红细胞浓度对固相法血型鉴定的影响评价

红细胞浓度对固相法血型鉴定的影响评价

施佳萍

泉州市丰泽区妇幼保健院福建泉州362000

【摘要】目的：分析红细胞浓度对固相法血型鉴定的影响。方法：选择我院2021年4月份到2022年4月份身体健康人10例O型Rh（D）阴性、10例AB型Rh（D）阳性，在抗凝管中加入适量静脉血，将AB型与O型血液配制为不同高低浓度红细胞悬液，采取固相法开展ABO血型正定型与Rh（D）血型鉴定，与此同时，以10%浓度红细胞浓度作为对照，探讨假阳性与假阴性出现状况，以及假性结果发生时红细胞抗原的浓度。结果：利用红细胞悬液为10%的浓度作为参照，高浓度组的红细胞抗原浓度超出26%出现了假阳性，低浓度组红细胞抗原浓度低于3%出现了假阴性，具体见表二。高浓度组当中，出现假阴性期间，抗A孔的表现更加显著，低浓度组当中，发生假阴性期间，抗B孔和抗D孔表现较抗A孔更加显著。结论：红细胞浓度，针对固相法ABO血型正定型，包括Rh（D）血型鉴定有一定影响，并且高低浓度对不同的单克隆抗体结合抗原能力影响也不同。

【关键词】固相法；红细胞浓度；血型鉴定

以往，针对血型判断，一般指的是人体的红细胞表层抗原发生了差异，目前已经得知，人体的血小板、白细胞，其表层抗原同样存在一定差异，血型属于抗原和抗体系统遗传的一项特征之一。在临床输血治疗疾病、人体器官的有效移植当中运用多。血型系统包括了两种系统，ABO与R h D血型体系，ABO血型正定型及R h D血型定型试剂盒，是常见鉴定方法的一种，不适合应用到血源筛查当中，此种方法，所需利用的设备较少，并且试剂盒携带起来非常便捷，污染水平较低，解决传统液相试剂易出现泼溅问题，在鉴定所在场地内部，各项操作更为便利，清洁度高。并且，此种方法开展鉴定，具体的操作过程简便，不用使用其他的设备和仪器，即使作为非专业人员，在比较短的时间内，仍然可以准确的判断出结果。固相载体，可直接进行条形码的粘贴处理，防止发生错误。基于此，本文观察红细胞浓度对固相法血型鉴定的影响，内容如下。

1资料和方法

1.1材料和器材

ABO血型正定型和Rh（D）血型定型试剂盒，EDTA真空抗凝管和静脉采血器材，普通的低速离心力，采用0.9%的生理盐水溶液，10mL的试管若干，滴管若干个。

1.2压积红细胞制备

选择我院2021年4月份到2022年4月份10例O型Rh（D）阴性、10例AB型Rh（D）阳性，静脉血采集后，放入抗凝管，按照不同的血型分别收集到试管（10mL），混匀处理，离心（5min）处理，除去血浆，加生理盐水（5mL），混匀、洗涤，离心，时间是5min，将上层清液去除。连续重复操作3-5次，最后一次洗涤之后，上清液需保持清亮，并且要完全丢弃，将其制作为O型与AB型压积红细胞。

1.3特定浓度红细胞浓度的制备

结合相关规定，将O型压积红细胞制备为10%、15%、20%、25%、30%高浓度红细胞悬液，然后将AB型压积红细胞制备为1%、2%、3%、4%、5%低浓度红细胞悬液，详细见表一。

表一  高、低浓度红细胞悬液制备参照表

1.4固相法血型鉴定

分别利用高、低浓度红细胞悬液开展固相法ABO血型正定型和Rh（D）血型鉴定，采用10%浓度红细胞作为对照，详细观察、记录下血型鉴定结果和假阳性，以及假阴性的出现概率，以及其所对应红细胞悬液浓度。

