方法对来自HPV-16病毒的7个蛋白的胞外段序列进行叠瓦式切割，构建基于241条精细多肽库的微阵列芯片，对经病理确诊的72例前列腺癌患者和87例前列腺增生患者行血清学筛查。用微阵列芯片表达差异显著分析法筛选在前列腺癌患者和前列腺增生患者血清中具有差异性表达的多肽（特异性多肽）；以受试者工作特征曲线（receiveroperatorcharacteristiccurve,ROC）评价这些多肽对前列腺癌的诊断价值，并与PSA相比较。结果HPv-16多肽在两组血清中的抗体响应不同，与HPV-16多肽反应的自身抗体既存在于前列腺癌患者中，也存在于前列腺增生患者中。其中存在15条多肽，与之响应的抗体在两组血清中呈差异性表达；对这15条具有潜在诊断价值的多肽进行ROC曲线分析，发现多指标联合的诊断模型具有更高的诊断效率，由15条多肽构成的多指标联合诊断模型ROC曲线下面积为0．772，在最佳临界值的诊断灵敏度为75．3％，特异度为61．8％；PSA的ROC曲线下面积为0．770，在最佳临界值的诊断灵敏度为65．3％，特异度83．9％。结论前列腺癌患者血清中存在HPV-16特异性自身抗体，并可通过HPV-16多肽微阵列技术加以检测。

简介：对于输尿管中上段的长段狭窄或缺损目前尚无理想的手术方法。清华大学第一附属医院泌尿外科利用自体腹膜治疗2例输尿管长段狭窄患者,现报告如下。患者女性,58岁,因右侧腰痛7月入院。患者曾因右侧输尿管慢性非特异性炎性狭窄接受输尿管镜下狭窄段扩张及留置输尿管双J管治疗,拔除双J管后病情加重,复查CT提示右侧输尿管上段狭窄段长约6cm。患者接受输尿管成形手术治疗,术中纵行剖开狭窄段(未切除狭窄段),输尿管内留置双J管,将输尿管缺损侧以临近自体腹膜包裹形成新的管腔。狭窄段取少许组织,病理结果为炎性组织。

简介：谢赣生医师：首先简要介绍一下病史。患者，男，63岁，因“体检发现右肾结石10年，打侧腰背胀痛伴低热1个月”人院。患并10年的行体检时，B超发现右肾结石（大小不详），未予处理。一年半胁体检时腹部CT平扫提示右肾多发结石、右肾积水、肾片皮质变薄，见图1，当地医院予中药调理，期间未查肾功能或行其他影像检查。

简介：2008年6月,我科诊治巨大淋巴结增生症（Castleman病）患者1例,报告如下。患者,女,16岁,左下腹间断发作隐痛5d,无恶心、呕吐,无尿频、血尿,无发热等不适,既往无特殊疾病史,无外伤及手术史,月经正常。体检无明显阳性体征。外院B超示腹膜后占位,