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  • 简介:虽然临床和实验研究已经证实阻塞黄疸与败血症密切相关,但至今其机制尚未完全阐明。阻塞黄疸最重要的病理基础是黏膜屏障损伤导致的内毒素血症。近年来研究表明,主要影响因素与细胞紧密连接蛋白及其磷酸化有密切相关。

  • 标签: 阻塞性黄疸 肠黏膜屏障 紧密连接蛋白 磷酸化 内毒素血症
  • 简介:肠道微生态作为机体最重要的微生态系统,与糖尿病、肥胖症、肿瘤、易激综合征等疾病密切相关,但息肉的发生与肠道微生态的相关研究较少。我们通过对年龄、饮食、肥胖等因素的分析,揭示肠道微生态与息肉发生的相关,冀望有助于提高息肉的早期诊断率,降低肠癌的发生率。

  • 标签: 肠道微生态 结肠息肉 相关性
  • 简介:2009年3月在美国和墨西哥流感样患者的呼吸道标本中鉴定出新的猪甲型H1N1流感病毒。该病毒可人-人传播,已蔓延到112个国家和地区。为了遏制不断重组或重配的流感病毒,各国学者对甲型H1N1流感病毒的分子生物学特征、复制周期及实验室诊断做了细致的研究,以研发相应的药物或疫苗,这些成就为世界各国防控今年新鉴定的猪甲型H1N1流感病毒感染发挥了重要作用。现就猪甲型H1N1流感病毒的鉴定、基因组结构特征做一综述。

  • 标签: 猪源性甲型H1N1流感病毒 基因组 重配
  • 简介:按照人脑神经营养因子(hBDNF)基因成熟肽编码序列设计合成引物,从人基因组DNA中扩增出360bp的片段,插入到改构载体pTIG-trx上,获得了pTIG-trx-BDNF原核表达重组质粒,限制酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为hBDNF基因成熟肽编码序列.将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并对表达产物进行了分离纯化,得到纯度大于83%的样品,Western杂交证实该蛋白具有hBDNF抗原活性.

  • 标签: 重组人脑源性神经营养因子 可溶性表达 大肠杆菌 纯化 中枢神经系统退行性疾病
  • 简介:目的:为进一步研究CLP(coactosin-likeprotein)与5’-脂氧合酶、肌动蛋白的相互作用机制及功能,开展CLP克隆表达、分离纯化研究,以得到高纯度的CLP,并对其生物化学特性进行分析测定。方法:从人的胎肝cDNA文库中经PCR扩增得到CLP基因,克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中并获得高效表达,经过GlutathioneSepharose4B亲和层析和Su-perdex75分子筛纯化,得到高纯度的CLP;在此基础上进行SDS-PAGE、动态光散射和分析型超速离心等实验,并进一步分析实验结果。结果:CLP在溶液中主要以单体形式呈现;CLP的摩擦率为1.909,证实该蛋白质具有线性化趋势存在的可能,且线性化程度较高。结论:实验结果揭示了CLP作为线性化蛋白质的可能,为进一步搭建CLP和丝状肌动蛋白的作用模型奠定了一定的数据基础。

  • 标签: 人源CLP 表达 纯化 生化特性
  • 简介:利用植物表达系统生产外蛋白是一个有吸引力的廉价生产系统,它有可能替代外蛋白的发酵生产系统。本文对分子农业的意义、植物表达外蛋白的影响因素和植物生产外蛋白质的研究进展等方面作了论述

  • 标签: 分子农业 基因表达 异源蛋白
  • 简介:目的探讨中西医结合疗法治疗小儿腹泻的疗效.方法从2014年6月至2015年6月我院收治的腹泻患儿当中抽取84例作为临床研究对象,将患儿随机分为观察组和对照组,每组42例.对照组患儿采用西医疗法,观察组患儿采用中西医结合疗法.对比分析两组患儿的临床疗效.结果经比较分析,观察组患儿的治疗总有效率(92.86%)明显高于对照组(73.81%),比较结果具有显著差异性(P〈0.05);同时,观察组患儿的腹泻次数明显少于治疗前及对照组治疗后,大便恢复正常所耗时间明显短于对照组,比较结果具有显著差异性(P〈0.05).结论中西医结合疗法治疗小儿腹泻的临床疗效良好,值得推广使用.

