法氏囊活性肽对鸡免疫系统的影响

法氏囊活性肽对鸡免疫系统的影响

李康顺1 张金2 郑超文3

（ 1吴川市吴阳镇农业技术服务中心 广东吴川 524500；

2吴川市塘缀镇农业技术服务中心 广东吴川 524500；

3吴川市梅菉街道农业技术服务中心 广东吴川 524500）

摘 要

本试验选取选用1日龄健康ＡＡ肉仔鸡36只，分别进行禽流感和新城疫的免疫，在相同环境下饲养7d，将其分成四组，A 组鸡只注射低剂量（0.2mg）法氏囊活性肽溶液；B 组注射中剂量（0.5mg）法氏囊活性肽溶液；C组注射高剂量（0.8mg）法氏囊活性肽溶液，D 组注射生理盐水作为对照组。分别于7日龄，21日龄，35日龄采集鸡只血液和免疫器官，确定免疫器官指数的影响及新城疫和禽流感抗体效价、免疫球蛋白及细胞因子等指标的变化。结果显示，第21日龄和第35日龄时，A、B、C能够明显提高胸腺和法氏囊指数，对鸡免疫器官有显著影响；禽流感和新城疫病的抗体效价显示 A、B、C三种均明显高于D组；A、B、C三组血清中IgG，IgA，IgM，IL-2，IFN-γ的含量明显高于D组，且随着日龄和剂量的增加明显增强，其中C组的效果最为显著。

关键词：法氏囊活性肽；鸡；免疫系统

法氏囊多肽是机体内一种重要的免疫调控因子。前期研究发现，法氏囊中的多肽能有效地调控机体的免疫应答。然而，关于法氏囊活性肽对鸡免疫系统的具体影响和作用机制，目前尚不清楚。本试验旨在探讨鸡法氏囊中的多肽在鸡只体内的作用。因此，分别将不同剂量的法氏囊活性肽注射到进行过新城疫、禽流感灭活疫苗处理的鸡体内，通过对其免疫器官，抗体滴度以及血清中免疫球蛋白和细胞因子含量变化测定，了解法氏囊活性肽在免疫系统中的作用，并为进一步研究免疫调控提供新的理论和实验依据。

1材料与方法

1.1 材料

药品:法氏囊活性肽，纯度在97%以上；生理盐水；鸡新城疫病毒血凝抑制试验抗原(HI)、禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原；鸡IL-2检测试剂盒、IFN-Y ELISA检测试剂盒，美国Bim公司产品；鸡IgG、IgA、IgM检测试剂盒，上海恒源生物科技有限公司产品；

器具:手术刀，手术剪，玻璃分针，一次性采血针，抗凝管，胶头滴管，酒精棉，干棉，静脉注射针，移液枪。

（2）实验动物。实验动物选取吴川某养鸡场里的1日龄健康ＡＡ肉仔鸡36只。

1.2 方法

（1）饲养管理。本研究以出生1d的健康 AA级肉仔鸡36头，采用三层叠式立体鸡舍，为期35d，自由进食和饮水，23h照明。1日龄时，以0.05 mL滴鼻法或点眼法进行免疫；鸡新城疫和禽流感双联灭活疫苗0.3ml/头，在颈内进行免疫接种。

（2）试验分组。将36只经过鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗处理的ＡＡ肉仔鸡随机分为A、B、C、D共4组。第7日龄时，对A组注射低剂量(0.2mg)的法氏囊活性肽溶液，B组注射中剂量(0.5mg)的法氏囊活性肽溶液，C组注射高剂量(0.8mg)的法氏囊活性肽溶液，D组注射生理盐水为空白对照组，对分组鸡只进行相同环境正常饲养。试验期为35d。

（3）测定指标。在饲养的7，21，35d时，采集实验鸡只血液，对血样进行离心，将血清分离出来，通过鸡IL-2检测试剂盒、IFN-Y ELISA检测试剂盒以及鸡IgG、IgA、IgM检测试剂盒加入底物并测定反应产物的颜色变化，测定禽流感病毒和新城疫病病毒的效价，血清中 IgG，IgA，IgM，IL-2，IFN-γ的含量。

在饲养的7，21，35d时，对各组实验鸡只随机抽取3只进行屠宰处理，并测量了其免疫系统指标。将鸡的免疫脏器切除后，用电子秤称量法氏囊、脾和胸腺的重量，根据下列公式求出法氏囊指数、脾脏指数和胸腺指数。

2结果与分析

2.1法氏囊活性肽对鸡免疫器官指数的影响

从表2.1中可以看出，试验组与对照组相比较，各免疫器官指数均有所提高，在7d时，A、B、C三组的胸腺指数分别为6.35%、6.36%、6.37%；在21d时，A、B、C三组的胸腺指数分别为7.25%、7.27%、7.29%；在35d时，A、B、C三组的胸腺指数分别为7.48%、7.50%、7.51%，同时D组在不同时间的胸腺指数分别为6.34%、6.76%、5.46%。通过结果显示，试验组胸腺指数随着免疫期延长呈上升趋势，而对照组则在21d以后逐渐降低。在7d时，A、B、C三组的脾脏指数分别为1.05%、1.04%、1.06%；在21d时，A、B、C三组的脾脏指数分别为1.35%、1.27%、1.36%；在35d时，A、B、C三组的脾脏指数分别为1.78%、1.77%、1.80%，同时，对照组在不同天数的脾脏指数分别为1.03%、1.18%、1.67%。试验组的脾脏的平均免疫指标高于正常对照组，但无显著性差异。在7d时，A、B、C三组的法氏囊指数分别为3.29%、3.30%、3.38%；在21d时，A、B、C三组的法氏囊指数分别为5.35

