温度和防腐剂对24小时尿蛋白检测结果影响的研究分析

温度和防腐剂对24小时尿蛋白检测结果影响的研究分析

皮特曲西

西昌市疾病预防控制中心  检验科  四川西昌 615000

【摘要】目的：分析防腐剂以及温度对24h尿蛋白检测结果的影响。探讨留取24h尿测定尿蛋白加入防腐剂且控制温度的必要性。方法：在同一时间收集20例健康体检者尿蛋白定性为阴性的尿液后，加入不同量的蛋白标准品和大肠杆菌菌液，检测室温保存以及2-8℃保存24h后的尿蛋白水平。采用单因素方差分析探讨含有不同细菌数的尿液不同温度保存24h后清蛋白水平变化情况。结果：添加添加剂后，不同量的菌液标本留取即刻检测结果与24h检测结果无明显差异，P>0.05。低温保存下24小时蛋白浓度与常温保持相比无明显差异，P>0.05。但其中的细菌量与常温相比明显较低，P<0.05。结论：本实验得出，是否添加防腐剂和低温保存不会对24h尿蛋白检测的结果产生较大影响，但常温保存会大大增加样品中的细菌数量，需要引起重视。

【关键词】温度；防腐剂；尿蛋白定性检测；保存

尿蛋白定性检测阳性或每日尿蛋白定量检测大于150mg/24h尿，就被称为蛋白尿。蛋白尿不仅仅能够反映患者肾脏损伤严重程度的重要指标，也是反映疾病预后、观察疗效的重要指标。想要获得准确的测定结果，正确的标本留取以及良好的保存条件是分析前质量控制中关键的一步[1]。此项检查标本的保存方法一般有冷藏法和化学防腐剂法。然而在实际工作中，无论是冷藏法还是化学防腐剂法，工作应用起来由于诸多因素影响而存在多方面不便。目前临床对此项检查是否需要添加防腐剂以及存储温度等方面具有较大争议。由于防腐剂的主要目的为抑菌，低温保存的主要目的是避免标本变质[2]。由此，本文将进一步通过不同温度下不同细菌浓度变化对蛋白的影响进行分析。探讨以检测尿蛋白为目的的24h尿液，不同温度保存情况下是否应该加入防腐剂。

1 资料与方法

1.1一般资料

留取健康体检者蛋白定性为阴性的尿液。

1.2仪器与试剂

强生FS5.1全自动干式生化分析仪以及VITROS尿蛋白测定试剂盒（批号为0620181）,Sysmex UF-1000i自动尿沉渣分析仪及其配套试剂，Mejer-600干化学尿液分析仪及其配套试剂、质控品。所有尿液样本检测均应使用同一台仪器，同一批号试剂。

1.3方法

收集方法为自然排尿法，应避免经血、白带、精液、粪便等杂质混入。此外，还应注意避免烟灰等异物混入，在同一时间收集健康体检者蛋白定性为阴性的尿液于5L容量的清洁带盖塑料桶内，混匀放置。用上述收集尿液标本作为基底液，平均分成2份，一份加入防腐剂，一份作为对照组不添加防腐剂；两份分别留取尿液60份并平均分为3份，各自加入不同量的菌液，使其细菌数分别为小于100个/微升、5000个/微升、大于10000个/微升。每份样本个取5毫升于EP管中，测定即刻蛋白值；然后将两份标本保存于常温，一份采用2-8℃低温保存，放置24h后再各取5ml于EP管中，将所有保存的尿液标本在同一时间进行检测。

1.4观察指标

（1）防腐剂对检测结果影响：对比是否添加添加剂对不同量菌液蛋白值检测结果。

（2）不同温度对检测结果的影响：对比不同温度下不同量菌液的蛋白值情况。

1.5统计学处理

采用SPSS 23.0软件分析及处理数据，计数资料采用百分比表示，采用х2检验；计量资料以（±s）表示，采用t检验，多组间对比采用方差分析，以F值计算，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1对比是否添加剂对不同量菌液的检测影响