  • 标签: 中西医结合 小儿腹泻 疗效
  • 简介:丝状真菌,俗称霉菌,在食品工业中被用于生产多种生物酶和有机酸。近年来,人们发现丝状真菌具有分泌量大、表达的蛋白有天然活性等特点,非常适合作为同源和异重组蛋白的表达宿主,因此被广泛研究和探讨。简要综述了以黑曲霉为代表的几种常被用作蛋白表达宿主的丝状真菌的特点、应用中的主要问题和基本解决方案,以及近年关于丝状真菌表达系统的最佳培养条件和发酵条件的研究进展。

  • 标签: 丝状真菌 黑曲霉 异源表达
  • 简介:乳酸克鲁维酵母已成功地应用于多种异蛋白的表达生产之中。与其他酵母相比,乳酸克鲁维酵母具有许多优点,如超强的分泌能力,良好的大规模发酵特性、食品安全的级别及整合表达能力等,其作为宿主系统表达药用蛋白也已显示出巨大的潜力。从不同的菌属、遗传工程和分子生物学技术(如启动子、表达载体)等方面简要综述了乳酸克鲁维酵母作为蛋白表达宿主系统的优势。

  • 标签: 乳酸克鲁维酵母 异源重组蛋白 生物技术
  • 简介:粘膜免疫是机体防御系统的主要成分.致病细菌侵入机体后,首先遭遇到天然免疫的抵抗,随后产生获得免疫,两者共同执行机体的防御功能,消灭入侵细菌.最近的研究表明上皮细胞对细菌感染有重要的免疫调节作用,在天然免疫与获得免疫防御机制中起重要作用.本文重点介绍上皮细胞在天然免疫中的作用.

  • 标签: 肠粘膜上皮细胞 天然免疫 作用 粘膜免疫
  • 简介:伴随着一系列重大生物技术(如PCR技术、抗体库技术、转基因动物技术等)的发展,抗体技术从最初的嵌合抗体、改型抗体逐渐发展为今天的人化抗体。人化抗体在治疗肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等方面已经显示出独特的优势和良好的应用前景。介绍了人化抗体的构建及其表达系统,并对其临床应用进行了展望。

  • 标签: 嵌合抗体 人源化抗体 噬菌体展示技术 转基因技术
  • 简介:产生免疫原性的残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv片断进行了人化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基的差异,将有差异的鼠表面残基换成人的。提出了残基最高频率人化及最相似链人化两种人化方案。人化后鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv的结构经Profile-3D验证是合理的,置换的表面残基溶液可及未变,且未影响CDRs的结构,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人化实验研究奠定了基础。

  • 标签: 单克隆抗体 人源化 表面再塑 分子设计
  • 简介:目的:检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外基因的拷贝数及ATⅢ蛋白的表达量,分析拷贝数与蛋白表达量的相关。方法:用Primer5.0软件设计外基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH的引物,以倍比稀释的标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,通过标准曲线计算外基因拷贝数;通过酶显色底物法检测ATⅢ蛋白的含量。结果:依据ATⅢ和GAPDH基因标准曲线方程计算得到的山羊个体间外基因的拷贝数相差很大,最少的为5,最多为25,且不同转基因山羊间ATⅢ表达水平的差别达10倍以上。结论:外基因表达水平在受到拷贝数的影响外,也受到整合位点等其他因素的重要影响。

  • 标签: 抗凝血酶Ⅲ 基因拷贝数 蛋白表达量 转基因 山羊
  • 简介:目的:研究抗人表皮生长因子受体2(HER2)人化单克隆抗体能否在毕赤酵母中表达,并对表达产物进行结构分析和活性测定。方法:合成抗HER2人化单克隆抗体的全基因,构建轻重链双表达盒表达载体,转入毕赤酵母中;通过表型筛选和诱导表达实验得到抗体表达工程菌,对表达产物进行分离纯化和活性测定。结果:表达产物存在于表达上清中,摇瓶表达水平达到53.7±2.9mg/L;毕赤酵母表达的抗体的轻重链能够自发通过二硫键装配成正确的抗体结构,其中重链发生了N-糖基化;酵母表达的抗HER2人化单克隆抗体可以抑制高表达p185erbB2肿瘤细胞SKBR-3的生长,半数有效浓度为0.17mg/L。结论:实现了抗HER2人化单克隆抗体在毕赤酵母中的表达,为毕赤酵母表达系统成为抗体等人用剂量较大的复杂型糖蛋白的大规模、低成本制备平台提供了基础。

