简介：摘要目的探讨脑源性微囊泡(BDMVs)对脐静脉内皮细胞骨架的影响。方法体外制备BDMVs，并予透射电镜观察及粒径检测。将PKH26荧光染料标记的BDMVs与脐静脉内皮细胞共培养0.5 h、1 h、2 h后，应用流式细胞术检测不同时间点的脐静脉内皮细胞吞噬BDMVs情况。将体外常规培养的脐静脉内皮细胞分为对照组、BDMVs组(加入终浓度1.5×107/mL的BDMVs处理细胞)及尼莫地平组[予2 μg尼莫地平(0.2 mg/mL)预处理10 min后加入终浓度1.5×107/mL的BDMVs处理细胞]，应用激光共聚焦显微镜观察罗丹明标记鬼笔环肽染色后各组脐静脉内皮细胞中纤维型肌动蛋白的荧光强度及应力纤维数目。结果透射电镜下可见体外制备的BDMVs具有完整的膜结构，粒径范围为100~1000 nm。流式细胞术检测显示，吞噬BDMVs的脐静脉内皮细胞比例随培养时间的延长呈时间依赖性升高(0.5 h：22.7%±1.2%；1 h：52.3%±1.3%；2 h：71.6%±1.9%)，各时间点间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察显示，与对照组相比，BDMVs组中纤维型肌动蛋白的荧光强度明显升高且应力纤维数目明显增多增粗；而与BDMVs组相比，尼莫地平组中纤维型肌动蛋白的荧光强度明显降低且应力纤维数目明显减少变细。结论脐静脉内皮细胞吞噬BDMVs的作用随时间延长而增强，且吞噬BDMVs后可导致细胞骨架重构，而尼莫地平可部分阻断该作用。

简介：摘要急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是由肺内外源性多种损伤因素引起的一类临床综合征，其发病率及病死率一直居高不下。近年来研究表明，内皮衍生的细胞外囊泡是病理信号转导的重要媒介，在ARDS发生发展及预后转归中发挥重要调控作用，现就内皮来源的细胞外囊泡在ARDS中的调控机制进行综述。

简介：摘要目的分离胰腺癌细胞(PANC-1)和人胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)细胞培养上清液中的细胞外囊泡，分别比较微小RNA(miRNA，miR)-483-5p在两种细胞及其所分泌的细胞外囊泡中的差异性表达。方法超速离心法制备去除胎牛血清源性囊泡的完全培养基，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测超速离心前(对照组)与超速离心后(实验组)的完全培养基对细胞增殖作用的差异；用去除血清囊泡的完全培养基培养细胞，超速离心方法提取细胞外囊泡，用二喹啉甲酸(BCA)蛋白浓度测定试剂盒和纳米颗粒跟踪分析(NTA)检测细胞外囊泡(EVs)的浓度；用透射电镜、NTA、蛋白质印迹法(Western blot)鉴定其是否符合细胞外囊泡特征。定量即时聚合酶链反应(qPCR)检测miR-483-5p在两组细胞及其分泌的细胞外囊泡中的表达。CCK-8增殖实验和qPCR实验的结果采用t检验分析。结果CCK-8增殖实验结果显示48 h和72 h后，HPDE6-C7的实验组与对照组之间差异无统计学意义(0.674±0.036比0.671±0.016，t＝0.315，P48 h>0.05；0.890±0.027比0.925±0.099，t＝0.581，P72 h>0.05)；PANC-1的实验组与对照组之间差异无统计学意义(0.759±0.004比0.761±0.016，t＝0.249，P48 h>0.05；1.114±0.025比1.145±0.014，t＝1.898，P72 h>0.05)；透射电镜：细胞外囊泡呈"茶杯托盘"状、NTA结果：98%PANC-1源性细胞外囊泡的直径为130.0 nm、98%HPDE6-C7源性细胞外囊泡的直径为129.7 nm；Western blot实验显示：细胞外囊泡表现为CD63、TSG101阳性，而GM130为阴性；蛋白浓度测定试剂盒和NTA分析测得PANC-1和HPDE6-C7源性的细胞外囊泡浓度分别为：1.5 g/L、1.510 11颗粒/毫升和1.3 g/L、1.610 11颗粒/毫升；与HPDE6-C7比较，PANC-1中miR-483-5p的表达显著增加(2.820±0.180比1.000±0.006，t＝－17.539，P<0.01)；与HPDE6-C7源性细胞外囊泡比较，PANC-1源性细胞外囊泡中miR-483-5p的表达显著增加(3.503±0.265比1.002±0.084，t＝－15.582，P<0.01)。结论超速离心法去除胎牛血清源性囊泡的完全培养基不影响细胞的正常增殖；鉴定结果显示所分离的沉淀符合细胞外囊泡的特征；根据NTA的结果可以判断其应归类于小细胞外囊泡；qPCR结果表明，miR-483-5p在PANC-1和其分泌的细胞外囊泡中均为高表达。