2结果

利用红细胞悬液为10%的浓度作为参照，高浓度组的红细胞抗原浓度超出26%出现了假阳性，低浓度组红细胞抗原浓度低于3%出现了假阴性，具体见表二。高浓度组当中，出现假阴性期间，抗A孔的表现更加显著，低浓度组当中，发生假阴性期间，抗B孔和抗D孔表现较抗A孔更加显著。

表二  高、低浓度红细胞悬液试验结果分析

3讨论

抗体异常和ABO亚型是引起血型不相符的主要原因之一，通过进行恰当的处理和规范化操作，可以正确鉴定出ABO血型，结合固相法ABO血型正定型与Rh（D）血型鉴定原理与试验结果进行判断。在此次研究之中，以我院2021年4月份到2022年4月份10例O型Rh（D）阴性、10例AB型Rh（D）阳性，将AB型与O型血液配制为不同高低浓度红细胞悬液，采取固相法开展ABO血型正定型与Rh（D）血型鉴定，与此同时，以10%浓度红细胞浓度作为对照，探讨假阳性与假阴性出现状况，以及假性结果发生时红细胞抗原的浓度。通过利用红细胞悬液为10%的浓度作为参照，高浓度组的红细胞抗原浓度超出26%出现了假阳性，低浓度组红细胞抗原浓度低于3%出现了假阴性，具体见表二。高浓度组当中，出现假阴性期间，抗A孔的表现更加显著，低浓度组当中，发生假阴性期间，抗B孔和抗D孔表现较抗A孔更加显著。分析其原因，主要包含以下几点：（1）因为抗原抗体反应有其最佳浓度，若抗体的浓度一定，抗原不足或者过量，通常会因为前代与后代现象而引起假性试验数据

[2]。（2）采用此方法，可能会对红细胞抗原产生稀释作用，让原来红色并不显著的红细胞悬液颜色变浅，对最终的结果产生一定影响[3]。（3）实验室内部环境不满足试验要求，或者没有按照标准要求操作。

运用以上方法，试剂的准备比较简单，最后获得数据结果容易观察，且各项结果保存起来更加容易、便捷，能够进行多次的判读处理，不用使用其他的试剂，也不用任何设备，一些非专业人员，在接受一定的培训之后，也能够马上操作，适宜应用在突发情况下鉴定工作当中。要鉴定期间，若具体的温度过低，红细胞会直接冻住了，此时，冲洗液无法将其彻底冲掉，会给最后的鉴定数据结果，带来较大的干扰和影响，故标本需保持室温条件下开展鉴定，要求样本在室温条件下，保持10min之后鉴定最佳。若处于低温的环境，血型实际反应时间比较长的，主要是由于抗原，以及抗体的反应，受实验室的温度影响非常大，故若观察的条件比较低，可以有效的延长实际的鉴定具体时间，确保鉴定精确。

结合以上分析可以得知，标准化操作，能够显著提升试验结果的准确性。采用固相法血型定型试剂能够获得准确结果，因为其具有可以常温保存、结果容易判读等一系列优势，能够更好满足突发事件下血液应急保障需求。与此同时，固相法血型鉴定操作流程简单[4]，结果精确，可信度比较高。血型鉴定结果受外界因素影响较大，正反定型结果相同，才能够定下最终结论。

【参考文献】

[1]刘婷婷,杨桂斌,张文娟等.2例多发性骨髓瘤影响ABO血型鉴定的处理[J].国际检验医学杂志,2019,40(23):2941-2942.

[2]赵芳.微柱凝胶法在血型鉴定及交叉配血中的应用[J].临床医药文献电子杂志,2019,6(73):147+150.

[3]黄婉怡.微柱凝胶免疫检测技术在临床血型鉴定与输血中的应用价值[J].中国医药科学,2019,9(03):85-87+95.

[4]王勤.PDCA在微柱凝胶血型鉴定中的应用[J].系统医学,2017,2(11):13-15+18.