简介：摘要目的建立小鼠神经源性膀胱动物模型，探讨纤维连接蛋白1(FN1)的变化及微小RNA(miRNA，miR)-1a-3p的作用机制。方法C57BL/6J雌性7周龄小鼠40只(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)，分为模型组和对照组，模型组皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白及结核分支杆菌，并48 h腹腔注射百日咳毒素；对照组皮下注射生理盐水。观察小鼠排尿频次、排尿量等变化。处死小鼠并取膀胱组织，模型组和对照组各选取3只膀胱进行高通量测序。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠膀胱组织中FN1和miR-1a-3p的变化。多组计量资料采用One-way ANOVA。结果对测序结果进行分析，随着泌尿系统症状加重，FN1增加(4.569±0.426，t＝－5.142，P<0.01)，而miR-1a-3p减少(1.623±0.312，t＝－3.945，P<0.05)，差异有统计学意义。与对照组比较，模型组膀胱组织中FN1的mRNA[2.501(1.301，4.251)，F＝99.183，P<0.01]和蛋白[2.937(1.174，4.262)，F＝63.834，P<0.01]表达均上调，差异有统计学意义，而miR-1a-3p[2.401(1.250，3.001), F＝35.951，P<0.01]表达下调，差异有统计学意义；双荧光素酶基因报告表明FN1为miR-1a-3p的直接靶基因(0.514±0.027，t＝13.355，P<0.01)，差异有统计学意义。结论神经源性膀胱动物模型出现尿频、尿急、尿潴留等症状，且FN1表达明显上调，而miR-1a-3p表达下调，因此miR-1a-3p可能通过对FN1调控参与神经源性膀胱发生发展。

简介：摘要本文报道1例膀胱直肠残端瘘患者采用介入治疗的临床效果，该患者因Hartmann术后直肠残端肿瘤进展侵犯膀胱并放化疗而致尿瘘，严重影响生活质量；参照膀胱阴道瘘治疗经验，成功采用双肾造瘘联合输尿管阻断支架并取得良好的姑息治疗效果。

简介：摘要目的建立一种体外连续传代培养小鼠膀胱平滑肌细胞(BSMCs)的方法并探讨纤维连接蛋白1(FN1)沉默对小鼠BSMCs周期分布和凋亡的影响。方法采取多酶联合消化法进行原代培养，分离获取小鼠原代BSMCs，通过形态学观察和免疫荧光法对细胞进行鉴定；使用细胞计数试剂盒(CCK-8)法对其增殖特性进行检测。使用针对FN1的小干扰RNA(FN1-siRNA)转染BSMCs，将体外培养的BSMCs分为空白组(未转染)、阴性对照组(转染阴性对照NC-siRNA)和干扰组(转染FN1-siRNA)，流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡率。3组间以上指标的比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验。结果从小鼠中获得的BSMCs纯度可达97%，细胞呈典型的"峰-谷"样结构。免疫荧光鉴定可见胞质内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性表达。FN1-siRNA转染后[G0/G1(68.20±3.82)%、S(17.78±1.48)%、G2/M(14.04±2.04)%]与转染前[G0/G1(49.59±2.38)%、S(28.75±1.94)%、G2/M (21.71±1.93)%]比较，增殖水平降低；与转染前[(3.12±0.65)%]比较，转染后[(17.36±2.62)%]凋亡率升高(F＝89.346，P<0.05)。结论体外培养获得的小鼠BSMCs具有较好增殖能力。靶向沉默FN1的表达可诱导BSMCs周期阻滞和凋亡。