简介：摘要本文报道2例胰腺腺泡囊性转化。该病变非常罕见，是一种良性非肿瘤性病变。临床可有腹痛、消化不良、触及腹部肿块等非特异性表现，但大部分病例无临床症状。诊断需与较多见的胰腺囊性肿瘤性病变鉴别。治疗上可以随访或采取保守手术，避免误认为恶性肿瘤而过度手术治疗。

简介：摘要卵巢纯的或以多泡卵黄囊型结构为主的卵黄囊瘤非常罕见，组织学表现为单层扁平或立方状的肿瘤细胞排列成大小不等的不规则小管、微囊以及囊肿，分布于富于细胞的纤维性间质中。特征性的表现为偏心性缩窄的囊肿，类似于初级卵黄囊向次级卵黄囊的裂解。准确诊断该亚型卵黄囊瘤的主要意义在于其具有相对较好的预后。本文报道1例以多泡卵黄囊型结构为主的卵巢卵黄囊瘤，总结其临床病理特征以及诊断和鉴别诊断要点。

简介：摘要目的探讨静脉注射人脐带间充质干细胞(MSCs)源性小细胞外囊泡(sEVs)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠的治疗作用。方法分离并培养人脐带MSCs，收集细胞培养上清液，采用超速离心法分离MSCs源性sEVs。采用Nanosight分析sEVs粒径，透射电子显微镜下鉴定sEVs形态；采用Western blot法检测sEVs表面标志物CD9、CD81和CD63蛋白的表达。取48只SPF级7周龄C57BL/6雌性小鼠，采用光感受器间维生素A类结合蛋白651-670 (IRBP651-670)注射法制备EAU模型。采用随机数字表法将模型小鼠随机分为sEVs治疗组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组，每组24只。sEVs治疗组小鼠于EAU造模后第11天尾静脉注射MSCs源性sEVs 50 μg，PBS对照组以同样方法注射同体积PBS。造模后第8天各组分别随机选取6只小鼠扩瞳后检眼镜下观察眼底炎症情况，隔日1次，并进行炎症评分。造模后第18天采用颈椎脱臼法各组处死6只小鼠，立即摘取双眼眼球制作眼球石蜡切片并行苏木精-伊红染色，进行眼底病理炎症评分。各组分别随机选取6只小鼠，于造模后第18天颈椎脱臼法处死，立即摘取双眼眼球，采用流式细胞术检测小鼠眼球组织中辅助性T细胞1 (Th1细胞)、Th17细胞浸润情况；于造模后第14天各组分别颈椎脱臼法处死6只小鼠，立即分离脾脏及引流淋巴结中的T细胞，采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法检测终质量浓度为0、1、10和20 μg/ml IRBP651-670条件下T细胞增生情况。另选取3只正常小鼠，采用磁珠阴选法分离脾脏初始T细胞，分为sEVs处理组和PBS对照组，根据分组加入10 μg/ml的MSCs源性sEVs或等体积PBS进行共孵育，分别在Th1/Th17细胞分化条件下培养，采用流式细胞术检测各组初始T细胞向Th1/Th17细胞分化情况。结果分离的人脐带MSCs源性sEVs直径平均为(102.4±33.6) nm，透射电子显微镜下sEVs呈双层膜囊泡结构，sEVs中CD9、CD63和CD81蛋白呈高表达。造模后14、16、18、20和22 d，sEVs治疗组眼底炎症评分均低于PBS对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。造模后18 d，sEVs治疗组小鼠眼球组织病理评分明显低于PBS对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。造模后18 d，sEVs治疗组小鼠眼球组织中Th1、Th17细胞百分比分别为(15.55±2.03)%和(15.67±2.15)%，明显低于PBS对照组的(21.35±0.72)%和(20.90±1.10)%，差异均有统计学意义(t＝6.58、5.31，均P<0.01)。在IRBP651-670质量浓度为20 μg/ml条件下，sEVs治疗组T细胞体外增生能力显著低于PBS对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。sEVs处理组初始T细胞分化为Th1细胞和Th17细胞的百分比分别为(28.15±1.32)%和(11.60±2.23)%，明显低于PBS对照组的(31.58±1.75)%和(23.52±1.76)%，差异均有统计学意义(t＝3.93、10.26，均P<0.05)。结论尾静脉注射人脐带MSCs源性sEVs可明显减轻EAU小鼠眼底炎性反应，其机制与抑制初始T细胞向Th1和Th17细胞的分化，减少眼球中Th1和Th17细胞浸润有关。

