抗原、抗体、核酸检测在甲型流感病毒感染诊断中的价值分析

抗原、抗体、核酸检测在甲型流感病毒感染诊断中的价值分析

王江鸿  付小芬指导教师

山东协和学院 山东济南     250200

摘要：本研究对甲型流感病毒检测方法进行了深入的研究和分析，扩宽了研究内容，丰富了研究体系。通过研究甲型流感病毒检测方法的阳性率、灵敏度、特异性，提供早期诊断、快速诊断，并且降低误诊率，从而达到确诊患者，临床医生提供快速、准确的参考，为患者提供最优治疗方案。并且帮助相关部门评估甲型流感病毒的严重程度和传播范围，以便采取措施。

关键词：甲型流感病毒；抗原检测；抗体检测；核酸检测               

    流行性感冒（流感）[1]，是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，还具有暴发、扩散迅速等特点，且易发生变异，其抗原性变异与流感的发生、流行密切相关，其中甲型流感病毒抗原转变及漂移发生率较高，可导致患者机体特异性免疫失效，为引起大范围流感暴发的主要病原体。甲型流感病毒[2]感染常见的症状包括发热、畏寒、头痛、虚弱、眼睛发红、咽喉痛、干咳和流涕。流感流行伴随着死亡率的增加。实时荧光定量PCR法（核酸检测）[3-4]具有较强的自动化及特异性，可作为临床检测流感病毒的“金标准”，通过扩增循环产物荧光信号，促使荧光信号强度提高，进一步观察荧光强度变化可建立荧光扩增曲线图，从而进行准确诊断。

1  资料与方法

1.1  一般资料

选取2022年10月-2024年1月在天津市宁河区医院实习期间814例疑似为甲型流感病毒感染患者进行回顾性分析。对814例疑似甲型流感病毒感染的患者分别进行检测，抗原检测作为实验组1，抗体检测作为实验组2，核酸检测作为对照组。三组研究对象的性别、年龄等一般资料比较差异，无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2  研究方法

（1）抗原检测：采集样本的过程包括完全插入患者口腔内到咽喉部，并进行反复摩擦多次，以确保充分接触和采集到足够的黏膜细胞。一旦样本采集完成，医护人员应立即将标本送检至实验室。均采用万孚胶体金法进行甲、乙型流感病毒抗原检测，检测前将样本、试剂及裂解液恢复至室温。于样本抽提管中加入10滴提取液，将拭子放入提取管中，旋转10s并用手指按压，使样本与裂解液充分混合，15~20min之内判断结果。

（2）抗体检测：适用于AutoLumoA2000、AutoLumoA2000Plus、AutoLumoA2000PlusB全自动化学发光测定仪。检测方法：准备测试样本(阴、阳性对照或待测样本)并正确放置后，点击启动按钮进行定Cutoff值程序或样本检测程序，仪器将执行以下操作：将样本架传送到吸样位，将反应容器加载到加样位与稀释位；执行定Cutoff值程序时，完成100μL阴性对照、100μL阳性对照、20μL磁微粒混悬液的分注；执行样本检测程序时，完成10μL样本、20μL磁微粒混悬液、100μL样品稀释液的分注；对反应液进行混匀、温育，温育温度为37℃，温育时间为15分钟；温育完成后，使用清洗液对反应液进行清洗分离；完成100μL酶结合物的分注；对反应液进行混匀、温育，温育温度为37℃，温育时间为17分钟；温育完成后，使用清洗液对反应液进行清洗分离；完成50μL底物A液和50μL底物B液的分注；对反应液进行混匀，检测发光强度。

（3）核酸检测：用无菌捻拭子拭取双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子置入含采样液(推荐使用生理盐水)的无菌管中，将试管塞紧后，密闭送检。适用于ABI7500荧光定量PCR仪、LifeTechnologiesQuantStudioTM5荧光PCR仪、SLAN-96P全自动医用PCR分析系统。均按照圣湘生物科技有限公司提供的六项呼吸道病原体核酸检测试剂盒说明书进行核酸提取，加样，PCR扩增。

