ABO疑难血型鉴定分析与处理

ABO疑难血型鉴定分析与处理

聂锋

安徽省宣城市人民医院

【摘要】目的分析ABO血型正反定型不一致的原因，制定应急处理方案以确保临床安全用血。方法 对我院收治的20例ABO血型正反定型不一致的患者作为本次研究对象，对研究对象进行疑难血型鉴定相关试验，寻找原因并最终确定患者血型。结果20例ABO血型正反定型不一致患者中有2例鉴定为ABO亚型、6例受到体内不规则抗体的干扰、2例ABO抗原减弱、3例ABO抗体消失、冷凝集干扰1例、多发性骨髓瘤干扰6例。结论 针对ABO正反定型不一致的患者，需要立即启动疑难血型鉴定相关试验，并结合患者病情、既往史等分析原因，准确鉴定ABO血型后方可安全用血。

【关键词】ABO血型；正反定型不一致；安全用血

宣城市人民医院院级科研项目（项目编号 KY202107）

ABO血型系统是现代医学确定的第一个人类血型系统，由奥地利免疫学、病理学家卡尔·兰德斯坦纳在1900年发现并于1901年确认[1-2]。ABO血型系统是根据人体红细胞表面是否具有特异性抗原分为A型、B型、O型和AB型四种血型类别。因为ABO血型系统抗原、抗体表达较强，如果输注不同血型的血液成分，极易发生严重的输血反应，甚至会危及患者生命[3]。患者受到个人体质、疾病、药物治疗以及外源性因素等影响，可能在进行ABO血型鉴定时，出现正反定型不一致的情况，如果不能及时正确的鉴定患者血型，就会耽误临床输血治疗或输注错误血型的血液而发生事故。ABO血型鉴定是输血科最基础也是最重要的工作之一，《临床输血技术规范》第十五条明确规定：输血科需要复查受血者和供血者的ABO血型（正反定型），正确无误时可进行交叉配血试验。ABO血型正反定型是否一致关系到患者的临床治疗和用血安全。本文对2019年2月～2022年12月期间来我院进行住院治疗的20例ABO血型系统正反定型不一致的血液样本进行分析和回顾性研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1临床基础资料  2019年2月～2022年12月期间来我院进行住院治疗的ABO血型正反定型不一致的血液样本20例。其中男性5例，女性15例；年龄32～84岁。

1.2试验仪器和检测试剂  贝索生物技术有限公司生产的血库专用离心机，汉密尔顿公司生产的全自动血型鉴定仪，微柱凝胶检测卡采用长春博迅生物技术有限公司生产的血型正反定型卡；稀有抗体血清购自于江阴力博医药生物技术有限公司，抗A、抗B血清、ABO标准红细胞、Ⅰ～Ⅲ号筛检细胞以及1～10号谱细胞均购自于上海血液生物医药公司。

1.3 试验方法 采用微柱凝胶法进行ABO正反定型鉴定试验，对ABO正反定型不一致的结果分别进行盐水试管法试验、不规则抗体筛查与鉴定、冷凝集排查试验、自身致敏对照试验等，同时调取临床资料对患者用药情况、自身疾病、既往输血妊娠史等因素进行调查分析。本次所有试验均按照厂家提供的仪器和试剂标准操作要求进行。对最终怀疑为ABO亚型的标本送江苏省血液中心做基因学检测。

1.4 ABO血型正反定型不一致判定标准：正定型和反定型判读结果不合；正定型凝集强度≤2+；反定型凝集强度≤1+；正定型为O型，反定型的价差≥2+。

2 结果

2.1 20例ABO血型正反定型不一致患者中，15例为反定型试验受到干扰所致，2例为正定型试验受到干扰所致，另外1例冷凝集、2例ABO亚型正反定型均受到不同干扰，其血清学检验结果详见表1。

表1  20例ABO血型正反定型不一致血清学检验结果

2.2 ABO血型正反定型不一致的原因分析和处理 20例ABO血型系统正反定型不一致患者中有2例鉴定为ABO亚型、6例受到体内IgM类不规则抗体的干扰（盐水试管法做对照）、2例ABO抗原减弱、3例ABO抗体消失、冷凝集干扰1例、多发性骨髓瘤干扰6例；20例患者均在调取患者临床资料结合相关试验分析后进行特殊处理，详见表2。

表2 20例ABO血型正反定型不一致的原因分析与处理

3 讨论

急性大出血患者、严重贫血患者和大面积烧伤患者等特殊病人往往需要进行输血治疗维持生命体征，而输血又需要确保血型一致方可进行输注。ABO血型系统是人类最常见的一个血型系统，四种血型中A型、B型和O型人群各占30%左右，AB型人群约占10%[4]。鉴于ABO血型系统红细胞抗原和血清抗体表达的特殊性，通常需要对患者进行ABO血型正反定型，只有正反定型结果一致才能确认患者的正确血型。然而受到某些外源性因素和内源性因素的影响，一些患者会出现ABO正反定型不一致的现象，对于这些特殊病例需要加以重视，确保血型鉴定的准确性，否则容易导致临床差错事故的发生。

