茯苓软膏的制备工艺研究

茯苓软膏的制备工艺研究

赵敏

徐州生物工程职业技术学院 

摘  要：本课题选取古方中苓桂术甘汤剂作为研究对象，采用煎煮法，制定茯苓膏的工艺流程。使用单因素法与正交试验，选取清膏率当作参考指标进行试验检验评价，煎煮时间、加液料比、煎煮次数为3因素，用L9（33）正交实验优选出膏方，确定各因素对整个提取工艺的影响，制定最优的煎煮提取工艺条件。进行药料浸泡、煎煮、浓缩、炼糖、收膏、分装等制备膏滋。对成品进行性状检查、相对密度检查、含水量检查、不溶物检查。经优选的工艺条件为浸泡时间50min、加水倍数10倍、煎煮时间90min、煎煮次数2次为最佳制备工艺。茯苓多糖的含量平均值为14.48mg/g。结果表明精密度、稳定性、重复性和回收率均良好，均符合《中国药典》2020版四部有关膏滋项下的规定。

关键词：茯苓；制备工艺；膏滋；质量研究

中药是我国的历史悠久的文明瑰宝，如今已经成为中国的代名词。为中华民族做出了不可估量的贡献，由于在现代已有的化合药物中开发新药已经越来越困难，并且在开发的同时很难避免化和药物中的毒副反应作用。在科技越来越发达、生活越来越美好的时代，人们对健康和寿命的渴求也越来越深入。从最简单的治疗康复模式，转移到了预防、保健的模式。数年来人们都在结合传统中药医学理论，不断奋力研究，最终把目光转移到天然中药药物上来，只为开发对人身体副作用更加小的新型药剂。人类回归到大自然，并对天然绿色药品取其精华、去其糟粕，得到改良后的新型药剂，用来治疗疾病和身体保健，已经逐渐成为当代热点。出膏率对膏滋制剂中的含药量有极大影响，这正是中药的独特性所在，在制备过程中，将中药汤剂浓缩成中药膏滋，是一个物理反应过程，是看得见的成果。为了将制作成本降到最低，而且还要保证膏滋出膏率的指标和药品质量，我们需要进行严谨的正交试验，以出膏率为考察目标，得出膏滋制备工艺的最佳制备条件。

1.1  实验材料

实验所用药材茯苓、桂枝、白术、甘草均购于修明堂滋补养生旗舰店。

茯苓，为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。产地来源于云南。经哈尔滨商业大学中药教研室鉴定结果均符合项规定，为真品。

桂枝，为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl.的干燥嫩枝。产地来源为广西。经哈尔滨商业大学中药教研室鉴定结果均符合项规定，为真品。

白术，为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根茎。产地来源于浙江。经哈尔滨商业大学中药教研室鉴定结果均符合项规定，为真品。

甘草，为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎。产地来源于西藏。经哈尔滨商业大学中药教研室鉴定结果均符合项规定，为真品。

2  实验内容与方法

2.1  浸泡时间考察

按处方的比例，精密量称取6份药材（茯苓12g、桂枝9g、白术9g、甘草6g），每份36g，各加入10倍的水量，水面没过药材，盖上封口膜密封，洁净室恒温放置，分别浸泡20min，30min，40min，50min，60min，70min，纱布与滤纸过滤，药材压干，测定剩余水量，计算各时间点药材吸水率。

2.2  单因素试验

2.2.1  料液比

取处方药材5份，按比例每份36g（茯苓12g、桂枝9g、白术9g、甘草6g），提取时分别用4倍、6倍、8倍、10倍、12倍不同水量100℃提取30min，将滤液浓缩至清膏状，制成供试品方法与中一致，得到供试品干重。按公式（2-1）计算出膏率。以获得最佳料液比。

