哮喘患者支气管肺泡灌洗液的细胞学分析

哮喘患者支气管肺泡灌洗液的细胞学分析

陈美丽  李智君  王江伟  郝智勇

解放军63650部队医院呼吸消化内科   新疆  841700

摘要：目的：通过支气管肺泡灌洗液细胞分类的研究，探讨对哮喘诊疗的临床意义。方法：选取在2019年11月至2020年10月在我院行支气管镜检查患者58例，分为哮喘组30例，对照组28例，分别进行BALF（支气管肺泡灌洗液细胞学检查）检查。结果：肺泡灌洗液细胞分类比较：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及上皮细胞计数两组比较有差异，差异无统计学意义(P＞0.05)。哮喘组巨噬细胞计数增高明显，差异有统计学意义。结论：肺泡灌洗液巨噬细胞显著增高可对哮喘诊疗提供帮助。

关键词：支气管哮喘   支气管肺泡灌洗液   细胞学检查

支气管哮喘是一种慢性气道炎症疾病，该病发病率逐年增高，发病机制复杂，气道的高反应性和气道慢性炎症为支气管哮喘发病基础，其中气道慢性炎症与气道中存在的多种细胞、因子等参与有关。支气管镜肺泡灌洗液检查是相对安全、易于接受的检查技术，该技术现在越多应用于呼吸系统疾病的临床研究。我们研究目的是通过对临床哮喘患者进行支气管肺泡灌洗液检查，利用支气管镜到达患者支气管等病变部位，注入生理盐水进行抽吸，收集肺泡表面的液体，检查细胞分类，探讨BALF检查在哮喘诊疗中临床意义。

1.材料与方法

1.1资料：选取在2019年11月至2020年10月在我院行支气管镜检查患者58例，分为2组，哮喘组30例，均符合《支气管哮喘基层诊疗指南2018年版》诊断标准，检查当日均无哮喘急性发作，年龄在18-60岁。对照组28例（肺结节12例 急性支气管炎8例 原发性支气管肺癌2例 罗道病1例 过敏性肺炎1例 支气管异物2例 间质性肺疾病2例）年龄在20-66岁。排除标准：1.哮喘急性发作患者；2.凝血功能严重障碍的患者；3.自身免疫疾病的患者；4.严重的心肺功能障碍的患者

所有患者行支气管镜检查及支气管肺泡灌洗术检查前，临床医师告知支气管镜检查的目的、方法及可能存在的风险，并签定有效的知情同意书，2组患者间年龄、性别方面差异无统计学意义。

1.2方法：所有患者术前完善血气分析、血常规、血型、凝血功能、肝肾功能、传染病四项、心电图及胸部CT等检查。了解患者的病史、有无药物过敏史，术前禁食水（4-6h），术前30分钟给予雾化吸入2%盐酸利多卡因注射液5ml局部麻醉，给予硫酸阿托品注射液0.5mg肌肉注射，减少气道分泌物。局部麻醉成功后，患者取仰卧位，固定头部，将电子纤维支气管镜（EB-270S）经鼻腔插入，进入声门、气管、支气管时分别给予2%盐酸利多卡因注射2-3ml局部麻醉，减少气道痉挛。观察鼻咽部、会厌、声门结构有无异常，进入支气管后观察气管黏膜颜色、气管活动度、观察软骨环、隆突、左右主支气管、各叶段支气管管腔是否通畅、受压或发育异常，是否有痰液、异物、或有赘生物等。患者均在心电监护及持续氧气吸入下进行，应用37℃0.9%氯化钠注射液20ml在左或右肺叶（病变部位）进行支气管肺泡灌洗，灌洗液约10ml 送检。术后禁食2-3小时，观察患者有无呛咳、咯血等不适，监测血压、心率、血氧饱和度等生命体征。