1.3  统计学方法

使用数据统计分析软件SPSS26.0分析数据，涉及计数资料以率表示，用χ2检验；P＜0.05具有统计学意义。

2  结果

2.1  实验组1、2和对照组检测甲型流感病毒的阳性率

对814例样本进行检测，核酸检测阳性为341例，阴性为473例，检测阳性率为41.89%；抗原检测阳性为276例，检测阳性率为33.91%；抗体检测阳性为213例，检测阳性率为26.17%。

2.2  实验组1、2和对照组检测甲型流感病毒的特异性、敏感度比较

实验组1与对照组的数据为真阳性276例、假阳性42例、真阴性431、假阴性65例，灵敏度约为80.94%，特异性约为91.12%，χ2为55.70，P＜0.05。实验组2与对照组的数据为真阳性213例、假阳性11例、真阴性462、假阴性128例，灵敏度约为62.46%，特异性约为97.67%，χ2为35.78，P＜0.05。

3  讨论

阳性率是指在进行甲型流感病毒检测时，发现有异常的患者比率，具体来说，这个比率是通过统计检测样本中呈阳性的样本数量与总检测样本数量的比例得出的，用于评估某一地区或人群中甲型流感病毒的感染情况。本研究阳性率的分析结果显示，核酸检测的阳性率最高，达到了41.89%，这与其作为金标准的地位相符合，核酸检测能够直接检测到病毒的遗传物质，因此其敏感性和特异性都相对较高，这一结果也进一步证实了核酸检测在甲型流感病毒感染诊断中的重要地位。

特异性是指检测方法能够正确识别出无病状态的能力，也就是真阴性率，表示在实际上无病的人群中，检测方法给出阴性结果的概率，高特异性意味着检测方法很少会错误地将健康人判断为患病，即误诊率低；敏感度是指检测方法能够正确识别出有病状态的能力，也就是真阳性率，表示在实际上有病的人群中，检测方法给出阳性结果的概率，高敏感度意味着检测方法能够准确地检测出大多数真正患病的人，即漏诊率低。

甲型流感病毒作为引起人类流感的主要病原体，其准确、快速的诊断方法对于疫情防控和治疗具有重要意义。目前，抗原检测、抗体检测和核酸检测是常用的甲型流感病毒检测方法。以下是这三种检测方法的对比分析。抗原检测通过检测病毒表面的抗原蛋白来确认病毒感染，具有操作简便、快速的特点。在实际应用中，抗原检测适用于病毒载量较高时的快速筛查，如疫情暴发期间的初步排查。抗体检测是通过检测患者体内针对甲型流感病毒的抗体来判断感染情况。抗体检测的高特异性意味着在确认抗体阳性时，患者已经感染了甲型流感病毒。在临床实践中，抗体检测更适用于回顾性诊断、流行病学调查以及疫苗接种效果评估。核酸检测作为甲型流感病毒感染诊断的金标准，具有高度的灵敏度和特异性。核酸检测能直接检测到病毒的遗传物质，因此在病毒感染的整个过程中都能提供准确的诊断信息。

［参考文献］

[1]于甜甜,余晓,韩诗等.2016—2021年湖北省乙型Victoria系流感病毒流行病学特征及基因进化分析[J].疾病监测,2022,37(10):1310-1317.

[2]Javanian M,Barary M,Ghebrehewet S,et al.A brief review of influenza virus infection[J].Med Virol,2023,93(8):4638-4646.

[13]王颖.流感病毒检测中细胞培养法与实时荧光定量PCR法效果比较[J].医学信息,2021,34(9):179-181．

[14]马亚楠,谭兵,徐磊等.实时荧光定量PCR法对ICU患者痰液标本中鲍曼不动杆菌耐药基因的检测及其评价[J].吉林大学学报(医学版),2022,48(6):1623-1628.

作者简介：王江鸿，女，汉，天津市宝坻区，2001.11，本科，医学检验技术。

发表论文来源：2024届毕业论文