2.2.2  煎煮时间

取处方药材5份，按比例每份36g（茯苓12g、桂枝9g、白术9g、甘草6g），提取时加12倍量水，分别100℃提取30min、60min、90min、120min、150min各一次，将滤液渐渐浓缩至清膏状态，制成供试品方法与中一致，得到供试品干重。按公式（2-1）计算出膏率。考察处方煎膏出膏率差异，以获得最佳提取时间。

2.2.3  煎煮次数

取处方药材5份，按比例每份36g（茯苓12g、桂枝9g、白术9g、甘草6g），煎煮时每次加6倍量水，提取30min，分别100℃提取1次、2次、3次、4次、5次，合并提取液浓缩至清膏状态，制成供试品方法与中一致，得到供试品干重，按公式（3-2）计算出膏率。考察处方煎膏出膏率差异，以获得最佳煎煮次数。

2.3  正交试验

2.3.1  正交试验设计

传统膏滋提取工艺过程中，料液比、煎煮时间、煎煮次数对提取效果影响较大，本实验选取以清膏的出膏率为考察指标，对其进行L9（33）正交实验考察，以优化制备提取条件。

按确定的处方用量称取药材，置于药材置煎煮器中煎煮，煎至水煎液气味和颜色变淡，将制得的药材药汁用筛网进行过滤，再次倒入煎煮器中进行浓缩，最后盛出备用。取供试品5g，放置在已经称量过重量的圆形平底凹槽玻璃器皿中，再放入能将供试品烘干的干燥箱中烘干。定时进行成品称重，直到连续两次称定，重量不再改变时取出。根据称定重量计算出膏率。

2.4  工艺验证

按10倍处方量称取3份360g的药材，用上述实验确定的最佳工艺流程，同样操作，合并煎煮液并浓缩至1000ml，盛放备用。出膏率的测定方法与中过程相同。记录茯苓膏的出膏率。验证此工艺是否稳定准确。

2.5  膏滋的制备工艺

药料浸泡→煎煮→浓缩→炼糖→收膏→装膏→凉膏→储存

2.5.1  浸泡

取将茯苓、桂枝、白术、甘草洗净，处理成小块，加水量为中药饮片的8～10倍，超出饮片液面2～3cm左右。浸泡时间为50min。膏方处方中，如大部分是根茎类药材，则更应充分浸泡，保证膏方的出膏量，以及成膏质量。

2.5.2  煎煮

将浸泡好的中药饮片和浸泡水倒入不锈钢锅中，采用蒸汽加热方式煎煮3次。首次加水量为8～10倍的浸泡水，先文火加热，逐渐加大火力至沸腾时开始计时，煎煮2h，将药汁滤出备用。二次与三次煎煮的加水量为药料的6倍左右，煎煮时间分别为2h和1.5h。输出温度平稳，加热均匀，能有效保证膏体色泽的均匀与一致。最终合并三次提取液与药材压榨液，过滤得到纯净药液备用。

2.5.3  浓缩

将纯净溶液置入不锈钢锅中，先采用大火煮沸，待药液稍变浓稠后，改为文火徐徐蒸发浓缩，直至浓缩为清膏。在此过程中，搅拌浓缩，在药液在沸腾时应勤搅拌，不断地撇去浮沫，以防焦底及粘锅。

2.5.4  炼糖

从药物吸收、效率浓度、使用口感几个方面考虑，选蔗糖做为矫味剂。

炼蜜至出现鱼眼泡，即中密程度，蒸烊备用。炼蜜不仅能控制含水量，能避免膏滋存储时发生返砂现象，同时将杂质除去，还能杀死影响膏滋储存的微生物，防止滋生细菌。

2.5.5  收膏

将得到的清膏继续浓缩，使清膏中的水分汽化为水蒸气，让清膏更加纯净，加入炼制的炼糖，不停地顺时针一个方向进行搅拌，直到成膏，以防焦底。其中清膏量与炼糖用量平均比例为1∶2，加快搅拌，使之充分融合，促进水分蒸发。判断成膏的标准是：“滴水成珠”“鱼眼泡”等。

