GC法测定泊洛沙姆182的乙二醇和二甘醇

GC法测定泊洛沙姆182的乙二醇和二甘醇

刘春燕    朱银

海南全星制药有限公司  海南  海口  570216

摘要：  目的  采用气相色谱法（GC）建立泊洛沙姆182中乙二醇和二甘醇残留量的检测方法。方法 以50%苯基-50%二甲基聚硅氧烷（VF-17ms，0.53 mm×30m，1μm或极性相近）为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度为60℃，维持5分钟，以每分钟5℃的速率升温至110℃，维持5min，再以每分钟15℃的速率升温至170℃，维持5min，最后以每分钟35℃的速率升温至280℃，维持40分钟；进样口温度为270℃；检测器为氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度为290℃；载气为氮气；进样量1μl。结果  空白溶液不干扰乙二醇和二甘醇的检测。系统适用性溶液中乙二醇和二甘醇峰的理论塔板数为13629和109058，乙二醇和二甘醇峰与相邻峰的分离度最小值为4.9。对照品溶液连续进样5次，乙二醇和二甘醇峰面积与内标物峰面积比值RSD为1.4和2.3。保留时间RSD为0.061和0.015；乙二醇在6.1368~122.736µg/mL浓度范围内，线性回归方程为y = 0.8692 x - 1.2317，相关系数r= 0.9998；二甘醇在10.086~40.344µg/mL浓度范围内，线性回归方程为y = 0.7773 x - 2.6913，相关系数r= 0.9994；乙二醇定量限浓度为6.137μg/mL，6针峰面积的RSD为4.8%；乙二醇检测限浓度为3.0684μg/mL；二甘醇定量限浓度为10.086μg/mL，相当于供试品浓度的0.0050%，6针峰面积的RSD为5.3%；二甘醇检测限浓度为5.043μg/mL，相当于供试品浓度的0.0025%；测定9份50%、100%、150%加标溶液的乙二醇回收率为90.27%~100.96%之间，RSD为3.8%；二甘醇回收率为94.15%~108.38%之间，RSD为4.0；供试品溶液在不同日期，不同人员使用相同仪器测得6/12份加标样品乙二醇回收率RSD为2.7%；二甘醇回收率RSD为5.2%；柱流速4.8ml/min~5.2ml/min、进样口温度265℃~275℃、检测器温度285℃~295℃时，空白溶液均不干扰本品待测物的检测，系统适用性溶液色谱图中乙二醇和二甘醇峰与相邻峰的分离度均应符合规定；对照品溶液中待测物峰的理论塔板数均大于5000。供试品溶液中均未检出乙二醇和二甘醇。结论  本方法简便准确，专属性强，线性关系、精密度及耐用性良好，可用于泊洛沙姆182中乙二醇和二甘醇的测定。

    关键词：GC；泊洛沙姆182；乙二醇和二甘醇；

2020年版中国药典为收载泊洛沙姆182质量标准，乙二醇及二甘醇为泊洛沙姆182主要杂质，故建立分析方法对泊洛沙姆182中乙二醇和二甘醇进行控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器  安捷伦7890B和8890气相色谱仪，工作站Agilent OpenLAB

1.2 试药  泊洛沙姆182 （Croda Singapore Pte Ltd，批号53598）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件：以50%苯基-50%二甲基聚硅氧烷（VF-17ms，0.53 mm×30m，1μm或极性相近）为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度为60℃，维持5分钟，以每分钟5℃的速率升温至110℃，维持5min，再以每分钟15℃的速率升温至170℃，维持5min，最后以每分钟35℃的速率升温至280℃，维持40分钟；进样口温度为270℃；检测器为氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度为290℃；载气为氮气；进样量1μl。

2.2 溶液的配制 

取内标溶液2ml，置10ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为空白溶液；取本品2.0g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加内标溶液（取1,3-丁二醇适量，精密称定，加乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液）2ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取乙二醇和二甘醇适量，精密称定，用乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含乙二醇0.31mg和二甘醇0.1mg的溶液，作为对照品贮备液精密量取2ml，置10ml量瓶中，精密加内标溶液2ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；取本品2.0g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加内标溶液2ml和对照品贮备液2ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；

2.3 系统适用性及专属性试验：按“2.2”项下配制方法制备对照品溶液、供试品溶液、系统适用性溶液、空白溶液，用”2.1”项下分析方法进样；试验结果：空白溶液不干扰乙二醇和二甘醇的检测。系统适用性溶液中乙二醇和二甘醇峰的理论塔板数为13629和109058，均大于5000，乙二醇和二甘醇峰与相邻峰的分离度最小值为4.9，均大于1.5，均符合规定。对照品溶液连续进样5次，乙二醇和二甘醇峰面积与内标物峰面积比值RSD为1.4和2.3，均小于5.0%。保留时间RSD为0.061和0.015，均小于2.0%，符合规定，结果表明本方法系统适用性可满足测定要求，且专属性强。

