带你了解什么是细菌的鉴定分析

带你了解什么是细菌的鉴定分析

冯涛

邻水县石滓镇卫生院 四川 广安 638500

细菌鉴定指的是把不了解的细菌根据生物学特征融合到已了解了的细菌里，然后就相似度进行对比和分析，最终掌握该细菌的分类。那么接下来，本文就来具体的分析一下什么是细菌的鉴定。

一 临床意义

部分细菌会分解氨酸，产生吲哚，能够和二甲基氨基苯甲醛反应形成玫瑰吲哚，所以主要是以细菌能不能够分解色氨酸产生吲哚为标准来进行细菌鉴定。

异常结果：（1）肠道环境为非动态平衡，正常细菌处于比例失调状态，会导致病人出现胃酸、胃胀、腹痛等症状，甚至还有可能出现消化道出血、胃癌等。（2）埃希氏菌会导致病人诱发支气管炎，会因肺泡壁破坏而出现小脓肿。克雷伯菌会诱发呼吸道感染、化脓性脑膜炎、尿路感染等症状。此外，沙门菌属、变形杆菌会诱发不同的症状。（3）部分细菌水解淀粉，同时采用所分解的产物，从而使身体产生不适反应。通常，消化道出血、穿孔等细菌感染的病人有必要接受检查。而在还未接受检查的时候要保持合理饮食，并在检查期间保持良好的依从性。

二 细菌类型

（一）铜绿假单胞菌

（1）概述

铜绿假单胞菌分布极广，在土壤里比较常见。通常在空气和皮肤、呼吸道上都含有铜绿假单胞菌。该细菌在潮湿的状态下易于存活。

（2）培养鉴别

属于专性需氧菌，在25℃-30℃之间易于存活，尤其是其在4℃环境下不会成长，但处于42℃时能够进行鉴别。在普通培养基上能够生长并会形成包括水溶性色素，而在血平板内会出现透明溶血环。

（3）临床表现

属于条件致病菌，是导致院内交叉感染的主要病菌。对于代谢性疾病、血液疾病和接受了手术的病人很有有可能感染该病菌。

（二）鲍曼不动杆菌

（1）概述

其是非发酵革兰阴性杆菌里假单胞菌目莫拉菌科的不动杆菌属，本菌革兰染色呈现阴性，氧化酶呈现出阴性。

（2）培养鉴别

鲍曼不动杆菌很容易粘附在物体上。在35℃下容易存活。具有非常强的抵抗力，粘附于干燥物体上能够存活25天，这要比别革兰阴性杆菌存活时间都要长。

（3）临床表现

    该细菌在医院常见，并且容易存活，主要粘附于皮肤、口腔、胃肠道里，重症病人非常容易感染。该细菌会导致病人诱发呼吸道感染、泌尿系统感染等。  

三 细菌鉴定步骤

（一）吲哚试验

把接种环接种待试细菌的新鲜斜面培养物融入进邓亨氏蛋白胨溶液里，温度达到37℃之后进行培训1h-2h。往培养液里添加2ml-3ml二甲苯，然后均匀摇晃，放置一段时间以后，顺着试管放进2毫升的试剂。若二甲苯下方的液体呈现出红色就代表出现了阳性反应。也可往脱脂棉上添加欧立希氏试剂，然后往相同的位置添加高硫酸钾，放到容纳了培养液的被检试管，和液面保持半寸的距离，紧接着再放到烧杯里，当脱脂棉上产生红色就代表阳性。该方法比较复杂，不过不会浪费试剂，并且能够保证准确性，由于把试剂放进液体里，吲哚与粪臭素会出现阳性反应，不过在采用该方法后，仅仅是吲哚产生阳性。也可往滤纸片上滴入1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%浓HCI溶液，之后将接种环刮取一环琼脂的纯净物涂抹到滤纸当中。细菌涂抹附近出现蓝色代表阳性，而在颜色上没有变化则代表阴性。

（二）淀粉的水解

在催化反应下，会使淀粉分解；具体过程为：最先会出现分子量少的糊精，之后会水解，出现麦芽糖，再分解后会出现葡萄糖。试剂的使用：碘化钾和蒸馏的水的剂量分别为2g和300ml。培养基：把细菌在平板上进行接种，放到温箱里培养1h，温度要达到36℃，将革兰氏碘液融入到菌落里，若出现蓝色就代表阴性，其他颜色就代表阳性。

（三）β-半乳糖苷酶试验

采用80mg 0.75M ONPG溶液与15ml蒸馏水混合，然后放进缓冲液，并放入到冰箱里进行保管，冰箱的温度要达到4℃。方法：通过无菌生理盐水制成菌悬液，添加ONPG液，进行20min到3h的水浴，观察结果。若在20min到30min的时间范围内产生黄色，就代表阳性。

四 细菌鉴定方法

（一）生化鉴定

生化鉴定是常用的细菌鉴定方法，主要是根据细菌对营养物质的分解能力和在代谢产物上的区别。蛋白质分解产物实验、酶触实验等是生化鉴定所主要采用的方法。

（二）血清鉴定

对具有大量血清型的细菌会采用血清鉴定方法，主要是采取玻片凝集试验、免疫荧光法、间接血凝试验等，对样本里致病菌的特异性抗原进行检验。通过以掌握的抗体对准备接受检验的细菌进行检验，或使用接受过抗原检验的病人的血清里的抗细菌抗体的效价，具有非常强的特异性，通常在进行生化鉴定的同时明确诊断结果。

（三）分子生物学检测

该方法主要使用于得不到成长的人工培养基或成长过快的细菌以及对营养具有非常高需求但又培养难度大的细菌，核酸杂交、生物芯片等主要检验方法；而前者还分为斑点杂交等方面的技术。

（四）通过生化特性进行细菌鉴定

对生化特性的研究就是对细菌的新陈代谢的研究。比如葡萄糖通过酶的作用使pH降低，从而改变颜色。比如把碳源分配给乳糖、蔗糖等，按照糖养分做细菌鉴定。也可以通过蛋白质的代谢、脂代谢反应进行细菌鉴定。

（五）通过抗原特性进行细菌鉴定

通过免疫反应中抗原-抗体反应，把抗体融入进乳胶颗粒，在有关的抗原形成后，抗体会主动粘附。接种已分纯的细菌，通过观察其有没有产生抗原-抗体反应来进行细菌鉴定。

（六）通过颜色进行鉴定

通过平皿中菌落的颜色采取细菌鉴定，通常平皿普遍采用培养基，而目标菌则是常见细菌。