2.5.6  装膏

事先清洗玻璃密封罐，用75%的乙醇对密封罐、小木铲进行消毒，并放在干燥箱中干燥。趁热将熬制好的膏滋装入容器内，移入凉膏间。

2.5.7  凉膏

凉膏时间一般在12h以上，自然放凉，凉透后方可加盖。

2.5.8  贮存

待膏滋完全凉透，将膏滋放在阴凉的地方储存，避免阳光直射，忌让生水进入膏方。

2.6  膏滋的质量检查

2.6.1  性状

本品为煎膏剂。从外观的颜色、形态、气味等方面考察。参照《中国药典》，成品膏应为粘稠流状液体，无异味，膏滋细腻、黑似如漆、色泽光亮，膏体稠度中等。

2.6.2  相对密度

标准参照《中国药典》相对密度测定法（通则0601）测定。取本品10g，加水20ml稀释后，混匀，作为供试品水溶液。比重瓶法：除其中规定外，取供试品适量，精细称定，再加水约2倍，精确称定，均匀混合，作为供试品水溶液。照相对密度测定法测定含水量

取制得的煎膏剂称重2g后放入称量皿中，打开玻璃盖，在100～105恒温干燥箱中干燥5h，盖上盖儿，移入干燥器冷却30min，精确称量重量。

2.6.3  不溶物

取制得的煎膏剂适量，加热水200mL，搅拌使到完全溶化后，静置3分钟后观察，观察溶液中是否有焦状等异物出现。

3  实验结果

3.1  浸泡时间结果

浸泡时间结果如表3-1所示，药材在浸泡50min后，药材吸水重量不再有明显的变化，说明各类药材吸水已达到了饱和状态，基本浸透，这时候的药材吸水率已经达到169.5%，考虑到药材、人为操作等各种因素，既要保证药品浸泡充分，注意久泡细菌滋生，又要结合实际，节约时间与资源。针对浸泡时间的考察结果，缩小误差，最终选定浸泡时间为50min。

3.2  单因素试验结果

结合出膏总质量、供试品干重、出膏率综合评价，在水量加入8倍料液比之后，达到最好效果。以从节约资源的角度考虑，选择8倍左右料液比为最佳考察对象。

3.3  工艺验证结果

在最佳提工艺条件下，出膏率含量波动小，出膏率平均值为21.32%较正交表中最高值（22.59%）少1.27%；说明该提取工艺条件稳定，符合实际情况，与正交试验结果一致。

3.4  膏滋的质量检查结果

膏滋成品外观性状良好，经多批样品的自然属性检查，均为深棕色粘稠状半流体液体、光泽均一、气香微味甜、味道微苦。检查结果如表所示。

表评分项目和评分标准表

4  讨论

对于制备工艺研究，由于我所做的膏滋处方中不仅只有一位药材，是由多种药材组合配伍，所以需要在各个方面对药材的指标进行考察。本处方的组成为根茎类药材，浸泡时间是影响煎煮分离提取综合效果的因素之一，吸水率对清膏的出膏率也有极大影响，为了减少浸泡时长对提取工艺的影响，以浸泡时间对吸水率为考察指标，单独考察。药材在浸泡50min后，烧杯中水量不再变化，药材吸水体积也趋于稳定，说明药材吸水效果已达到饱和状态，此时药材吸水率已达到169.5％，从生产现实情况出发，考虑到药材、人为操作等各种因素，保证各类药材浸泡充分和节省时间，以及减少实验偏差，最后的结果确定药材的浸泡时间为50min。根据单因素试验，从环境保护和节约水源考虑，选择料液比8倍左右、煎煮时间90min左右、煎煮次数2次左右为考察对象。

