凯氏定氮法在《中国药典》中的应用

凯氏定氮法在《中国药典》中的应用

胡雪凇 常浩

吉林省药品检验研究院 吉林 长春 130033

【摘要】药品的检测关乎人们的用药安全，通过按标准要求对药品检测，可以保证药品的安全性，防止不合格的药品流入市场。很多药品需要检测含氮量或蛋白质含量，而凯氏定氮法就是一种定量检测含氮量和蛋白质含量的重要方法之一。本综述就凯氏定氮法在《中国药典》中的应用做一个概述。

【关键词】

凯氏定氮法，中国药典，药品检验

【正文】

凯氏定氮法是由丹麦化学家Johan Kjeldahl于1883年发明的，最初是为酿酒行业设计，目的是帮助跟踪发酵过程中谷物蛋白质的变化。经过140多年的发展，凯氏定氮法已经广泛应用于食品中蛋白质含量检测、土壤中总氮浓度检测、水中氮含量检测等。

《中国药典》是规范药品质量的权威性文件，凯氏定氮法在其中的应用主要体现在对药材、中药制剂和某些化学药品中氮含量的测定。这一分析方法对于验证药物成分的纯度和含量，以及确保药品的一致性和可靠性具有重要作用。

1、凯氏定氮法在历部《中国药典》中的使用情况数量汇总

从1953年第一版《中国药典》开始到现在共有11版药典。《中国药典》1953年版是整体一部，1963年版将中药材和中药成方制剂单独为药典一部，2005年版开始将《中国生物制品规程》纳入到药典，单独作为药典三部，2015年版开始将通则和药用辅料合并为四部[1]。

氮测定法首次收载于《中国药典》1953年版，蛋白质测定法第一法凯氏定氮法首次收载于《中国药典》2005年版。每版采用凯氏定氮法的药品都会增加（见表1），改革开放以来尤以《中国药典》2005年版和《中国药典》2010年版增加最明显。这是因为2005年之前的药典疫苗和血液制品蛋白质含量检测均参照《中国生物制品规程》或相应制品制造及检定规程各项规定，而本次统计的结果仅限《中国药典》各版收录的结果；而《中国药典》2010年版增多的部分主要集中在一部和二部，主要是因为增加了修订力度，收载品种增加，紧跟国际水平，与国外药典标准接轨[2]。

凯氏定氮法最早应用于《中国药典》1953年版胰岛素锌球蛋白注射液检查项氮的测定，随着凯氏定氮法不断的普及，该法不断应用于检查、含量测定、比活力测定/效价测定和生物制品的原液/半成品/成品的检定（见表2），可以看出目前集中在含量测定和生物制品原液/半成品/成品检定达80%。

表1.各版《中国药典》采用凯氏定氮法的药品数量汇总（个）

表2.各版《中国药典》中不同检测项目采用凯氏定氮法的药品数量汇总（个）

2、凯氏定氮法在历部《中国药典》中增加的情况

2.1新增药品。如清开灵相关制剂，《中国药典》一部2000年版开始收录清开灵口服液[3]，《中国药典》2005年版一部新增收录清开灵注射液，《中国药典》一部2010年版新增收录清开灵片、清开灵软胶囊、清开灵泡腾片、清开灵胶囊，《中国药典》一部2015年版新增收录的清开灵颗粒，这些新增剂型含量测定中均采用了凯氏定氮法。

2.2更改药品相关检测项目实验方法。如《中国药典》二部2020年版收录玻璃酸酶效价测定中增加了蛋白质含量的测定。

2.3药品新增总氮量的测定。如《中国药典》一部2015年版收录乌鸡白凤丸，在含量测定中新增总氮量的测定。

3、凯氏定氮法在历部《中国药典》中删减情况

3.1药典中删除的药品。如甲丙氨酯和甲丙氨酯片，《中国药典》二部1985年版开始收录，《中国药典》二部2000年版即删除这两种药品。而在2013年，国家食品药品监督管理总局对甲丙氨酯这一药物进行了重新评估并印发了关于停止生产销售使用甲丙氨酯制剂的通知。

3.2药品更改检测项目实验方法。如扑米酮片，《中国药典》二部2005年版收录的含量测定方法照氮测定法计算含量，鉴于美国药典采用气相填充柱对扑米酮含量进行测定[4]，为与国际标注接轨，《中国药典》二部2010年版收录的含量测定方法则改为照气相色谱法测定。

3.3删除总氮量的测定。如胰岛素和精蛋白锌胰岛素注射液，《中国药典》二部2010年版关于胰岛素和重组人胰岛素标准全面提升，与美国药典、英国药典保持一致[5]，在检查项中删除了氮的检测。

【小结】

凯氏定氮法作为《中国药典》中的常规方法，在《中国药典》中的应用越来越多。目前凯氏定氮法在《中国药典》中主要集中在含量测定和生物制品的蛋白质含量测定中。凯氏定氮法在《中国药典》中的使用也会随着药品的增减、标准的提升、药品使用的不良风险的评估等情况来进行增减。随着技术的进步和创新，凯氏定氮法也会在更多的药品中得以应用。

【参考文献】

[1]赵宇新,麻广霖,张伟.中国药典的发展历史及启示[J].中国药品标准,2020,21(06):481-486.

[2]张碧华,高素强,傅得兴.浅析2010年版《中国药典》(一部)增修订情况及其临床指导意义[J].中国药房,2013,24(23):2113-2115.

[3]董丽荣.全自动凯氏定氮仪法测定清开灵口服液的总氮量[J].中国民族民间医药,2022,31(22):39-41.

[4]刘敏,庞发根,李玉兰,等人.气相色谱法测定扑米酮片中扑米酮的含量[J].天津药学,2008(05):17-18.

[5]李湛军.《中国药典》胰岛素生物测定简化方法及其快速检测的研究[J].中国药品标准,2012,13(05):336-340.