2.4线性与范围分别精密量取乙二醇和二甘醇贮备液（按“2.2”项下配制方法制备乙二醇和二甘醇贮备液）适量，用乙醇定量稀释，配置成乙二醇浓度为6.1368（定量限）、30.684、61.368、92.052、122.736µg/mL和二甘醇浓度为10.086、20.172、30.258、40.344µg/mL的线性关系溶液，分别精密量取上述溶液进行试验。以乙二醇和二甘醇浓度(C,µg/mL)为横坐标，乙二醇和二甘醇峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，并计算相关系数及回归方程；试验结果：乙二醇在6.1368~122.736µg/mL（定量限~200%）浓度范围内，线性回归方程为y = 0.8692 x - 1.2317，相关系数r= 0.9998，Y轴截距与100%响应值的比值为2%；二甘醇在10.086~40.344µg/mL（定量限~200%）浓度范围内，线性回归方程为y = 0.7773 x - 2.6913，相关系数r= 0.9994，Y轴截距与100%响应值的比值为22%，表明乙二醇和二甘醇在定量限~200%限度浓度范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。

2.5检测限与定量限  分别精密量取乙二醇和二甘醇对照品储备液适量，乙醇逐步稀释至信噪比（S/N）约为10的溶液，作为定量限溶液；用乙醇逐步稀释至信噪比（S/N）约为3的溶液，作为检测限溶液；定量限连续进样6次，检测限进样1次；经分析，乙二醇定量限浓度为6.137μg/mL，相当于供试品浓度的0.0031%，6针峰面积的RSD为4.8%；乙二醇检测限浓度为3.0684μg/mL，相当于供试品浓度的0.0015%；二甘醇定量限浓度为10.086μg/mL，相当于供试品浓度的0.0050%，6针峰面积的RSD为5.3%；二甘醇检测限浓度为5.043μg/mL，相当于供试品浓度的0.0025%；表明本方法乙二醇和二甘醇具有良好的检出能力。

2.6准确度试验  取乙二醇和二甘醇按“2.2”项下50%、100%、150%的对照品溶液，每个浓度分别平行配置3份，分别进行加样回收率试验。试验结果：测定9份50%、100%、150%加标溶液的乙二醇回收率为90.27%~100.96%之间，在90.0%～108.0%范围内，RSD为3.8%，小于10%；二甘醇回收率为94.15%~108.38%之间，在85.0%～110.0%范围内，RSD为4.0，小于10.0%，符合规定，表明本方法准确度较好。

2.7精密度试验 

2.7.1重复性试验  按 “2.2”项下配制方法制备对照品溶液和供试品溶液（制备6份），分别进样，记录色谱图；试验结果：供试品溶液平行测定6份加标样品乙二醇回收率在90.0%～108.0%范围内，RSD为1.9%，小于10.0%；二甘醇回收率在85.0%～110.0%范围内，RSD为2.3%，小于10.0%，表明本方法重复性良好。

2.7.1中间精密度试验  不同的试验时间，不同的实验人员，按 “2.2”项下配制方法制备对照品溶液和供试品溶液（制备6份），分别进样，记录色谱图；试验结果：供试品溶液在不同日期，不同人员使用相同仪器测得12份加标样品乙二醇回收率在90.0%～108.0%范围内，RSD为2.7%，小于10.0%；二甘醇回收率在85.0%～110.0%范围内，RSD为5.2%，小于10.0%，表明本法中间精密度良好。

2.8耐用性试验  按“2.2”项下配制方法制备空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液及对照品溶液，柱流速变化±0.2mL/min、进样口温度变化±5℃、检测器温度变化±5℃，分别进行试验。试验结果：柱流速4.8ml/min~5.2ml/min、进样口温度265℃~275℃、检测器温度285℃~295℃时，空白溶液均不干扰本品待测物的检测，系统适用性溶液色谱图中乙二醇和二甘醇峰与相邻峰的分离度均应符合规定；对照品溶液中待测物峰的理论塔板数均大于5000。供试品溶液中均未检出乙二醇和二甘醇。结果表明本方法的耐用性良好。

3 总结

本方法简便准确，专属性强，线性关系、精密度及耐用性良好，可用于泊洛沙姆182中乙二醇和二甘醇的测定。

参考文献

[1]2020年版中国药典四部泊洛沙姆188质量标准

[2]中国药典2020年版四部通则0861气相色谱法