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  • 简介:摘要目的分析小鼠肾缺血-再灌注损伤环状RNA(circRNA)Hippo信号分子YAP表达变化,初步探讨circRNA肾缺血-再灌注损伤作用。方法构建小鼠肾缺血-再灌注损伤模型,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)肾组织病理改变判断模型成功。应用Illumina HiSeq 2500系统进行高通量双端测序建立显著差异表达circRNA表达谱。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证测序结果检测相关基因。采用基因功能(GO)分析、通路(KEGG)分析等方法探讨差异表达circRNA参与肾IR损伤生物功能及作用主要信号通路。采用蛋白印迹实验检测主要信号分子表达情况。结果缺血对照间差异显著circRNA 21个(P < 0.05, FC> 2),其中10个表达上调,11个表达下调。随机(随机数字法)选取circRNA.1100和cⅡrcRNA.1122进行验证,结果显示肾IR 1d二者相对表达倍数分别为(0.23±0.016)和(0.36±0.12),相比于对照均显著降低(P<0.05),与测序数据趋势一致。circRNA.1100IR 2 d和3 d肾组织中表达依然显著下调,相对表达倍数分别为(0.24±0.08)和(0.34±0.03)(P<0.05)。circRNA.1100母基因Cpeb3肾IR 1 d、2 d3 d相对表达倍数分别为(0.047±0.022)、(0.098±0.027)和(0.185±0.055),与对照比较显著下调。生物学功能和通路分析显示差异表达circRNA显著富集细胞周期、分裂、生长、凋亡、死亡等生物过程Hippo信号通路。肾IR1dHippo通路效应分子YAP蛋白明显上调,持续至IR第3天。结论circRNA参与了肾IR损伤生理病理过程,差异表达circRNAHippo信号通路可能在肾IR损伤发生发展中起关键作用。

  • 标签: 环状RNA Hippo通路 YAP 肾缺血-再灌注损伤 RNA测序 GO分析 KEGG分析 Cpeb3