造成ABO系统血型正反定型不一致的因素有很多，首先需要排查的是人为操作、仪器以及试剂的准确性，当这些外在因素排除后，如果还出现正反定型结果不一致时，就需要结合试验和患者自身因素进行逐一排查。不规则抗体是引起ABO正反定型不一致的重要原因之一[5-6]。不规则抗体大多属于IgG类，如比较常见的有抗E，一般不会在微柱凝胶的反定型孔中发生反应。但IgM类的不规则抗体则可以在微柱凝胶的反定型孔中发生反应，从而干扰我们对血型的正确判断。本文分析的20例ABO血型正反定型不一致，其中有6例系不规则抗体干扰所致，均属于IgM类抗体，如抗M、抗Lea等。冷凝集也是引起ABO正反定型不一致的因素之一，常常在冬季发生。冷凝集是部分人群体内含有能使红细胞在低温下产生聚集的冷凝集素所致[7]。冷凝集与正常凝集反应状态有所不同，4°C无需离心即出现凝集，用试管法在37°C水浴箱中均匀摇晃，冷凝集就会发生可逆性的散开，用37°C生理盐水对待检红细胞进行洗涤后即可消除干扰，检测正定型[8]；反定型可以用患者自身红细胞充分吸收冷抗体后检测反定型。正常人群中，冷凝集素效价不高，但在某些血液病人的血清中冷凝集素效价会很高，从而影响血型鉴定。此类患者输血应注意保温，如在盖被内放置热水袋，但不能直接放在血袋上，以免造成溶血。

ABO亚型也会导致ABO正反定型不一致，这是因为亚型抗原的表达分布较弱，正定型鉴定结果会弱凝集或不凝集，有些亚型血型还会产生同类别不同型抗体，如A2亚型患者体内会产生抗A1抗体[9]。对于亚型人群应当采用稀有血型抗体对患者进行血型鉴定，最好加做基因学检测，本文2例ABO亚型结合相关血清学实验结果，最终外送做基因学检测确定为亚型。异常M蛋白、右旋糖酐也会促使红细胞发生假凝集[10]。多发性骨髓瘤（MM）患者分泌大量异常M蛋白，常使反定型红细胞或者患者自身红细胞发生“缗钱”状凝集。右旋糖酐等分子量较高的药物也会引起红细胞出现“缗钱”状凝集，造成正反定型不一致。针对此类患者需要从患者自身病情出发，盐水试管中加以等量生理盐水即可消失。ABO血型系统的抗原抗体减弱或消失也会导致ABO正反定型结果不一致，老年人、婴幼儿、长期化疗患者等人群抗原或抗体表达会减弱或消失，从而引起正反定型不一致，此时可通过盐水试管法加大抗血清剂量进行确认[11]。

本次回顾性研究显示，ABO正反定型不一致影响因素最高的是不规则抗体及异常蛋白干扰所致。因本研究标本数量有限，所得结果具有一定的局限性，不能完全代表ABO血型系统正反定型不一致发生因素的概率，后期会加大研究范围，得到具有参考价值的研究资料。

总之，不规则抗体、异常蛋白干扰、抗原抗体减弱或消失、ABO亚型、冷凝集等因素都会导致ABO血型鉴定正反定型不一致，针对此类患者需要结合临床疾病资料、加做相关实验，有条件的进行基因学检测，准确鉴定ABO血型，确保临床安全用血。

参考文献

[1]李晨雪,李淑萍,李松涛,等.ABO血型正反定型及交叉配血实验在外科病人手术输血中应用[J].现代生物医学进展,2020,20(2):295-298.

[2]Daga S, Hussain S, Krishnan N , et al. Immunoglobulin isotype compositions of ABO specific antibodies are dependent on the inpidual patient blood group and blood group specificity: Results from a healthy donor cohort[J]. Journal of Immunological Methods, 2021，494:113053.

[3]薛雷.ABO血型正反定型不一致原因及对策分析[J].实验与检验医学,2021,39(1):242-244.

[4]曹丹,昝小玲,朱海峰,等.济南市无偿献血人群ABO血型及与Rh血型分布研究[J].华南预防医学,2021,47(4):416-420.

[5]谭庆芬.MN血型系统不规则抗体对ABO血型定型困难及交叉配血不合的影响[J].临床血液学杂志,2021,34(4):282-284.

[6]Xu CL, Cai XQ, Chen DJ, et al. Detection of Irregular Antibodies after Blood Transfusion for Children with Thalassemia in Hainan[J]. Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi, 2021, 29(1) : 243-247.

[7]谢惠益,周载鑫,顾海慧,等.16例冷凝集素造成的血型不合分析[J].中国输血杂志,2021,34(1):40-43.

[8]朱文刚，李凌波，钟靖.75例ABO血型正反定型不符原因调查与分析[J].中国输血杂志，2022,35(7):751-754.

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[10]成婧,蒋敏,林春艳,等.多发性骨髓瘤患者ABO血型鉴定异常的原因分析及处理方法[J].临床检验杂志,2020,38(6):440-442.

[11]江涛,安宁,杨世明,等.血型抗体减弱或缺乏导致ABO血型正反定型不相符的检测分析[J].细胞与分子免疫学杂志,2021,37(3):253-256.