简介：摘要细胞凋亡是心肌细胞缺血后再灌注导致心肌细胞损伤的主要形式之一，近年来的研究发现，微囊泡可由缺血再灌注损伤后的细胞释放，并参与包括细胞凋亡在内的多种不同的病理生理过程。在此，我们概括了缺血再灌注过程中心肌细胞所释放的微囊泡的特征，并总结了微囊泡抑制心肌细胞凋亡的可能分子机制，最后我们初步概括微囊泡在缺血再灌注相关心脏疾病中的作用，这可能为今后心脏缺血性疾病的治疗提供新思路。

简介：摘要耳源性眩晕占所有眩晕病例的半数以上，其致病机制复杂，涉及多个感觉系统和中枢信息整合，临床诊断与疗效分析普遍缺乏客观指标。前庭相关中枢网络是形成眩晕感知的最终部位，其功能改变可能是眩晕的后果及其症状慢性持续的潜在原因。脑功能评估技术从高级中枢角度探索了耳源性眩晕的特征，证实了患者的皮层多感觉前庭皮质网络发生了活动性及功能连通性改变，为临床认识提供了新的视角。本文阐述了耳源性眩晕脑功能改变的研究进展，并着重探讨脑电图在此领域的应用现状与前景。

简介：摘要细胞外囊泡（EV）能够携带包括核酸、蛋白和小分子代谢物在内的多种生物活性成分，其在肿瘤诊断与治疗中的价值已得到广泛认可。然而目前对于EV内含物的研究主要集中在RNA和蛋白质上，对于最能直接反映细胞状态的小分子代谢物在EV中的作用尚不明确。近年来EV代谢组学在肿瘤研究中逐渐受到了关注，尽管由于前处理复杂且代谢物含量较低，EV代谢组学研究仍存在诸多挑战，但其在调控肿瘤进展及作为肿瘤标志物方面的价值已逐步显现，有望为肿瘤的诊断与治疗提供新的靶点。

简介：摘要细胞外囊泡是双层脂质膜小囊泡，可以由大多数类型的细胞释放，并在大多数体液中可检测到，细胞外囊泡可将其生物活性成分转移到受体细胞或激活靶细胞中的信号转导，发挥细胞间通讯的关键功能，从而参与多种疾病包括肝脏疾病的发生和发展。近年来非酒精性脂肪性肝病患病率上升，除有创的肝活组织检查外，目前还没有可靠的肝脏炎症诊断或纤维化分期方法，寻求相应的无创循环标志物的研究持续活跃，细胞外囊泡是其中较受关注者之一。为此综述了目前关于细胞外囊泡的物理特征、生物成分和分离方法的知识，并介绍了利用循环细胞来源囊泡作为非酒精性脂肪性肝病诊断新标志物的概念。

简介：摘要目的基于超速离心改良法快速分离提取肺炎克雷伯菌分泌的外膜囊泡并进行鉴定和定量。方法将购于国家卫生健康委员会临床检验中心经典肺炎克雷伯菌（cKP）标准菌株和台湾大学馈赠高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）标准菌株分别置于M9基础培养基中培养9 h，利用超速离心改良法提取外膜囊泡（OMV），然后采用负染法于透射电子显微镜下观察其形态和大小，通过Stewart磷脂分析法进行相对定量，并采用两独立样本t检验进行两组间比较。结果透射电子显微镜下观察发现，cKP和hvKP分泌OMV的形态大部分呈球形、囊状小泡结构，小部分形态不规则，OMV直径为20~250 nm，可见多个囊泡聚集成团，且hvKP分泌的OMV多于cKP。相对定量检测发现，hvKP分泌的OMV数量多于cKP，差异有统计学意义（P<0.05）。结论通过超速离心改良法成功实现了肺炎克雷伯菌OMV提取、鉴定及定量检测，为后续OMV机制及功能研究奠定了基础，为抗细菌感染治疗提供了新思路。