添加添加剂后，不同量的菌液标本留取即刻检测结果与24h检测结果无明显差异，P>0.05。见表1。*

表1对比是否添加剂对不同量菌液的检测影响（n=20,g/L）

注：#P对比无统计学差异，#P>0.05。

2.2对比不同温度对检测结果的影响

低温保存下24小时蛋白浓度与常温保持相比无明显差异，P>0.05。但其中的细菌量与常温相比明显较低，P<0.05。见表2。

表2对比不同温度对检测结果的影响（n=20）

注：*P对比有统计学差异，*P<0.05；#P无统计学差异，#P>0.05。

3 讨论

临床上尿液蛋白检测常用于多种疾病的诊断和随访，但干化学分析只能作为过筛，怀疑存在蛋白尿需要进一步定量分析。肾病患者在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白水平的病例，最好使用定量检测。尿液中蛋白定量能够作为肾损伤程度的参考指标，其检测不但适用于健康者体检对肾脏及全身其他系统的疾病进行早期排查，也可用于慢性肾小球肾炎、肾病综合征等疾病的疗效观察[3]。由于24h尿液的标本留取时间较长，在整个的收集过程中常常会因为受到环境、温度等因素的影响而导致尿液中细菌繁殖、代谢，进而影响尿液标准的质量。而需要获得准确的测定结果，就需要准确留取标本。标本检测结果受到多种因素的影响，因此需要选择良好的保存方法。由此本文探究温度和防腐剂对标本检测值的影响。

本实验针对环境温度和保存的事件进行了深入讨论，实验研究表明，添加添加剂后，不同量的菌液标本留取即刻检测结果与24h检测结果无明显差异，P>0.05。低温保存下24小时蛋白浓度与常温保持相比无明显差异，P>0.05。但其中的细菌量与常温相比明显较低，P<0.05。在本实验地区，保存于室温，不加防腐剂的情况下，不同蛋白水平且含不同细菌数的尿液蛋白可稳定保持24h，在24h内测定值无明显差异。尿液通过低温和常温保存可分别抑制和促进细菌的生长与繁殖，但是不会对尿蛋白测定的结果准确性造成较大影响。用尿沉渣分析仪测得即刻与放置24h后的尿液，其细菌数虽有较大的变化，蛋白含量却无明显差异，但可以看出略有升高，也说明了在不加防腐剂的情况下，细菌在尿液中大量繁殖，会产生一定量的蛋白，但对于24小时尿蛋白含量的影响无明显差异。将标本放置于常温环境中，其细菌量出现了明显的增加，通过此研究不难推测，随着环境温度的升高，到一个适宜的条件后，细菌的生长繁殖能力会出现增强，并会导致尿液中的蛋白质被分解，进而导致检测的结果存在差异。因此，本文认为，24h的尿蛋白检测标本能够不添加防腐剂进行常温保存，但是如果超过24小时，尽量在低温状态下以延长标本的保质期，保证其检测标本结果的准确性。需要注意的是，由于24h尿液保存使用防腐剂收集过程复杂，患者很难接受，其检测由于个体的变异性可能会受影响。此外，防腐剂对患者及实验室工作人员均会带来一定的危害性，并增加操作的复杂性，从而增加错误发生的机会。因此可依据自身需求在尿液标本中添加添加剂或实行低温保存。

综上所述，本实验得出，是否添加防腐剂和低温保存不会对24h尿蛋白检测的结果产生较大影响，室温保存是一种安全、简便、可行的方法，但常温保存会大大增加样品中的细菌数量，可根据实际地域决定保存样本的温度。

参考文献

[1]宋洁,陈凌云.温度和防腐剂对24小时尿蛋白检测结果影响的初步研究[J].医学检验与临床,2023,34(5):55-57.

[2]邝婉仪,杨丽媛,李梅爱,等.不加防腐剂尿液保存方法对24h尿蛋白定量测定的影响[J].世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊）,2021,21(14):246-247.

[3]蔡宇雨,邹良强,刘娜.不同条件保存24小时尿液对生化检测的影响[J].标记免疫分析与临床,2019,26(5):837-840.