简介：目的：构建人snail基因真核表达载体并鉴定。方法：使用RT-PCR法获取人snail基因全长cDNA,经BamHI、EcoRI双酶切、连接,插入pcDNA3.1（＋）真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒在真核细胞内的表达。结果：pcDNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段与NCBIGenBank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染后snail蛋白表达量明显增高。结论：成功构建pcDNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础。

简介：内源性阿片肽（EOP）作为一类重要的神经递质发挥着许多生物学效应，而在痛觉信息的传递和调节过程中发挥的重要作用最为显著，这些结果将可能为疼痛治疗开辟新天地。本文就近年来EOP的研究进展，特别是关于它们在神经系统内的分布，组成，阿片受体的特点，疼痛调节的特点及其机制等方面作一综述。

简介：细菌人工染色体（Bacterialartificialchromosome，BAC）是在大肠杆菌F质粒的基础上建成的高容量、低拷贝的质粒载体。BAC载体已广泛应用于基因组文库的构建及筛选、基因组测序、新基因的发现、图位克隆、BAC微阵列、转基因和动物品种资源保存等方面。本文综述了BAC载体的发展及其应用。

简介：近日，中科院昆明动物研究所研究员赖仞带领的课题组发现。提口自金环蛇毒液的抗茵肽对痤疮有良好的治疗作用。该研究成果为抗菌肽的进一步开发利用打下重要基础。部分研究成果发表于《公共科学图书馆一综合》（PLoSONE）上。

简介：目的：研究细菌内同源重组法构建靶向Survivin的腺病毒载体及其体外扩增表达。方法：将survivin基因克隆至穿梭质粒载体中,特异性酶切后回收、连接、转化,构建负载survivin片段的重组腺病毒载体。提取重组病毒基因酶切鉴定后,包装成病毒,并扩增到所需滴度。行Westernblotting鉴定,观察重组腺病毒载体在真核细胞的表达。结果：（1）重组穿梭质粒的MluI酶切鉴定结果显示,酶切结果均与相应的载体及目的片段的大小相符合,基因测序结果基本一致。（2）凝胶电泳产生了两条大约15kb和8.5kb的片段,由图2可知重组腺病毒质粒酶切充分完全,且回收率较高。（3）重组腺病毒载体转染AD293细胞24h后已出现细胞病变效应,病变细胞细胞核变大。（4）D260/OD280的值为1.92,表明重组腺病毒纯度较高。（5）AD293细胞病毒上清中有能与抗Survivin单抗反应的蛋白,其相对分子质量与理论值相吻合,阴性对照组无对应条带出现。结论：本方法成功构建表达了含Survivin的重组腺病毒载体,为进一步进行Survivin基因功能的研究提供了实验基础和理论支持。

简介：目的：探讨核质双向转运蛋白Importin13（IPO13）在翼状胬肉中的表达及意义。方法：收集2015年1月至2015年6月在中南大学湘雅医院眼科门诊确诊为＂翼状胬肉＂并行手术切除患者标本5例作为翼状胬肉组,收集人正常球结膜组织5例作为人正常结膜组织组,采用免疫组织化学方法检测两组结膜上皮和翼状胬肉组织IPO13、核转录因子p63、ABCG2、CD133的表达。结果：IPO13及p63表达定位于结膜上皮和翼状胬肉组织上皮基底细胞核内,ABCG2表达定位于结膜上皮和翼状胬肉上皮基底细胞层细胞浆及细胞膜,CD133表达定位于结膜上皮和翼状胬肉上皮基底细胞层细胞膜。IPO13、p63、ABCG2及CD133在人正常结膜组织中均呈低表达（光密度OD值IPO13：0.43±0.30;p63：139.09±40.15;ABCG2：63.63±22.56;CD133：70.31±33.41）;在翼状胬肉中表达均明显增高（OD值IPO13：155.1±21.80;p63：617.35±87.43;ABCG2：214.03±34;CD133：201.05±46.38）。两组之间差异显著（IPO13：t’=15.87,P〈0.005;p63：t’=11.92,P〈0.005;ABCG2：t=8.15,P〈0.005;CD133：t=5.08,P〈0.005）。结论：IPO13、p63、ABCG2及CD133在翼状胬肉中高表达提示其可能在翼状胬肉异常增殖性病变中起着正向调控作用。

简介：中国科学院生物物理研究所江涛研究员领衔的科研小组在肉碱膜转运蛋白CaiT三维结构研究方面取得最新的进展，相关成果文章刊登在3月28的《自然一结构与分子生物学》（NatureStructural＆MolecularBiology）上。