%、5.37%、5.38%；在35d时，A、B、C三组的法氏囊指数分别为5.56%、5.52%、5.49%，同时D组在不同天数的法氏囊指数分别为3.27%、5.03%、3.91%。法氏囊指数表明，随着免疫处理时间的延长，试验组的平均法氏囊免疫指标呈上升趋势，而对照组在21d后则呈逐渐降低的趋势。

表2.1 法氏囊活性肽对AA肉仔鸡免疫器官指数的影响

2.2法氏囊活性肽对鸡新城疫病毒、禽流感病毒抗体滴度的影响

表2.2  法氏囊活性肽对鸡新城疫病毒、禽流感病毒抗体滴度的影响

从表2.2中可以看出，在试验的第7d，各组鸡的新城疫病毒和禽流感病毒抗体滴度相近，差异不大。然而，随着免疫时间的增加，试验组（A、B、C组）的抗体滴度逐渐上升，而对照组（D组）的抗体滴度上升幅度较小。特别是在试验的第35d，试验组的抗体滴度明显高于对照组,A组的新城疫病毒抗体滴度和禽流感病毒抗体滴度分别达到了6.87、6.54；B组的新城疫病毒抗体滴度和禽流感病毒抗体滴度分别达到了6.92、6.61；C组的新城疫病毒抗体滴度和禽流感病毒抗体滴度分别达到了7.05、6，72，均显著高于对照组的4.56和4.21。同时，从表中还可以看出，随着法氏囊活性肽剂量的增加，抗体滴度也呈现出上升的趋势。在第35d，C组的新城疫病毒抗体滴度和禽流感病毒抗体滴度均略高于A组和B组。

2.3法氏囊活性肽对血清中IgG，IgA，IgM，IL-2，IFN-γ差异的影响

表2.3 法氏囊活性肽对鸡血清中IgG,IgA,IgM,IL-2,IFN-γ含量的影响

由表2.3可知，法氏囊活性肽对鸡体内 IgG,，IgA,，IgM，IL-2，IFN-γ的水平有明显的作用。在7d时A、B、C三组的 IgG含量分别为2.34mg/mL、2.38mg/mL、2.42mg/mL，明显高于对照组2.29mg/mL的含量；在21d时A、B、C组的 IgG含量分别为3.45mg/mL、3.52mg/mL以及3.58mg/mL，明显高于3.15mg/mL的含量；在35d时A、B、C三组的 IgG含量分别为4.56mg/mL、4.63mg/mL以及4.71mg/mL，明显高于对照组3.96mg/mL的含量。在7d时A、B、C三组的 IgA含量分别为1.56mg/mL、1.6mg/mL以及1.65mg/mL明显高于对照组1.52mg/mL的含量；在21d时A、B、C三组的 IgA含量分别为2.23mg/mL、2.28mg/mL以及2.32mg/mL，明显高于对照组1.98mg/mL的含量；在35d时A、B、C三组的 IgA含量分别为2.89mg/mL、2.94mg/mL以及3.00mg/mL，明显高于对照组的2.56mg/mL的含量。在7d时A、B、C三组的 IgM含量分别为0.89mg/mL、0.92mg/mL以及0.95mg/mL，明显高于对照组0.85mg/mL的含量；在21d时A、B、C三组的 IgM含量分别为1.32mg/mL、1.35mg/mL以及1.38mg/mL，明显高于对照组1.19mg/mL的含量；在35d时A、B、C三组的 IgM含量分别为1.76mg/mL、1.81mg/mL以及1.86mg/mL，明显高于对照组的1.53mg/mL的含量。随着天数与剂量的增加，血清中 IgG、 IgA和 IgM含量均较对照组显著升高。

另外，在7d时，A、B、C三组的IL-2的含量分别为125.3pg/mL、128.4pg/mL以及131.2pg/mL，明显高于对照组112.5pg/mL的含量；在21d时，A、B、C三组的IL-2的含量分别为187.6pg/mL、191.5pg/mL以及195.6pg/mL，明显高于对照组165.6pg/mL的含量；在35d时，A、B、C三组的IL-2的含量分别为246.8pg/mL、251.pg/mL以及256.9pg/mL，明显高于对照组214.6pg/mL的含量。在7d时，A、B、C三组的IF-γ的含量分别为98.7pg/mL、101.2pg/mL以及103.8pg/mL，明显高于对照组89.3pg/mL的含量；在21d时，A、B、C三组的IF-γ的含量分别为152.4pg/mL、156.3pg/mL以及160.2pg/mL，明显高于对照组132.1pg/mL的含量；在35d时，A、B、C三组的IF-γ的含量分别为203.6pg/mL、208.5pg/mL以及213.7pg/mL，明显高于对照组176.8pg/mL的含量。随着法氏囊活性肽剂量和天数的增加，免疫指标也呈现出上升的趋势。

3结 论

(1)根据本试验结果，法氏囊活性肽对鸡免疫器官发育的影响在不同免疫阶段呈现出不同的趋势。总体，能够促进法氏囊和胸腺的发育，提高免疫器官指数；

(2)法氏囊活性肽能够显著提高鸡对新城疫病毒和禽流感病毒的抗体滴度，从而增强鸡的免疫力；

(3)法氏囊活性肽能够显著提高鸡血清中的免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和细胞因子（IL-2、IFN-γ）的含量。

综上所述：法氏囊活性肽对鸡的免疫功能具有显著的促进作用，高剂量法氏囊活性肽的效果最好。

参考文献

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