氨基丁酸与酸枣仁增强小鼠免疫功能的研究

氨基丁酸与酸枣仁增强小鼠免疫功能的研究

吴明丽、王青,李晓萌

辽宁医药职业学院

摘要:通过给予小鼠一定剂量Υ-氨基丁酸（0.04g/kg.bw）、酸枣仁提取物（0.083g/kg.bw）及Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物，进行各项免疫指标的测定，研究Υ-氨基丁酸、酸枣仁提取物及2者合用对小鼠免疫功能的影响。 结果Υ-氨基丁酸组、酸枣仁提取物组、Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组均能显著增高小鼠足趾肿胀度、脾淋巴细胞中加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值，小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬指数、碳廓清吞噬指数（P＜0.05，P＜0.01），Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组还能显著增高溶血空斑数和小鼠NK细胞活性（P＜0.05）。结果表明Υ-氨基丁酸、酸枣仁提取物及2者合用均具有增强小鼠免疫力作用，且配伍使用比单独使用作用更好，提示其2者具有协同作用。

关键词: Υ-氨基丁酸；酸枣仁；免疫

γ-氨基丁酸广泛存在于自然界，由谷氨酸(Glutamic acid，Glu)经谷氨酸脱羧酶（GAD）催化而来，又名 4-氨基丁酸，和 γ-氨酪酸，简称 GABA，是哺乳动物中枢神经系统中的重要的抑制性神经递质[1]，具有调节血压、预防肥胖、 增强免疫力、健肝利肾、促进乙醇代谢、改善更年期综合症等多种功效[2-4]。酸枣仁, 具有补中益气、镇静安神、滋补五胜、轻身延年等作用，有研究报道酸枣仁具有增强免疫力作用[5]。 本试验考察了γ-氨基丁酸、酸枣仁提取物及2者合用对小鼠增强免疫力作用的研究，为其产品开发提供理论依据。

1材料与方法

1.1受试样品 Υ-氨基丁酸原料符合新资源食品要求，含量20%；酸枣仁提取物为实验室自制，采用10倍量水煎煮提取3次，每次1h，浓缩，醇沉、真空干燥等工艺制得棕色粉末，主要成分为多糖，提取率约为10%。

1.2动物 200只SPF级昆明种小鼠,雄性，体重18-22 g。

1.3 主要仪器与试剂

绵羊红细胞（SRBC及补体（豚鼠血清）、YAC-1细胞、DNFB、RPMI1640培养液、ConA 、MTT、印度墨汁等。电子分析天平、显微镜、二氧化碳培养箱、酶标仪、半自动生化分析仪等。

2实验方法

2.1 剂量与分组 将200只小鼠分5大组，每组40只。每大组设溶剂对照组，Υ-氨基丁酸组（0.04g/kg.bw）、酸枣仁提取物组（0.083g/kg.bw）、Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组（Υ-氨基丁酸0.04g/kg.bw+酸枣仁提物0.083g/kg.bw），共4小组，每组10只，按20ml/kg.bw 体积给小鼠灌胃，对照组灌胃予以等体积的蒸馏水，每日灌胃给予受试物，连续灌胃30d。

2.2 试验方法 体重、脏/体重比；ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化试验（MTT法）；迟发型变态反应（DTH）（足趾肿胀法）、脾抗体生成细胞检测（Jerne 改良玻片法）；半数溶血值（HC50）；碳廓清试验；腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（滴片法）；NK 细胞活性测定（乳酸脱氢酶LDH测定法）。

2.3 统计学方法 采用SPSS 17.0 统计软件对数据进行方差分析，计量资料用均数±标准差（x ±s ）表示，采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 对体重、脏器比值影响 结果各组小鼠生长发育好，各期体重差异均无统计学意义(P＞0.05)。脾脏、胸腺体重比值与溶剂对照组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。

3.2 对小鼠细胞免疫、体液免疫功能的影响 由表1可见，与溶剂对照组比较，Υ-氨基丁酸组、酸枣仁提取物组、Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组足趾肿胀度、脾淋巴细胞中加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值均显著增高（P＜0.05，P＜0.01），Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组溶血空斑数显著增高（P＜0.05）, 各剂量组抗体细胞数无显著性差异（P＞0.05）。

表1对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响（x ±s ）（n=10）

注：*与阴性对照组比较，P＜0.05，**与阴性对照组比较，P＜0.01。

3.3 对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能及NK细胞活性的影响

由表2可见， 与溶剂对照组比较，Υ-氨基丁酸组、酸枣仁提取物组、Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬指数、碳廓清吞噬指数均显著增高（P<0.05，P<0.01）； Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组小鼠的NK细胞活性显著高于溶剂对照组（P<0.05）。

表2 对小鼠单核-巨噬细胞吞噬能力及NK细胞活性的影响 （x ±s ）

注：*与阴性对照组比较，P＜0.05，**与阴性对照组比较，P＜0.01。

4讨论

本试验通过灌胃小鼠一定剂量Υ-氨基丁酸、酸枣仁提取物及Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物，进行各项免疫指标的测定， 结果Υ-氨基丁酸组、酸枣仁提取物组、Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组均能显著增高小鼠足趾肿胀度、脾淋巴细胞中加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值，小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬指数、碳廓清吞噬指数（P＜0.05，P＜0.01），Υ-氨基丁酸联合酸枣仁提取物组还能显著增高溶血空斑数和小鼠NK细胞活性（P＜0.05）。 结果表明Υ-氨基丁酸、酸枣仁提取物及2者合用均具有增强小鼠免疫力作用，且配伍使用比单独使用作用更好，提示其2者具有协同作用。

参考文献

[1] 叶惟泠.γ-氨基丁酸的发现史[J].生理科学进展,1986,17(2):

187-189.

[2] Satya Narayan V, Nair P M. Metabolism, enzymology and

possible roles of 4-aminobutyric acid[J]. Biochemistry,1989,8:21-25

[3]穆小民,吴显荣.高等植物体内 γ-氨基丁酸的代谢及生理作用[J].氨基酸杂志,1994,4:44-46

[4]朱正生,郁杰,洪伟鸣,等.γ-氨基丁酸·黄芪多糖复方对肉雏鸡生长及免疫性能的影响[J].安徽农业科学,2009,37(19):8994-8995+9046.

[5] 郎杏彩，李明湘，吴树勋，等.酸枣仁增强小鼠免疫功能的实验研究.中药通报.1988，13（11）：43-45.