简介:目的研制能同时检测6种口岸重要虫媒病毒的微孔膜芯片。方法针对包括1—4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、黄热病毒、基孔肯雅病毒和裂谷热病毒等6种虫媒病毒,选择合适的保守基因,设计特异性的PCR引物(5’端标记生物素)和检测探针,通过参数优化建立单管多重RT—PCR扩增体系;然后按每个阵列5X5的格式,并确保点样区域为96孔板的微孔大小,将探针喷点到处理后的尼龙膜上,通过条件优化建立稳定的PCR产物与固化探针的杂交体系;采用碱性磷酸酯酶标记链亲和素和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。选取2012年1—6月份从口岸输入的疑似登革热发热病例的临床血清标本,提取RNA后,直接采用本研究建立的微孔膜芯片进行未知虫媒病毒的快速检测。结果用1~4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒和基孔肯雅病毒等7种毒株、1种黄热病毒疫苗株和1种裂谷热病毒核酸体外转录的RNA模板验证已建立的微孔膜芯片,获得比较特异和稳定的实验结果。应用该研究建立的方法,从3份疑似登革热发热病例的临床血清标本中检出了1例登革1型病毒和2例登革2型病毒,与实时荧光PCR检测结果相符。结论该研究建立的6种虫媒病毒微孔膜芯片检测方法,具有快速、准确、自动化和高通量等特点,为快速应对口岸输入性发热病例提供了非常有价值的检测手段,也为进一步开发更多指标的病原体检测方法提供良好的示范作用。
简介:目的用微孔板变色硅胶显色法检测结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(SM)4种一线抗结核药物的耐药性,并分析该方法的临床应用价值。方法对本院2014年1月至2016年12月结核病实验室保存的150株MTB临床分离株用微孔板变色硅胶显色法分别检测4种抗结核药物的耐药性,并与BACTECMGIT960检测法作比较。结果微孔板变色硅胶显色法最佳接种菌量为10-3mg/ml,检测最佳时间为7~10d,INH、RFP、EMB、SM4种药物的最佳MIC判断界值分别为0.25、1、4、2μg/ml。以BactecMGIT960药敏结果为标准,微孔板变色硅胶显色法检测四种一线抗结核药物符合率同BactecMGIT960高度一致,差异无统计学意义(INH:χ2=1.23,P〉0.05;RFP:χ2=1.21,P〉0.05;EMB:χ2=1.45,P〉0.05;SM:χ2=1.25,P〉0.05),其准确度分别达96.7%、98.0%、92.0%、96.0%。结论微孔板变色硅胶显色法检测MTB的耐药性具有成本低、快捷、操作简便、便于观察判断等优点,为MTB耐药检测提供了一种较好的方法,适合推广使用。
简介:摘要目的建立用紫外分光光度法测定甲磺酸倍他司汀微孔渗透泵片体外释放度的方法。方法以0.1mol·L-1的HCl溶液为释放递质,转速100r/min,温度37℃,分别于2,4,6,8,10,12h取样5ml,及时补加同温度、同体积的递质。取续滤液在261nm波长处测定吸光度,根据标准曲线计算不同时间样品液浓度,计算药物的累积释放百分率Q。结果浓度在2.03μg·mL-1~20.30μg·mL-1时,甲磺酸倍他司汀0.1mol·L-1的HCl溶液的浓度与吸收度线性关系良好C=45.143A-0.2377(R2=1),回收率与精密度良好。结论紫外分光光度法可准确地测定甲磺酸倍他司汀微孔渗透泵片的体外释放度。
简介:摘要目的分析单绒毛膜与双绒毛膜双胎妊娠围生儿结局。方法选取2013年6月至2015年6月我院定期分娩的320例双胎临床产妇,根据绒毛膜性分为单绒毛膜组(120例)和双绒毛膜组(200例),详细观察,并记录两组产妇的分娩孕周、并发症以及围生儿结局。结果单绒毛膜组中低出生体重儿62例,占总数的51.7%;极低出生体重儿13例,占总数的10.8%;新生儿窒息11例,占总数的9.2%;畸形儿4例,占总数的3.3%;双胎输血综合症14例,占总数的11.7%;围生儿死亡5例,占总数的4.2%;双绒毛膜组中低出生体重儿54例,占总数的27%;极低出生体重儿7例,占总数的3.5%;新生儿窒息9例,占总数的4.5%;畸形儿3例,占总数的1.5%;双胎输血综合症0例,占总数的0%;围生儿死亡1例,占总数的0.5%。由此可见双绒毛膜组的产妇围生儿出现低出生体重儿、极低出生体重儿、新生儿窒息、围生儿死亡率的明显低于单绒毛膜组产妇,且双绒毛膜组产妇没有出现双胎输血综合症。结论单绒毛膜双胎妊娠围生儿结局明显比双绒毛膜双胎妊娠差,针对双胎妊娠产妇应该尽快确定绒毛膜性质,早期做好监护和护理干预,提高围生儿质量,改善围生儿结局。
简介:摘要目的总结应用睾丸鞘膜积液破囊去顶术治疗睾丸鞘膜积液的初步经验及临床效果。方法回顾分析我院从2006年2月至2010年2月未用睾丸鞘膜积液破囊去顶术治疗睾丸鞘膜积液36例的临床资料,均为单例睾丸鞘膜积液。结果手术均获得成功,手术时间10-20分钟,平均15分钟,住院时间1-7天,平3-4天,术后半天至1天可下床活动并恢复饮食,术后6-7天拆线,切口均为甲级愈合,术后发生阴囊轻度水肿4例,均未经处理治愈,本组36例均获随访,随访时间6个月-2年不等,无复发病例。结论使用睾丸鞘膜积液破囊去顶术治疗睾丸鞘膜积液具有手术方法简单、安全、可靠,并发症及复发率低,值得推广。
简介:摘要假膜性结肠炎(pseudomembranouscalitis,PMC)又称伪膜性结肠炎、难辨梭状厌氧芽胞杆菌性结肠炎、手术后肠炎、抗生素肠炎、抗生素诱发的难辨梭状厌氧芽胞杆菌性肠炎等。PMC常发生于大手术后及一些危重和慢性有消耗性疾病的患者。使用广谱抗生素,特别是口服洁霉素后,肠道菌群失调,难辨梭状厌氧芽胞杆菌异常繁殖,产生毒素而引起肠道黏膜急性坏死性炎症。在坏死黏膜上形成假膜。患者常有腹泻和毒血症,严重时则休克,治疗不当病死率较高。PMC可通过接触传染,甚至发生流行。1985年协和医院陈德昌等报道在1岁以内婴儿的肠道属正常。健康成人大便中PMC的分离率为0~3%。中医认为是湿热中阻,升降失调,清浊不分,以致泻下无度,属泄泻中的濡泄、餮泄范畴。