  • 标签: 基因工程抗体 抗HER2人源化单克隆抗体 毕赤酵母
  • 简介:在真核生物的基因中,mRNA选择剪接现象十分普遍。mRNA选择剪接导致一个基因多转录本的产生,被认为是高等生物增加蛋白质多样的主要机制,且已发现与许多人类疾病密切相关。发现这些转录本的选择剪接位点、新的外显子和外显子组合,乃至获得这些剪接变异体的完整克隆,对于基因功能的深入研究十分必要。简要介绍了几种在mRNA水平探索选择剪接的方法。

  • 标签: 选择性剪接 剪接变异体 表达序列标签 MRNA RT-PCR
  • 简介:急性闭合跟腱损伤是临床上一种较常见的运动创伤,据文献统计,跟腱损伤的发病率为0.18‰,而且在逐渐上升。然而在运动过程中,特别是剧烈弹跳的一瞬间,跟腱容易发生断裂。跟腱损伤后病人需长周期的治疗,以此给社会带来了巨大的经济损失和自身健康并发症。因此,跟腱损伤的治疗和康复显得尤为重要。很多学者已经做出了有益的探索,也取得了显著的成果,但总的来说方法很多,问题却没有得到解决,对闭合跟腱断裂尚未形成一套明确有效的治疗方案。本文就急性闭合跟腱断裂治疗的有关研究进展作以下综述,以期待对临床实践有所帮助。

  • 标签: 急性 跟腱 断裂 闭合性 综述
  • 简介:作为一种具有靶向性的生物大分子,单克隆抗体始终是人们关注的热点之一,被广泛用于治疗肿瘤、病毒感染和抗移植排斥等.但鼠单克隆抗体的临床应用受限于诱导产生人抗鼠抗体、肿瘤渗入量低、亲和力低和半衰期短等.随着分子生物学技术的发展及其向各学科的渗透,通过基因操作技术对抗体进行改造,可使其适用于多种疾病的治疗.抗体人化已经成为治疗抗体的发展趋势,同时各种抗体衍生物也不断涌现,它们从不同角度克服了抗体本身的应用局限,也为治疗人类疾病提供了利器.本文简要介绍上述技术的基本原理、特点和治疗抗体的研究进展.

  • 标签: 治疗性抗体 单克隆抗体 噬菌体展示技术
  • 简介:随着时代的进步,社会的发展,人们的生活水平越来越高,近几年来,我国的科学技术水平在不断提升,国家的经济状况有了新貌,人们的生活水平也在不断提高,同时,对身心健康的要求标准也在改变,在家庭中,每一个家庭成员都是一个家庭的核心,家人也都非常重视他们的健康.因此,医护研究人员要更加深入地研究医学护理,目前,酒精肝病的临床护理的过程中产生的安全问题逐渐增多,这些问题由很多的因素造成,也给医院以及患者和患者家属带来许多难题.所以,在酒精肝病的临床护理工作中,我们一定要找出影响护理安全的因素,采取一切有效措施来解决这些问题,也能有效地避免许多不必要的护理纠纷,提高医院的社会信誉度,加快患者的恢复进程.本文就影响酒精肝病的临床护理安全的因素进行了简要的阐述,并且对此提出了相应的解决措施,希望对有效防护酒精肝病的护理工作中安全问题能够有所帮助.

  • 标签: 酒精性肝病 临床护理 医院
  • 简介:在总结对流天气特征的基础上,针对对流天气的影响因子进行了分析,其中主要有对流不稳定,水汽条件,垂直抬升运动,500hPa高度槽,切变线,地面锋,地形抬升作用等等,而对流天气的发生必须满足的一般条件就是:水汽条件,不稳定条件,抬升运动条件。在前人对对流天气的研究中,都各自用了不用的分析方法(包括合成分析,统计分析,趋势分析),从不同的角度,不同层面解释了对流天气促发机制。文章描述了对流天气发生的背景、对流天气的诊断、雷达资料在对流天气监测与预报方面的应用及对流天气预报的发展。

  • 标签: 对流性天气 背景流场 物理量场