简介：目的：明确血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的变化能否预测婴幼儿先心病术后急性肺损伤（ALI）的发生。方法：纳入2013年10月至2014年5月年龄≤36月的先心病合并肺动脉高压的婴幼儿患者的相关资料,检测体外循环（CPB）术后2h、12h、24h、48h和72h的血浆NGAL水平,分析NGAL与术后发生ALI之间的关系。结果：本研究共纳入患者61例,术后发生ALI患者9例（14.8%）。所有患者CPB术后5个时间点的变化趋势为：CPB术后2hNGAL浓度开始升高,均值为27.28μg/L,至12h达到最高峰,均值为30.61μg/L,24h开始下降;其中12h、24h和72h与前一时间点比较均具有显著性差异（P〈0.05）。进一步分组显示,NGAL浓度变化趋势主要在ALI组：ALI组患者12h、24h、48h和72h的NGAL浓度与前一个时间点比较,变化均具有显著差异（P〈0.05）,NGAL峰值浓度出现在12h,其均值为40.82μg/L;而无ALI组患者NGAL浓度只在24h和12h之间比较有显著差异（P〈0.05）;ALI组患者5个时间点的NGAL浓度均比无ALI组患者高,具有显著性差异（P〈0.05）。结论：血浆NGAL在早期预测婴幼儿体外循环术后发生ALI可能具有重要作用。

简介：目的：研究从噬菌体展示库中筛选内毒素结合蛋白质配基，为其在内毒素致病作用机理及在内毒素血症防治研究中的应用奠定基础。方法：以内毒素为靶分子从随机七肽噬菌体展示库中筛选内毒素的高亲和力噬菌体配体，通过ELISA鉴定，DNA测序及相关软件分析。结果：所筛选的亲和力最高的噬菌体的ELISA检测值A405nm可达1.965通过比较亲和性噬菌体外源插入肽的DNA序列，认为FHENWPS肽段中包含有与内毒素分子发生亲和结合的一个共有序列。该序列展示肽的等电点为5.36，具有双嗜性，这有利于肽与LPS分子表面的位点相互作用从而产生亲和吸附。结论：运用亲和筛选方法从肽库中筛选内毒素结合蛋白质配基是可行的。

简介：目的：构建含Ubc9的逆转录病毒表达载体,筛选建立携带该基因的高滴度产毒细胞系,深入研究SUMO化修饰的作用。方法：聚合酶链反应（PCR）扩增获取目的基因Ubc9,定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVneo,形成重组质粒pMSCV-Ubc9;脂质体法将pMSCV-Ubc9转染逆转录病毒包装细胞PT67;G418筛选产毒细胞克隆,扩大培养产毒细胞克隆,收获病毒感染NIH3T3细胞。结果：限制性酶切和测序鉴定证实Ubc9正确插入逆转录病毒表达载体。G418筛选获得稳定产毒的抗性细胞克隆,收获病毒能有效感染NIH3T3细胞。结论：携带Ubc9基因的重组逆转录病毒表达载体pMSCV-Ubc9构建成功,转染PT67细胞后包装出重组逆转录病毒,进而筛选获得了能转录表达Ubc9的产毒细胞系PT67-Ubc9。

简介：目的：探讨血浆hs-CRP、IL-18及和肽素（copeptin）与冠心病类型的关系及临床意义。方法：36例对照组,41例稳定型心绞痛（SA）组,43例不稳定性心绞痛（UA）组,48例急性心肌梗死（AMI）组,均符合缺血性心肌病的诊断标准。采用免疫比浊法测定hs-CRP水平;采用放射免疫法测定血浆和肽素;采用双抗体夹心ELISA法测定血浆IL-18水平。结果：UA组与AMI组WBC、NEU、hs-CRP、IL-18、和肽素水平显著高于正常对照组（P〈0.05）;与UA组比较,AMI组的hs-CRP、IL-18水平显著升高;IL-18与TG、LDL-c、hs-CRP及和肽素呈正相关（P〈0.05）,与HDL-c呈负相关（P〈0.05）。结论：血浆和肽素与IL-18水平随着冠心病严重程度的增加而升高,其水平变化对冠心病的诊断、病情的严重程度、临床危险分层具有一定的临床意义。

