简介:目的:建立降低抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement,ADE)效应的抗体表达系统,以期降低目标抗体的ADE效应。方法:对哺乳细胞抗体表达载体Fc区进行L234A和L235A点突变,建立抗体表达载体pFRT-IgG1κ-FcM。选取前期工作中获得的1株具有显著ADE效应的抗体Wt-WNV利用pFRT-IgG1κ-FcM系统进行表达,获得突变后抗体FcM-WNV。ELISA检测FcM-WNV与靶抗原西尼罗病毒包膜蛋白DⅢ(West Nile virus envelope protein-DⅢ,WNV E-DⅢ)的结合,流式细胞术分析FcM-WNV与人高亲和力IgG Fc受体hFcγRⅠ(hCD64)的结合。假病毒感染宿主细胞(BHK21和K562)试验检测FcM-WNV的体外中和活性。结果:FcM-WNV与Wt-WNV表达水平相当,能识别结合WNV E-DⅢ,且呈浓度依赖效应;与Wt-WNV相比,FcM-WNV与hCD64的结合
简介:目的:制备针对呼吸道合胞病毒(RSV) N蛋白的兔多克隆抗体,以其作为检测抗体建立基于ELISA的快速中和抗体检测方法。方法:构建pET30a-N质粒,表达纯化N蛋白,免疫新西兰兔制备针对RSV N蛋白的多克隆抗体作为检测抗体。阳性血清系列稀释后与100半数组织培养感染剂量(TCID 50)/孔的RSV中和,接种Hep-2细胞培养,80%丙酮固定细胞,ELISA方法检测感染细胞中病毒的N蛋白,当每孔的吸光度值低于临界值时,视为中和试验阳性孔,阳性孔血清的最高稀释度为该血清的中和抗体滴度。优化抗体稀释度、检测时间、细胞密度及中和时间,建立基于N-ELISA的中和抗体检测方法,对建立的实验方法进行细胞代次、边缘孔效应、准确性、重复性以及精密度验证,初步应用于人RSV IgG阳性血清检测,分析与微量中和法的相关性。 结果:成功构建出pET30a-N质粒,表达纯化
简介:【摘要】目的:分析手足口病患者咽拭子、肛拭子标本病毒的检出率。方法:抽选2019年1月至2019年12月在本院就诊的904例手足口病患者,为患者采集咽拭子、肛拭子标本,且使用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测肠道病毒71型(EV71)、科萨奇病毒A组16型(CA16)及其他肠道病毒检查(EV),对比两种标本的肠道病毒检出率。结果:904例患者中咽拭子标本阳性检出率是84.29%(762/904),肛拭子标本的阳性检出率是94.36%(853/904),肛拭子标本的阳性检出率相对较高(p<0.05)。结论:咽拭子标本与肛拭子标本均为检验病毒的有效方法,能够提升手足口病患者的临床诊断检出率,建议联合采集咽拭子及肛拭子,避免漏诊或者延误治疗问题的发生。
简介:【 摘要 】 目的 探讨门诊护理干预对小儿患手足口病的影响。 方法 本研究收集 2018 年 5 月至 2019 年 1 月门诊儿科就诊患儿 148 例,将其随机分为对照组 74 例、观察组 74 例,观察组实施系统性门诊护理,对照组常规健康教育,对两组患儿随访 1 月,统计其手足口病发生情况。 结果 研究显示,随访 1 月观察组手足口病发生率 4.05% ( 3/74 )显然低于对照组 27.03% ( 20/74 )( P < 0.05 )。 结论 临床中对于门诊儿科患儿及家属实施系统性的门诊护理,可使家属积极预防手足口病,减少患儿发病率,值得推广。