简介：摘要目的建立红色荧光标记金黄色葡萄球菌(金葡菌)假体感染(PJI)临床株，探究工具菌的生物学特性及和初步应用可行性。方法通过分子克隆手段构建mCherry红色荧光表达质粒，通过电转化和噬菌体转导构建红色荧光标记金葡菌PJI临床株。通过生长曲线检测，体外成膜和生物量分析和荧光强度测量鉴定工具菌生物学特性。采用RAW264.7细胞株、工具菌建立共培养模型。采用该模型示踪不同锌离子浓度处理的巨噬细胞对于荧光PJI金葡菌吞噬能力。使用独立样本t检验、重复测量方差分析对定量数据进行统计。结果使用Gibson系统成功构建了荧光表达质粒pRMC2-pts-mCherry，并且使用噬菌体Phage11将该质粒成功导入金葡菌假体感染临床株ST1792。较之于野生株ST1792，荧光金葡菌ST1792-pRMC2-pts-mCherry两者的生长曲线没有统计学差异(F＝0.012，P>0.05)。在0.5%葡萄糖胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSBG)内，两者的生物膜光密度(OD)值分别为(3.700±0.003)和(3.715±0.042)(t＝0.6056，P>0.05)；10%滑液中生物膜OD值为(3.682±0.084)和(3.648±0.095)(t＝0.474，P >0.05)。使用动物活体成像系统(IVIS)检测荧光强度，24 h荧光强度为(1.95± 0.04)、48 h荧光为(1.94±0.13)、72 h荧光强度为(1.95±0.04)，荧光强度72 h稳定(F＝2.944，P>0.05)。通过荧光显微镜观察以及菌落形成单位(CFU)计数评价发现，使用锌离子浓度30～60 μmol/L不含抗生素的培养基处理RAW264.7 24 h，可以促进其吞噬金葡菌，其中30 μmol/L吞噬率为(44±4)%(t ＝4.75，P<0.01)、45 μmol/L吞噬率为(45±6)%(t＝4.086，P<0.05)、60 μmol/L离子处理的巨噬细胞，其吞噬率为(38±4)%(t ＝4.786，P <0.01)。结论本研究成功构建红色荧光临床PJI金葡菌，并验证其用于PJI相关体外吞噬研究的可行性。

简介：摘要假体关节感染(PJI)是关节置换手术后一个严重的并发症，金黄色葡萄球菌(金葡菌)是导致PJI最常见的病原菌，生物膜的形成使得金葡菌可以抵御抗生素和宿主免疫系统的攻击，增加了PJI的治疗难度。骨髓源性抑制细胞(MDSCs)可以抑制宿主对金葡菌的免疫反应，在维持金葡生物膜形成及导致PJI慢性化过程中起重要作用。本文拟对骨髓源性抑制细胞在金葡菌所致假体关节感染中的作用及相关研究进展作一综述。