简介：目的：在pEGFP-C2真核表达载体中表达人NDRG2基因的截短部分并进行鉴定。方法：以含有人NDRG2基因的pGKBT7质粒为模板，通过PCR的方法扩增获得截短的人NDRG2基因，然后克隆入表达载体pEGFP-C2；以荧光显微镜观察和WesternBlotting方法对表达产物进行鉴定。结果：表达产物中在分子量67kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带，该条带可被Ndrg2单克隆抗体特异性识别。结论：构建了截短的人NDRG2基因真核表达载体，并在真核细胞中（HEK-293）获得成功表达。

简介：目的：探讨BNP和D二聚体对老年心功能不全严重程度的关系及预后的影响。方法：以2010年1月-2012年12月来我院就诊的慢性心功能不全患者为观察对象，根据心功能不全程度分为无症状组、心功能不全II级、III级、IV级3，另取健康体检者为对照，比较各组间BNP、D二聚体水平及相关性分析。结果：各患者组BNP和D二聚体水平与对照组相比明显增加（P〈0．05）；BNP与心功能不全分级、LVEDD、LAD呈直线正相关关系（P〈0．05），与LVEF呈直线负相关关系（P〈0．05）；D二聚体与心功能不全分级、LVEDD呈直线正相关关系（P〈0．05），与LVEF呈呈直线负相关关系（P〈0．05），与LAD直线关系无统计学意义（P〉0．05）；BNP水平1000pg／mL以下治疗有效率80．2％，疗效优于1000pg／mL以上者（Riditz=15．245，P=0．000），D二聚体5μg／mL以下者治疗有效率85．4％，疗效优于5μg／mL以上者（Riditz=26．354，P=0．000）。结论：BNP和D二聚体与老年心功能不全严重程度和超声心动图指标密切相关，可以作为疾病预后预测。

简介：目的：探讨前外侧与后外侧路小切口髋关节置换术治疗老年股骨颈骨折临床疗效。方法：选取我院创伤骨科老年股骨颈骨折患者92例，随机分为两组，A组46例，予以后外侧路小切口髋关节置换术治疗；B组46例，予以前外侧小切口髋关节置换术治疗。记录并比较两组患者手术临床资料、术后并发症情况，采用Harris评分评价术后关节功能，调查问卷调查术后满意度。结果：①A组患者手术切口长度、手术时间、术中出血量和术后引流量明显小于B组患者，差异有统计学意义（P〈0．05）；然两组患者住院时间相比无明显差异（P〉0．05）；②A组术后关节功能与B组相比较，无明显差异（P〉0．05）；而A组术后并发症发生率明显低于B组，差异有统计学意义（P〈0．05）；③A组的患者术后满意率明显高于B组，差异有统计学意5C（P〈0．05）。结论：前外侧和后外侧路小切口髋关节置换术治疗老年股骨颈骨折临床疗效相似，但后外侧路小切口操作简便，能够缩短手术时间、减少手术出血量、降低术后并发生症发生，患者满意度较高，对老年股骨颈骨折治疗临床价值较高。

简介：在诸多人类神经病学和精神病学疾病比如慢性疼痛、焦虑和癫痫中，氯化钾膜蛋白KCC2的活性都是降低的。本周《自然-医学》上发表的一项研究发现，一种新研制的小分子可以增强KCC2活性并缓解大鼠的慢性疼痛。这项发现意味着治疗疼痛以及其他因KCC2活性降低而产生的疾病有了一种潜在的治疗方法。

简介：目的：探究培美曲塞联合顺铂化疗对晚期非小细胞肺癌患者疗效及血清肿瘤标志物的影响。方法：选取于2012年7月-2016年2月期间我院收治的89例非小细胞肺癌患者为研究对象,采用随机数字法将研究对象分为观察组（45例）和对照组（44例）;观察组采用培美曲塞联合顺铂化疗,对照组采用多西他赛联合顺铂化疗,观察并比较两组患者治疗前后细胞角质素片段抗原（CYRAF211）、血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）表达水平。结果：观察组疗效优于对照组,比较有统计学差异（Z=1.940,P=0.026）,观察组治疗的总有效率（55.66%）显著高于对照组（36.37%）,差异有统计学意义（χ^2=5.432,P=0.034）;化疗后,两组CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE水平均较化疗前较有显著下降,同时观察组各指标水平均显著低于对照组（P〈0.05）;化疗前,Ⅲ期患者肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE水平均显著低于Ⅳ期患者（P〈0.05）;化疗后,Ⅲ期和Ⅳ期患者肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE水平较治疗前均有显著降低（P〈0.05）,且Ⅲ期水平显著低于Ⅳ期（P〈0.05）。结论：培美曲塞联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌具有显著疗效,血清CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE水平经化疗后显著降低,可作为分期和评价化疗疗效的可靠指标。