简介：摘要目的分析不同组织病理类型肺癌囊泡征CT表现，提高囊泡征在肺癌诊断中的认识。方法搜集2012年10月至2019年5月本院通过手术或穿刺活检病理证实，且CT上表现"囊泡征"的肺恶性肿瘤患者43例。按照病理类型分为腺癌组（32例）和非腺癌组（11例），根据囊泡与瘤体的位置关系分为偏心型、中央型及蜂窝型3种类型，分析两组间囊泡征的形态学及瘤体特征。结果肺腺癌32例，占74.42%，其中包括非黏液腺癌27例，黏液腺癌5例。非腺癌11例，占25.58%，包括鳞癌4例，腺鳞癌3例，肺内转移瘤3例，癌肉瘤1例。CT表现为偏心型、中央型及蜂窝型分别为20、12、11例。腺癌组以偏心囊泡型多见，明显高于非腺癌组，差异有统计学意义（P<0.05）；中央型与蜂窝型组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。腺癌组内壁光整多见，与非腺癌组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；两组病理类型瘤体的成分、形态、边缘征象及囊泡内部结构比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论肺癌囊泡征病理类型各异，但具有相同CT形态学征象，尤其是偏心囊泡征是肺癌特征性的CT征象之一，临床实际工作中，尚需要结合瘤体的征象鉴别分析。

简介：摘要椎间盘源性腰痛（DLBP）是引起腰痛的常见原因，往往被忽视。当物理治疗/药物治疗等保守治疗效果欠佳，而手术适应证又不强烈时，微创介入治疗包括硬膜外糖皮质激素注射、经皮穿刺椎间盘化学溶解术、经皮穿刺椎间盘低温等离子消融术等，是DLBP患者的更佳的选择。本文结合近年的文献，就目前DLBP患者微创介入治疗的进展做一综述。

简介：摘要目的探讨内皮前体细胞来源的微囊泡(endothelial progenitor cells-derived microvesicles，EPC-MVs)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)的保护作用及机制。方法培养大鼠内皮前体细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，使用超速离心法从EPCs培养液中提取微囊泡。选择健康7日龄新生SD大鼠60只，随机分为对照组、HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组，每组各15只。HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组制备HIBD模型，生理盐水组、EPC-MVs组分别在HIBD模型制备完成后予脑室内注射生理盐水、EPC-MVs，72 h后处死大鼠取脑组织，TTC染色检测脑组织梗死情况、实时荧光定量聚合酶链反应检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)mRNA、蛋白免疫印迹检测VEGF蛋白表达变化。结果从12周龄SD大鼠脾脏提取及培养的细胞经形态学及流式细胞术检测确认为EPCs。EPCs培养上清中高速离心分离获得的EPC-MVs经透射电镜观察符合微囊泡的形态学特征。对照组未检测到梗死脑组织，HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组脑梗死体积比分别为(80.3±6.3)%、(77.9±8.9)%、(35.2±7.7)%，EPC-MVs组小于HIBD组和生理盐水组(P<0.001)。HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组脑组织VEGF mRNA及蛋白表达均高于对照组(P<0.001)，EPC-MVs组高于HIBD组和生理盐水组(P<0.001)，生理盐水组和HIBD组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论脑室内注射EPC-MVs可减轻新生大鼠HIBD的程度，其机制可能与上调VEGF表达相关。

简介：摘要脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）是神经营养因子（neurotrophin，NT）家族中的重要成员，在神经元的维持和存活，保持突触完整性和突触可塑性中起重要作用，但其作用不仅限于此。研究发现BDNF在炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）中具有维持内脏超敏反应，促进肠道动力，维持肠道屏障，调节情绪障碍及心脏功能的作用，可能在IBD的发生发展中起重要作用。虽然目前大多限于基础研究，但已经取得了一定的成果，可以预见BDNF将有很好的临床应用前景，可能为IBD的临床治疗提供新的治疗思路。对此，本文作一简要综述。

简介：摘要细胞外囊泡（EV）是细胞或微生物分泌的直径在30~1 000 nm的双层脂质囊泡，内含有丰富的蛋白质、核酸、脂质及其他生物信息分子。因此EV可以作为细胞间物质传递的载体。目前在感染性疾病中，病原微生物的EV可作为双刃剑，起到双重作用。既可在宿主的感染免疫，病原菌的感染致病及耐药性传递中发挥负面“敌”的重要作用，也可在临床诊疗中展现病原微生物EV“友”的优势。