1.3细胞学检查：肺泡灌洗液细胞分类计数:取约5ml送检肺泡灌洗液置于一次性试管中(共设置两管)，将试管放置到离心机中，以1500r/min的转速离心3～5min，离心结束后弃去部分上清液，剩下约2ml沉淀液，稍震荡混匀后将沉淀液转置液基薄层细胞制片器具中，放置到液基薄层细胞涂片机中进行1200r/min，3min的离心甩片处理，使一定量细胞均匀平铺于载玻片上，将载玻片取出放置95%酒精中固定，经巴氏染色法染色，制片，每张片镜下计数200个细胞，分类计数各细胞成分所占比例，取两张涂片的平均值。

1.4统计学分析　数据以SPSS20.0统计学软件进行分析，计量资料以（±ｓ）表示，两组间比较行ｔ检验；Ｐ＜0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

2.1 58例患者全部完成支气管镜检查，镜下表现：45例支气管镜下未见明显异常；4例为支气管粘膜炎症改变；右下叶支气管异物2例；右上叶支气管变异2例；右肺中叶支气管变异1例；原发性支气管肺癌2例；左肺下叶内后段痰栓阻塞、左肺下叶后基底段明显狭窄1例；右下叶支气管闭塞、右中叶支气管狭窄变形扭曲1例。

2.2肺泡灌洗液细胞分类比较：两组中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、上皮细胞、淋巴细胞、巨噬细胞计数比较有差异，其中巨噬细胞比较差异显著，差异有统计学意义(P＜0.05)。中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、上皮细胞、淋巴细胞计数的比较有差异，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1  二组BALF细胞分类计数（±ｓ）

注：a哮喘组与对照组比较，P＜0.05

3.讨论：

目前支气管肺泡灌洗液检查越多应用于呼吸系统疾病的诊断与治疗，我们通过肺泡灌洗液细胞学基础分类分析，探讨哮喘诊治意义。哮喘发病机制复杂，与嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等多种细胞、炎症因子参与有关。

近年来人们更多地关注肺泡巨噬细胞与支气管哮喘的关系，哮喘最主要的病理机制为气道炎症反应，而巨噬细胞参与这一过程。有研究表明，在支气管哮喘病情发展过程中，肺泡灌洗液检查中细胞总数和巨噬细胞会出现动态的变化，提示了患者机体的炎症反应以及病症的演变过程[2,3]。本研究发现哮喘患者BALF细胞学检查中巨噬细胞明显增高，与有关研究相符。肺泡巨噬细胞在哮喘中既是免疫调节细胞，也是免疫效应细胞，其通过释放炎性因子、调节性细胞因子及炎症介质等参与哮喘的气道高反应、气道炎症、平滑肌增殖以及气道重构等过程[4,5]，肺组织巨噬细胞在不同疾病环境下出现不同的表型和功能，分为M1与M2型，M1型巨噬细胞参与哮喘患者气道炎症、气道高反应性病理过程，研究发现哮喘患者M1型诱导因子明显增高，在重度哮喘中更甚。M2型巨噬细胞主要作用是组织修复以及抑制炎症反应，M2型在哮喘中表达的标志物IL-4、IL-13，参与哮喘发病，尤其是与重症哮喘有关[8,9]。还有调节性巨噬细胞分泌并合成抑制炎症因子IL-10，可能在哮喘中产生负向调控作用，研究发现，调节性巨噬细胞可能通过IL-10抑制炎症反应，从而发挥保护作用，所以调节性肺组织巨噬细胞使其产生更多的IL-10有助于治疗哮喘提高新的方向[9]。巨噬细胞的表型都在哮喘气道炎症中发挥各自的作用，但在治疗方面研究较少，可以将其作为哮喘治疗的生物靶点进一步研究。

综上所述，支气管肺泡灌洗术对哮喘诊治具有一定临床意义，通过肺泡灌洗液检查寻求哮喘发病的病因病机，为其诊疗提供帮助，值得基层医院推广应用。

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