在煎煮过程中，以出膏率为因变量做正交试验，对料液比、煎煮次数、煎煮时间三个个自变量做研究，得到了最佳提取工艺研究的条件。出膏率是影响膏滋质量稳定性的重要因素，让每批膏滋的出膏率都是固定数值，是非常艰难的，但将其控制在合理科学的范围内，则可以实现的，符合出膏率范围能保证制剂的品质和疗效。出膏率与产品的质量和成本关系密切相关，所以出膏率一直都是中药制剂生产过程中的重要参数。出膏率虽重要，但不是唯一的指标，也不是越高越好。

对于浓缩工艺，检测药液浓缩的相对密度，得出膏滋密度不低于1.27，符合规定实验要求。最终，制备完成，经多批样品的自然属性检查，均为棕褐微黑色的粘稠状半流体液体、气味香微甜、味道微苦。含水量没有超过26.71%，膏滋制剂的含水量一般在20%~30%，低于20%会造成膏滋过硬，影响口感，高于30%会造成细菌滋生，易腐败。不溶物检查并无焦屑物。经过一段时间放置，并未出现霉变现象，说明所制成品稳定性很好。

通过考察精密度、稳定性、重复性和回收率，以此验证整个实验是否流畅、合理和科学。结果表明实验的精密度、稳定性、重复性和回收率均良好。测定茯苓多糖的含量平均值为14.48mg/g。

5  结论

本文以古方中苓桂术甘汤剂作为研究对象，采用煎煮法，制定茯苓膏的工艺流程。使用单因素法与正交试验，以清膏率为指标进行检验评价，加液料比、煎煮时间、煎煮次数为3因素，用L9（33）正交实验优选出膏方，确定因素条件影响，制定最佳煎煮工艺参数。进行药料浸泡、煎煮、浓缩、炼糖、收膏、分装等制备膏滋。对成品进行性状检查、相对密度检查、含水量检查、不溶物检查。结果得出，用本处方作为研究对象得出的膏滋，性状为黑亮滑腻粘稠流体，有中药清香味儿，口感绵密、微苦。无焦屑不溶物，相对密度、含水量也达到标准。经优选的工艺条件为浸泡时间50min、料液比10倍、煎煮时间90min、煎煮次数2次为最佳制备生产工艺。茯苓多糖的含量平均值是14.48mg/g。结果表明各考察指标均符合《中国药典》2020版四部有关膏滋项下的规定。

参考文献：

[1]顾思浩,张薇,王冰.经典名方苓桂术甘汤历史沿革[J].中国医药导报,2020,17(21):145-148.

[2]周峰峰,龚飒,陈逸云.叶天士、吴鞠通对苓桂术甘汤方证的发挥[J].河南中医,2020,40(01):36-38.

[3]张群群,钱芳,徐玲玲.中药膏方制备工艺的研究进展[J].上海医药,2021,42(15):82-85.

[4]温思萌,王亚冬,昝立峰,常世敏,薛强.响应面优化酶法提取茯苓多糖工艺[J].中国食品添加剂,2021,32(08):36-43.

[5]蔡成龙. 茯苓皮总三萜脂质体的研究[D].山东中医药大学,2021.

[6]叶丹,张越,杜雅婷,张悦,章娜,赵珍,赵雨彤,陈卫东.茯苓皮总多糖提取纯化工艺研究[J].海峡药学,2020,32(03):33-38.

[7]颜冬兰,谢安,袁莉,胡展晴,黄胜.茯苓加工炮制、成分分析及体内代谢研究进展[J].亚太传统医药,2019,15(09):176-179.

[8]李晓洁,曾百慧,陈慕兰,郭毓菲,张诗泉,向福,吴鹏.酸性茯苓多糖的提取工艺优化[J].中国酿造,2018,37(10):158-161.

[9]殷金玲,马亮.人参甘草茯苓膏的提取工艺[J].食品安全导刊,2018(21):141-142.

李世杰. 发酵与酶解转化茯苓多糖工艺及其产物活性研究[D].贵州大学,2018

作者简介：1979年出生，赵敏，中国农业科学院硕士    

徐州生物工程职业技术学院药品食品学院实验师