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  • 简介:摘要目的探讨自噬标志基因Beclin1过表达对黑素瘤SK-MEL-2细胞生物学行为的影响。方法Western印迹技术检测黑素瘤细胞A375、SK-MEL-2中Beclin1的蛋白表达水平,选取低表达Beclin1蛋白的SK-MEL-2细胞株作为研究对象,将细胞分为空白组、阴性对照组、实验组,空白组不作处理,阴性对照组转染pcDNA.3.1/myc-His(-)A,实验组转染pcDNA3.1-Beclin1质粒。培养一定时间后,采用CCK8法分析Beclin1对细胞增殖的影响;Transwell实验和细胞划痕实验观察Beclin1过表达对SK-MEL-2细胞侵袭和迁移能力的影响。采用重复测量方差分析和完全随机设计方差分析检验各组间的指标差异,组间比较采用LSD-t检验。结果SK-MEL-2细胞Beclin1蛋白相对表达水平(0.037 ± 0.010)显著低于A375细胞(0.670 ± 0.150),F = 46.62,P<0.05。实验组Beclin1蛋白相对表达水平(0.32 ± 0.04)显著高于阴性对照组(0.06 ± 0.02)和空白组(0.07 ± 0.02),均P<0.05。CCK8实验结果显示,不同组间、不同时间细胞增殖率差异均有统计学意义(F组间 = 1 077.36,F时间 = 4 903.04,均P<0.05),组别和时间之间有交互作用(F交互 = 205.20,P<0.05)。Transwell实验显示,24 h后实验组高倍(× 200)视野下穿过小室的细胞数(18.67 ± 1.19)明显低于阴性对照组(87.89 ± 6.05)和空白组(86.78 ± 5.93),均P<0.05;划痕实验中24、48 h时实验组细胞迁移距离均显著低于空白组和阴性对照组(P<0.05)。结论Beclin1过表达可显著抑制SK-MEL-2细胞的增殖、侵袭和迁移。

  • 标签: 自噬 黑色素瘤,实验性 细胞增殖 细胞迁移分析 Beclin1