蚕蛹蛋白粉增强免疫力功能研究

(整期优先)网络出版时间:2024-01-31
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蚕蛹蛋白粉增强免疫力功能研究

康艳萍

长春大政药业科技有限公司 吉林 长春  130000

目的:实验研究蚕蛹蛋白粉增强免疫力功能。方法:以小鼠为研究对象,根据《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》“一、有助于增强免疫力检验方法”,进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、抗体生成细胞检测、半数溶血值HC50的测定、小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、NK细胞活性测定。结果:蚕蛹蛋白粉能够增强小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、NK细胞活性,与对照组比较有显著性差异。结论:蚕蛹蛋白粉有助于增强免疫力。

关键词蚕蛹蛋白粉;免疫力;保健食品

蚕蛹,为蚕蛾科昆虫家蚕蛾的蛹。蚕蛹性平,味甘,无毒。《本草纲目》记载蚕蛹“为末饮服,治小儿疳瘦,长肌,退热,除蛔虫;煎汁饮,止消渴。”《医林纂要》谓蚕蛹“和脾胃,去风湿,长阳气。”可见医药著作中记载蚕蛹具有和脾胃、祛风湿、生津止渴、滋补强壮等作用。我国蚕蛹资源丰富,蚕蛹蛋白含量高,氨基酸种类丰富,且平衡性好,是一种极具经济价值和开发价值的自然资源。研究表明,蚕蛹中富含优质蛋白,占干蚕蛹质量的45%~50%。蚕蛹蛋白不仅是蚕蛹的活性成分,并且集中表现了蚕蛹的营养价值和生理功能[1]。目前,蚕蛹蛋白在食品、医药、工业、生物等领域都有广阔前景[2],具有提高免疫机能、抗疲劳、促进肝细胞再生、保护肝脏、抗癌等作用[3]。本实验以蚕蛹蛋白粉为受试物,对蚕蛹蛋白粉的增强免疫力功能进行研究,为蚕蛹蛋白粉作为保健食品的开发应用提供理论依据。

1  材料与方法

1.1受试物

本研究受试物为蚕蛹蛋白粉,是蚕蛹经干燥、粉碎、脱脂、酶解、脱色、分离、浓缩、干燥等主要工艺制得的淡黄色粉末,人体口服每日推荐用量0.9g,成人体重按60kg计算,折合剂量0.015 g/kg·bw。

1.2受试动物及分组

湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供的SPF级ICR雌性小鼠200只,体重18g~22g。实验动物生产许可证号为SCXK(湘)2021-0002。受试动物分为A、B、C、D、E五大组,每一大组40只小鼠。A组,进行小鼠碳廓清实验;B组,进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定;C组,进行小鼠脏器/体重比值测定、半数溶血值HC50的测定和抗体生成细胞检测;D组,进行迟发型变态反应实验;E组,进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。每大组按小鼠体重随机分为4小组,即空白对照组和低、中、高剂量组,每一小组10只小鼠。

1.3实验条件

为屏障环境,实验期间环境温度22℃~26℃,湿度45%~70%。

1.4剂量选择及样品处理

根据人体口服推荐用量,设蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量分别为0.075 g/kg·bw、0.150 g/kg·bw、0.450 g/kg·bw(分别相当于人体推荐用量的5、10、30倍)。低、中、高剂量组受试液配制时分别取样品0.50g、1.00g、3.00g加蒸馏水定容至200mL。各组分别给予受试动物灌胃,每天灌胃一次,灌胃体积为0.2 mL/10g·bw,连续灌胃30天。空白对照组灌胃予以等体积的蒸馏水。

1.5 实验方法

根据《保健食品功能检验与评价方法(2023 年版)》“一、有助于增强免疫力检验方法”进行小鼠体重、脏器/体重比值测定、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)、迟发型变态反应实验(足跖增厚法)、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)、半数溶血值HC50的测定、小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)。

实验结果

2.1  小鼠体重、脏器/体重比值测定结果

与对照组比较,蚕蛹蛋白粉各剂量组小鼠实验初、中、末期体重、体重增长、脾脏/体重比值、胸腺/体重比值均无显著性差异(P>0.05),说明蚕蛹蛋白粉对受试小鼠体重、脏器/体重比值无明显影响。

2.2  小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能测定结果

与对照组比较,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组小鼠足跖肿胀度差异有显著性(P<0.05),ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力差异无显著性(P>0.05),说明蚕蛹蛋白粉能够提高小鼠迟发型变态反应能力,细胞免疫功能结果阳性。与对照组比较,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组小鼠溶血空斑数、半数溶血值差异均有显著性(P<0.05),说明蚕蛹蛋白粉能够提高小鼠抗体生成细胞数及半数溶血值,体液免疫功能结果阳性,测定结果见表1。

表 1小鼠细胞免疫、体液免疫功能测定结果(n=10x±s)

分组

细胞免疫

体液免疫

足跖肿胀度/(mm)

不加ConAOD

ConAOD

淋巴细胞增殖能力(OD差值

溶血空斑数/

(/106个脾细胞)

半数溶血值

空白对照组

0.38±0.24

0.186±0.025

0.214±0.017

0.028±0.014

118±35

130.01±26.55

低剂量组

0.66±0.23*

0.189±0.018

0.220±0.015

0.031±0.016

199±61*

164.15±30.12*

中剂量组

0.69±0.20*

0.184±0.021

0.219±0.019

0.035±0.011

205±50*

173.34±29.16*

高剂量组

0.78±0.25*

0.188±0.019

0.225±0.022

0.037±0.018

224±46*

180.91±27.34*

注:“*”表示与空白对照组比较,P<0.05

2.3  小鼠单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性测定结果

与对照组比较,蚕蛹蛋白粉各剂量组小鼠单核-巨噬细胞碳廓清吞噬指数、巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数差异均无显著性(P>0.05)。与对照组比较,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组小鼠NK细胞活性增强,差异均有显著性(P<0.05),测定结果见表2。

2小鼠单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性测定结果(n=10x±s)

分组

单核-巨噬细胞功能

NK细胞活性/(%)

碳廓清指数

吞噬率/(%)

吞噬指数

空白对照组

5.88±0.75

19.2±4.2

0.80±0.21

23.28±5.21

低剂量组

5.97±0.84

22.3±6.7

0.91±0.19

33.15±6.13*

中剂量组

6.25±0.91

23.5±5.0

0.89±0.30

34.96±7.22*

高剂量组

6.83±1.04

24.0±7.1

0.97±0.24

35.71±6.94*

注:“*”表示与空白对照组比较,P<0.05

3讨论

本研究以蚕蛹蛋白粉为受试物,小鼠灌胃给予受试物30天后,可增强小鼠迟发型变态反应能力,提高小鼠溶血空斑数、半数溶血值,增强小鼠NK细胞活性,对小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、NK细胞活性具有显著增强作用,说明蚕蛹蛋白粉有助于增强免疫力。蚕蛹蛋白粉可作为保健食品原料开发应用。

参考文献:

[1]季晓娇,闫文杰,张婧婕,等.蚕蛹蛋白制备应用与功能特性的研究进展[J].食品与发酵工业,2019,45(18):277-283.                               

[2]胡建平,刘可桃.蚕蛹蛋白的提取工艺及综合利用研究进展[J].安徽农学通报(上半月刊),2011,17(11):185-186+223.                               

[3]施自伦,李朝品,刘群红.蚕蛹蛋白的现代研究概况[J].安徽农业科学,2009,37(07):3051-3052+3088.