简介：摘要目的探讨低氧对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)及其细胞外囊泡(EVs)生成的影响，初步阐述其调控机制。方法分离培养原代hUCMSCs，将其分为常氧组和低氧组，分别在常氧(21%O2)和低氧(5%O2)培养箱中培养，用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖，提取hUCMSCs生成的EVs，利用透射电子显微镜(TEM)和纳米颗粒示踪分析(NTA)进行鉴定，蛋白质印迹法(Western blot)检测EVs膜标志蛋白CD9和CD63表达，转录组高通量测序分析低氧对hUCMSCs表达谱的影响，Western blot分析细胞内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)和磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、以及磷酸化40×103大小的富含脯氨酸的Akt底物(p-PRAS40)的表达水平。两组间采用t检验进行统计分析。结果低氧处理hUCMSCs 24 h后，CCK-8结果显示低氧组吸光度值(2.151±0.116)高于常氧组(1.929±0.145)，差异有统计学意义(t＝2.659，P<0.05)；NTA检测结果显示低氧组EVs颗粒浓度[(13.714±1.704)×109/ml]高于常氧组[(1.271±0.573)×109/ml]，差异有统计学意义(t＝18.310，P<0.05)；低氧组EVs蛋白浓度(2.743±1.013)高于常氧组(0.403±0.303)，差异有统计学意义(t＝3.831，P<0.05)；Western blot结果显示低氧组EVs的CD9、CD63表达水平(4.092±1.711、1 162.225±573.901)高于常氧组(1±0，t＝3.005、3.505，P<0.05)。转录组高通量测序分析显示有1 429个基因存在显著表达差异，且主要富集于细胞因子相关通路。Western blot结果显示低氧组HIF-1α、Akt、p-Akt、p-Akt/Akt，以及p-PRAS40的表达水平(2.593±0.556、1.395±0.044、2.586±0.130、1.953±0.104、2.131±0.572)均高于常氧组(1±0)，差异有统计学意义(t＝3.098、4.246、4.059、3.149、2.799，P<0.05)。结论低氧可通过激活HIF-1α和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号通路促进hUCMSCs增殖和EVs生成。

简介：摘要细胞外囊泡（EV）作为一种新型的细胞间信号传导载体，几乎参与了肿瘤发生、发展、转移、耐药等各个环节。因此，EV已成为癌症诊断和抗癌治疗生物标志物的理想候选者和研究热点。但EV肿瘤标志物研究前期主要集中于RNA和蛋白质，少部分关注脂质，其DNA成分的相关研究较少。近年来EV DNA的肿瘤诊断价值才逐渐受到关注。对EV DNA生物学特性以及功能的研究有望为肿瘤诊断提供新方向。

简介：摘要细胞外囊泡（EVs）作为细胞间相互作用的基本方式之一，携带有大量生物学活性物质，在疾病诊断和治疗中显示出巨大的潜力。与组织活检相比，其检测具有无创、取样简便、可实时监测等优势，故EVs生物标志物的研究与临床应用已成为国际研究热点。本文对EVs在疾病诊断中的意义及其作为生物标志物的筛选策略与临床验证进行了梳理总结，鼓励加快疾病EVs生物标志物的筛选验证与检测技术的研发，进一步推进EVs生物标志物研究成果向疾病临床诊疗的转化应用。

简介：摘要目的探讨胰腺浆液性微囊腺瘤的不典型临床影像表现及诊治策略。方法回顾2008年7月至2019年10月北京协和医院收治的11例术前临床影像表现不典型的胰腺浆液性微囊腺瘤的患者资料，总结其临床表现、CT/MRI特点、术前临床诊断、手术方法、术后情况等。结果共纳入11例不典型微囊腺瘤患者，中位年龄50(46～66)岁，女性7例，男性4例，伴有腰腹痛者8例，体重下降者6例。术前影像学检查发现病变位于头颈部者8例，伴有胰胆管扩张7例，可疑血管侵犯3例，存在胰腺实质萎缩2例，表现为富血供实性占位3例，与胰管相通2例。术前拟诊为胰腺恶性肿瘤者4例，神经内分泌肿瘤3例，实性假乳头状瘤3例，导管内乳头状黏液肿瘤1例。所有患者均接受手术治疗，远端胰腺切除3例(其中2例应用Kimura法保脾)，胰十二指肠切除术3例，全胰切除1例，保留十二指肠的胰头切除2例，局部切除2例。所有患者无术后早期死亡。术后并发B级胰瘘2例，生化漏2例，术后腹腔出血1例，胃排空延迟2例，均经积极治疗后治愈。患者术后中位住院时间18(7～63)d。结论胰腺浆液性微囊腺瘤可伴有胆胰管扩张、实质萎缩，甚至血管侵犯等不典型侵袭性特征，掌握其不典型的临床影像表现有助于鉴别诊治。对于术前具有侵袭性影像学表现者，手术仍是主要的治疗方法之一。