简介:摘要:林业营造林是指通过人工种植或自然更新等方式,建立起具有经济价值和生态功能的森林。本文从经济效益和社会效益两个方面探讨了林业营造林的重要性和意义。在经济效益方面,林业营造林可以提高木材产量和质量,增加林产品收入,促进地区经济发展;同时还能够改善环境,保护水源,减少土壤侵蚀等,为社会带来诸多好处。
简介:摘要目的制备全人源表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体,为基于人EGFR靶点的肿瘤免疫调节治疗提供基础制剂。方法采集110例胸部肿瘤(肺癌102例,乳腺癌8例)患者外周血,构建噬菌体单链抗体库。经噬菌体展示后筛选阳性克隆,测序并构建全长轻重链表达载体质粒,共转染HEK293。通过亲和层析获得纯化抗体,抗原抗体免疫反应测定抗体特异性和敏感性,生物膜干涉(biolayer interferometry,BLI)技术测定抗体亲和力和流式细胞技术(fluorescence activating cell sorter,FACS)检测对肿瘤细胞系EGFR结合活性。结果成功构建肺癌单链抗体噬菌体库,抗体库库容≥108,筛选获得两株单抗,分别为BTHG17-1,BTHG17-2,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定结合抗原敏感性为10 ng/mL,亲和力在10-8 mol/L水平,两抗体结合相同表位,可特异性结合野生型EGFR和突变体EGFRvⅢ蛋白,具有结合肺癌和神经胶质瘤细胞活性。结论获得较高亲和力全人源EGFR单链抗体(single-chain variable fragment,scFv),具有EGFR(包括EGFRVⅢ)特异性,为EGFR靶点封阻和免疫导向治疗研究提供一种新抗体工具。
简介:摘要目的构建肿瘤相关抗原表皮生长因子受体特异性嵌合抗原受体(EGFR-CAR)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体双修饰慢病毒载体表达系统。方法人PD-L1-Fc蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、亚克隆筛选高分泌PD-L1特异性抗体的稳定杂交瘤,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测抗体特异性,流式细胞术(FACS)鉴定对PD-1配受体封阻性能,Fortebio测定抗体亲和力,抗体全长测序,经保留鼠源CRD1、CRD2和CRD3人源化改造后构建单链抗体(single-chain variable fragment,scFv);人EGFR单克隆抗体杂交瘤系,经5′RACE技术扩增其轻链和重链可变区(VL和VH)基因,构建scFv,克隆至真核载体pcDNA3.1表达鉴定。基因合成EGFR-CAR(引入CD137协同信号胞内功能域)与PD-L1-scFv借助2A序列连接,克隆入慢病毒pLVX-EF1a-IRES-ZsGreen1表达载体,使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)共同转染293T细胞,获得包装病毒,感染293V细胞,FACS测定CAR膜表达,ELISA检测CAR感染293V细胞培养上清中PD-L1-scFv表达情况,转染激活人外周血T细胞,验证CAR膜表达。结果获得PD-L1抗体11E3,具备高度配受体封阻性能,经人源化改造后,亲和力稳定(2.67×10-10 mol/L),EGFR-scFv获得有效表达。进一步构建了EGFR-CAR和PD-L1双修饰慢病毒分泌型CAR(CTC0537-1)及膜表达型CAR(CTC0537-2),其病毒感染293V细胞阳性率为10%。CTZ0431-1感染293V细胞后,细胞膜表面表达EGFR-scFv,检测培养上清存在PD-L1-ScFv;CTZ0431-2感染293V细胞后,细胞膜表面EGFR-scFv和PD-L1-scFv有效表达,双表达病毒感染活化T细胞的CAR表达率为39.3%。结论成功构建了EGFR-CAR和PD-L1-scFv双表达慢病毒载体,EGFR-CAR中度结合亲和力,此为EGFR靶向和PD-L1抗体双修饰CAR-T细胞的实体瘤治疗研究提供了关键工具。
简介:摘要: 开展课程思政,是响应当前的教育教学改革的需要,是践行立德树人、协同育人、全面育人的必然要求。随着时代的发展,关于课程思政的开展也呈现出了新的局面。本文针对当前课程思政所面临的诸多问题,探究了课程思政在“育人+育才”互作关系双向驱动下的融入理念、应对策略及实施方法,经过实践检验取得了明显的成效,为进一步的教学改革奠定了一定的理论基础。
简介:摘要目的探讨急性后循环缺血性卒中(posterior circulation ischemic stroke, PCIS)患者出血性转化(hemorrhagic transformation, HT)的危险因素和对转归的影响。方法回顾性纳入2016年7月至2019年10月在郑州人民医院神经内科住院并确诊为PCIS的患者。收集人口统计学、临床资料、实验室以及影像学检查结果。HT定义为发病后首次头颅CT/MRI未发现颅内出血,而发病后10 d内复查头颅CT/MRI检查时发现颅内出血。有症状HT定义为影像学复查提示颅内出血且美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS)评分较基线增高。在发病3个月时应用改良Rankin量表进行转归评价,>2分定义为转归不良。应用多变量logistic回归分析确定HT、有症状HT以及转归不良的独立危险因素。结果共纳入242例PCIS患者,年龄(68.02±12.0)岁,女性111例(45.9%),基线中位NIHSS评分为5.9分(四分位数间距:3.1~8.8分)。19例(7.9%)发生HT,其中14例(73.7%)为有症状HT。3个月时随访显示,74例(30.58%)患者转归不良,其中12例死亡。多变量logistic回归分析显示,基线收缩压较高[优势比(odds ratio, OR)1.076,95%可信区间(confidence interval, CI)1.021~1.135,P=0.006;OR 1.161,95% CI 1.087~1.240,P<0.001]和梗死体积较大(OR 31.293,95% CI 4.542~215.592,P<0.001;OR 2.084,95% CI 1.414~3.073,P<0.001)是HT及有症状HT的独立危险因素。基线NIHSS评分较高(OR 1.511,95% CI 1.307~1.746;P<0.001)、糖尿病(OR 2.041,95% CI 1.054~3.952;P=0.034)和有症状HT(OR 4.514,95% CI 1.458~13.979;P=0.009)是转归不良的独立危险因素。结论HT在PCIS患者中较为少见。基线收缩压较高和梗死体积较大是PCIS患者发生HT的独立危险因素,基线NIHSS评分较高、糖尿病和有症状HT是PCIS患者转归不良的独立危险因素。
简介:【摘要】目的:分析老年局部晚期非小细胞肺癌序贯放化疗治疗和同期放化疗治疗临床效果。方法:入组本院2017年1月-2018年1月收治的老年局部晚期非小细胞肺癌患者共50例,随机分组,对照组采取序贯放化疗,观察组同步放化疗。比较两组平均生存时间、肺癌疗效、不良反应率。结果:观察组平均生存时间、肺癌疗效均优于对照组,P<0.05。观察组的不良反应率低于对照组,P<0.05。结论:同步放化疗效果相对于序贯放化疗治疗更好,对老年局部晚期非小细胞肺癌可延长生存时间,减少不良反应。