简介：摘要目的探讨国产卡介苗(BCG)膀胱灌注预防中高危非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)复发的有效性及安全性，并分析复发风险因素。方法2015年7月至2020年6月选取32个研究中心的18～75岁且病理检查确诊为中高危NMIBC患者纳入研究，美国东部肿瘤协作组(ECOG)体力评分0～2分。排除标准：①有免疫缺陷或损害(如艾滋病)、正使用免疫抑制药物或放疗，有可能引起全身性BCG疾病反应者、对BCG或表柔比星或两药的辅料成份过敏者，患发热及急性传染病者，包括活动性结核者或正在接受抗结核治疗者，伴有严重的慢性心脑血管疾病或慢性肾病者；②合并其他泌尿生殖系统肿瘤或其他器官肿瘤者；③肌层浸润性膀胱尿路上皮癌(≥T2期)患者；④过去4周内接受过化疗、放疗、免疫治疗者(除外术后即刻膀胱灌注化疗)；⑤妊娠或哺乳期妇女、未采取有效避孕措施的育龄期妇女、计划于试验期间受孕者(包括男性受试者伴侣受孕)；⑥已知或怀疑术中发生膀胱穿孔；⑦入组前尚存在肉眼血尿，怀疑手术创面未愈合或尿路黏膜受损；⑧伴有膀胱炎，或曾经接受过其他膀胱灌注药物治疗且膀胱刺激征严重，预期影响本研究评估者；⑨入组前3个月内参加过其他药物临床试验；⑩已知阿片类药物或酒精依赖者；⑪研究者认为可能存在增加受试者危险性或干扰临床试验执行的任何情况。纳入研究的患者行经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)或经尿道膀胱肿瘤激光剜除术，术后即刻灌注1次表柔比星50 mg。入组患者采用区组随机化方法产生随机表，按2∶2∶1比例随机纳入试验1组、试验2组和对照组。试验1组灌注BCG 120 mg/次，共19次：诱导灌注期每周灌注1次，连续6次；然后每2周灌注1次，连续3次；然后每月灌注1次，连续10次。试验2组灌注BCG 120 mg/次，共15次：诱导灌注期每周灌注1次，连续6次；术后第3、6、12个月的每月前3周，每周灌注1次。对照组灌注表柔比星50 mg/次，共18次：每周1次，共8次；然后每月1次，共10次。比较3组的复发情况和不良事件发生情况。对BCG灌注治疗失败的危险因素进行单因素和多因素分析。结果32个研究中心共纳入681例患者，试验1组274例，试验2组277例，对照组130例，共脱落113例，总脱落率16.6%，3组脱落率比较差异无统计学意义(P＝0.6222)。3组间患者年龄、性别构成、体质指数(BMI)、ECOG评分、危险分层比较差异均无统计学意义(P>0.05)。入组患者中位随访时间22.1(12.1，32.3)个月，3组的中位随访时间差异无统计学意义(P＝0.9024)。随访期间患者复发及进展116例(复发112例，进展4例)，其中试验1组、试验2组、对照组复发(进展)分别为39、41、36例；2年复发率分别为14.2%、14.8%、27.7%，试验1组与试验2组比较差异无统计学意义(P＝0.9464)，试验1组和试验2组复发率均低于对照组(P＝0.0017，P＝0.0020)。累计无复发生存率方面，试验1组与试验2组差异无统计学意义(95%CI0.57～1.46，P＝0.7173)，试验1组和试验2组均优于对照组(HR＝0.439，95%CI 0.26～0.74，P＝0.0006；HR＝0.448，95%CI 0.29～0.80，P＝0.0021)。试验1组、试验2组、对照组总体不良事件发生率分别为74.5%(204/274)、72.6%(201/277)、69.8%(79/130)，试验1组与试验2组差异无统计学意义(P＝0.6153)；对照组不良事件发生率低于试验1组(P＝0.0051)和试验2组(P＝0.0167)；严重不良事件(SAE)发生率分别为13.5%(37/274)、15.5%(43/277)、12.3%(16/130)，3组间差异无统计学意义(P＝0.5064)。单因素和多因素分析结果显示，复发性膀胱癌(HR＝6.397，95%CI 1.95～20.94，P＝0.0001)是BCG灌注治疗失败的独立危险因素。结论国产BCG膀胱灌注预防中高危NMIBC的2年无复发生存率优于表柔比星。BCG 15次和19次两种灌注方案的有效性和安全性无明显差异。与表柔比星相比BCG并不增加SAE发生率。膀胱癌病史是NMIBC国产BCG灌注治疗失败的独立预测因素。