简介：摘要目的观察1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus, T1DM)患者外周血IL-35的表达及其对Th9细胞的调控作用。方法入组31例T1DM患者和13例对照者，分离血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)。ELISA检测血浆IL-35和IL-9水平，实时定量PCR法检测PBMCs中IL-35亚基EBI3和IL-12p35亚基以及Th9转录因子PU.1 mRNA相对表达量，流式细胞术检测PBMCs中Th9细胞比例。使用重组人IL-35刺激T1DM患者和对照者PBMCs，CCK-8法检测细胞增殖，并检测Th9细胞比例、PU.1 mRNA相对表达量、IL-9分泌水平的变化。分选11例T1DM患者PBMCs中的CD4+CCR4－CCR6－CXCR3－细胞和CD8+T细胞，使用重组人IL-35刺激CD4+CCR4－CCR6－CXCR3－细胞，将104个CD4+CCR4－CCR6－CXCR3－细胞与105个CD8+T细胞共培养，ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α水平，酶联免疫斑点试验检测CD8+T细胞分泌穿孔素和颗粒酶B水平。组间比较采用t检验、配对t检验或LSD-t检验。结果T1DM患者血浆IL-35水平低于对照组[(67.13±9.94)pg/ml vs (97.77±23.61)pg/ml，P<0.000 1]。T1DM患者PBMCs中EBI3和IL-12p35 mRNA相对表达量低于对照组(P<0.000 1)。T1DM患者外周血Th9细胞比例高于对照组[(3.47±0.99)% vs (2.76±0.75)%，P＝0.029]，PU.1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.000 1)，血浆IL-9水平亦高于对照组[(99.08±11.85)pg/ml vs (86.38±12.72)pg/ml，P＝0.002 8]。IL-35对T1DM患者和对照组PBMCs的增殖水平无显著影响(P>0.05)。IL-35刺激后，T1DM患者Th9细胞比例和PU.1 mRNA相对表达量降低(P<0.01)，但对照组Th9细胞比例和PU.1 mRNA相对表达量无显著性变化(P>0.05)。IL-35刺激后，T1DM患者和对照组PBMCs分泌IL-9水平均显著降低(P<0.01)。CD4+CCR4－CCR6－CXCR3－细胞促进T1DM患者CD8+T细胞分泌IFN-γ、TNF-α、穿孔素和颗粒酶B(P<0.05)，但IL-35刺激CD4+CCR4－CCR6－CXCR3－细胞后，其诱导的CD8+T细胞分泌IFN-γ、TNF-α、穿孔素和颗粒酶B的能力降低(P<0.05)。结论T1DM患者中IL-35表达降低，无法有效发挥免疫抑制活性，导致Th9细胞活性增强，造成T1DM免疫炎症损伤。

简介：摘要目的探讨重组人突触融合蛋白4(STX4)对脂多糖(LPS)诱导的胰岛β细胞INS-1损伤影响。方法胰岛β细胞INS-1分成Control组(空白对照)、LPS组(LPS处理)、LPS+NC组(转染阴性对照载体，LPS处理)、LPS+STX4组(转染pcDNA-STX4，LPS处理)，RT-qPCR和Western blot检测STX4 mRNA和蛋白质表达，流式细胞术检测凋亡，DCFHDA法检测活性氧簇(ROS)水平、黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平、钼酸铵比色法检测过氧化氢酶(CAT)水平、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平，ELISA法检测细胞分泌的白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和葡萄糖条件下胰岛素分泌水平，Western blot法检测Cleaved Caspase-3、Bax、p65蛋白质表达。用NF-κB信号通路激活剂处理上调STX4后的胰岛β细胞INS-1，给予LPS刺激，同样利用上述方法测定细胞凋亡、ROS、SOD、GSH-Px、CAT、MDA水平和分泌的IL-1β、TNF-α、胰岛素水平以及Cleaved Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p65蛋白质水平。结果与Control组比，LPS组胰岛β细胞中STX4 mRNA和蛋白质表达均减少，细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平均升高，SOD、GSH-Px、CAT水平均降低，细胞分泌的IL-1β、TNF-α水平均升高，细胞分泌的胰岛素水平降低，Cleaved Caspase-3、Bax、p65蛋白质表达水平也升高。NF-κB信号通路激活剂处理逆转上调STX4对LPS条件下胰岛β细胞凋亡、ROS、SOD、GSH-Px、CAT、MDA水平和分泌的IL-1β、TNF-α、胰岛素水平以及Cleaved Caspase-3、Bax、p65蛋白质水平影响。结论上调STX4抑制LPS诱导的胰岛β细胞氧化损伤、细胞凋亡和炎症因子释放，机制与降低NF-κB信号通路激活水平有关。

简介：摘要目的探讨脑胎盘率对延期妊娠引产发生不良围产结局的预测作用。方法回顾性纳入2019年1月1日至2020年4月30日在重庆医科大学附属第一医院因延期妊娠（≥孕41周）引产的单胎妊娠孕妇315例。按照是否出现不良围产结局（因持续异常胎心监护需紧急分娩、出生时脐动脉血pH<7.2、5 min Apgar评分<7分、生后转入新生儿重症监护病房、发生绒毛膜羊膜炎以及中转剖宫产）分为不良围产结局组（76例）和良好围产结局组（239例）。采用两独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ2检验比较组间一般情况及引产前最后一次超声测量的胎儿脐血流、大脑中动脉血流和脑胎盘率的差异，绘制受试者工作特性曲线分析各血流指标对不良围产结局的预测作用，采用多因素logistic回归分析筛选最终有意义的预测指标。结果不良围产结局组脐动脉搏动指数（0.9±0.1与0.8±0.1，t=-5.458，P<0.001）和脑胎盘率异常（<1.0）比例高于良好围产结局组[21.1%（16/76）与6.3%（15/239），χ2=14.190，P<0.001]，大脑中动脉搏动指数（1.1±0.2与1.3±0.3，t=5.658，P<0.001）和脑胎盘率低于良好围产结局组（1.2±0.3与1.6±0.5，t=8.940，P<0.001）。脐动脉搏动指数、大脑中动脉搏动指数和脑胎盘率预测不良围产结局的受试者工作特性曲线下面积分别为0.71、0.71和0.77。脑胎盘率的灵敏度（0.74）高于脐动脉搏动指数（0.68）和大脑中动脉搏动指数（0.71），但三者的特异度相近，分别为0.67、0.66和0.66。多因素回归分析显示只有脑胎盘率是不良围产结局的独立危险因素（OR=0.028，95%CI：0.010~0.080，P<0.001）。结论脑胎盘率作为早期预测延期妊娠发生不良围产结局的指标具有较高的灵敏度，但特异度稍差。