简介：摘要目的探讨瑞博西林（Ribociclib）在脓毒症急性肾损伤（AKI）炎症反应中的作用及可能机制。方法①按随机数字表法将20只成年雄性C57BL/6小鼠分为假手术组（Sham组；只开腹，不结扎盲肠、穿孔，假手术前12 h灌胃乳酸钠缓冲液）、瑞博西林对照组（只灌胃瑞博西林150 mg/kg）、盲肠结扎穿孔术（CLP）致脓毒症模型组（CLP组；CLP术前12 h灌胃乳酸钠缓冲液）和瑞博西林预处理组（CLP术前12 h灌胃瑞博西林150 mg/kg），每组5只。各组于术后12 h取肾组织，采用苏木素-伊红（HE）染色后观察肾组织病理学改变；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肾组织匀浆和细胞培养基上清液中炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素- 6（IL-6）水平；用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测周期相关蛋白磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白（p-Rb）、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达。②用TCMK-1肾小管上皮细胞株进行体外验证实验，将细胞分为空白对照组、瑞博西林组（5 μmol/L瑞博西林处理24 h）、脂多糖（LPS）组（200 mg/L的LPS培养基处理6 h）、瑞博西林+LPS组（用5 μmol/L瑞博西林处理18 h后更换为含有5 μmol/L瑞博西林和200 mg/L LPS的培养基联合处理6 h）。采用ELISA法检测上清液中炎性因子水平，用Western Blot检测细胞中p-Rb、Bcl-2、Bax、自噬相关蛋白微管关联蛋白1轻链3b（LC3bⅡ、LC3bⅠ）和p62、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）表达。结果①动物实验显示，与Sham组相比，CLP可显著损伤小鼠肾脏组织，增加肾组织TNF-α、IL-6水平，降低肾组织p-Rb表达和Bcl-2/Bax比值；而瑞博西林对照组各指标与Sham组比较差异无统计学意义。与CLP组相比，瑞博西林预处理后小鼠肾组织损伤明显改善，病理学评分明显降低（分：1.48±0.16比2.68±0.16，P<0.01），肾组织炎性因子水平显著降低〔TNF-α（ng/g）：340.55±34.96比745.08±58.86，IL-6（mg/g）：17.33±1.01比114.20±20.49，均P<0.01〕，p-Rb表达进一步下降（p-Rb/β-tubulin：0.14±0.01比0.73±0.06，P<0.01），Bcl-2/Bax比值增加（0.89±0.06比0.62±0.10，P<0.01）。②体外实验显示，与空白对照组相比，LPS可导致TCMK-1细胞释放TNF-α和IL-6增加，p-Rb表达降低，Bcl-2/Bax比值和LC3bⅡ/Ⅰ比值减小，p62、p-AKT和p-mTOR表达升高；瑞博西林处理TCMK-1细胞可使p-Rb表达下降。与LPS组相比，瑞博西林+LPS组TCMK-1细胞释放TNF-α和IL-6减少〔TNF-α（ng/L）：2.73±0.23比4.96±0.10，IL-6（ng/L）：36.05±5.83比53.78±24.08，均P<0.01〕，p-Rb表达进一步降低（p-Rb/β-tubulin：0.25±0.05比0.65±0.05，P<0.01），Bcl-2/Bax比值和LC3bⅡ/Ⅰ比值增加（Bcl-2/Bax比值：1.01±0.07比0.73±0.05，LC3bⅡ/Ⅰ比值：2.08±0.31比1.04±0.01，均P<0.05），p62、p-AKT和p-mTOR表达降低（p62/β-tubulin：0.59±0.01比1.09±0.08，p-AKT/β-tubulin：0.61±0.03比1.20±0.06，p-mTOR/β-tubulin：0.50±0.05比1.15±0.08，均P<0.01）。结论瑞博西林预处理可减轻脓毒症致AKI，mTOR/AKT通路可能参与了瑞博西林对肾脏的保护作用。