简介:摘要目的基于危害分析与关键控制点原理(Hazard Analysis and Critical Control Point,HACCP),构建研究者发起的临床研究项目全流程管理指标体系。方法根据HACCP原则制订计划,邀请23名专家组成专家咨询小组,采用文献研究、专题小组讨论、德尔菲法采集临床研究项目过程管理指标,并运用层次分析法AHP计算各项指标权重。结果两轮咨询专家积极系数和专家权威程度高,最终形成了3个一级指标,14个二级指标。一级指标分别为"项目立项"、"项目过程管理"和"项目结题考核",权重分别为0.142 8、0.714 4和0.142 8。结论本研究基于HACCP理论从项目立项、项目过程管理、项目结题考核3个维度建立管理指标体系,依据二级指标权重开展临床研究精准管理,重视权重大的指标管理内容,为研究者发起的临床研究管理提供重要参考依据。
简介:摘要:高中数学课改实施分层教学是一项重要的教学改革措施,旨在更好地满足学生的学习需求和提高他们的数学学习效果。通过将学生按照数学水平分为不同层次,为每个层次提供相应的教学内容和活动,可以更好地发挥学生的潜力和优势。通过分层教学,每个学生可以得到适当的教育,同时教师也能更有针对性地进行教学,促进学生个性化的学习。高中数学课改实施分层教学是提高数学教学质量的有效途径,能够满足学生的差异化学习需求,培养学生的潜力,促进数学学科的发展。
简介:摘要目的构建并拯救增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)标记的EGFP-EV-A71重组病毒。方法利用重叠PCR技术,以pMD19T-SDLY107全长质粒为模板,将2A蛋白酶识别序列加入到结构蛋白VP4的5′端;以pEGFP-N1质粒作为模板,扩增获得EGFP目的片段,将其插入到上述重组质粒中,得到重组质粒pMD19T-107-EGFP。经酶切和体外转录后,转染横纹肌细胞肉瘤(RD),拯救获得重组病毒EGFP-EV-A71。采用Karber法计算细胞培养半数感染量(CCID50)以测定病毒滴度。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同时间点的病毒复制水平,并绘制病毒复制曲线,比较重组病毒与母本病毒的复制力有无差异。乳酸脱氢酶(LDH)和细胞增殖(CCK-8)实验分别测定被感染细胞的细胞损伤率和存活率。结果包含EGFP的重组EV-A71感染性cDNA克隆被成功构建;转染RD细胞后,出现典型的细胞病变并且表达出较强的绿色荧光;重组病毒与母本病毒具有相似的复制动力学特征和致细胞病变效应。结论成功拯救了EGFP标记的重组病毒EGFP-EV-A71。