高效液相色谱在药物检验中的分析应用

高效液相色谱在药物检验中的分析应用

张秋梅

广东肇庆星湖生物科技股份有限公司

摘要：药物检验是临床用药的重要环节，也是影响用药安全的一个因素。高效液相色谱法（HPLC）是色谱法的一个分支，在医药、化学、工业、农业、商检等领域应用广泛。本文主要对高效液相色谱在药物检验中的应用进行分析与探讨，以供同仁参考。

关键词：高效液相色谱；药物检验；应用分析

一、前言

近年来，随着医疗技术不断发展，新型药物不断研发，并且在临床得到广泛应用。临床用药中，药物检验是重要环节，直接关系用药安全。目前，我们常用的药物检验方法有高效液相色谱和超高效液相色谱。高效液相色谱无论是灵敏度还是分辨率、速度等均明显超出高效液相色谱（简称HPLC），而且对环境的适应能力也很强。HPLC在高速、高压环境下，也可以更有效地展开药物分析工作，并且还可以有效保障样品质量。

二、高效液相色谱（HPLC）简介

高效液相色谱（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）简称为HPLC，是一种结合液相色谱与气相色谱基础理论及技术的分离分析法。其主要是结合输液系统，将多种溶剂按不同比例进行混合，缓冲液以及流动相泵装入固定的色谱柱中。通过对应的分析处理后，再将其送入检测容器中进行试样试验，这种方式在我国现代化医学以及农业和商检、法检中较为常用。色谱法中，HPLC是重要一个分支。其中，液体是流动相重要成分，通过压力作用，将其挤压至固定相中。HPLC，具有“四高一广”特征，其中，四高是指“高速度”、“高压强”、“高效率”、“高灵敏度”，一广是指“应用范围广”。HPLC处理药品时，操作简单，组分回收容易。这种技术的应用原理是“柱外效应”，特点在于可以反复利用，不会破坏样品，不过这种处理方式存在一定缺陷，在进样以及检测器处理时候，会让整个流动的流动相有所变化，分离的物质扩散以及滞留都会影响色谱峰的加宽。

三、高效液相色谱的主要类型

（1）吸附色谱。所谓的吸附色谱，就是一种可以根据不同物质之间的吸附量的差别，来进行相应的分析，因此，在采用吸附色谱的方法时，要考虑到材料的状态。吸附就是一个流动相与固定相之间的相互吸引。同时吸附方法也有不同，可以分为三种：物理吸附、半化学吸附、化学吸附。

（2）分配色谱。分配色谱系色谱法是因为被分离成分的溶解程度不同，所以，在固定相和流动相中，会有不同的成分，从而进行了分离。通常，以液体为溶剂的固定相居多。若采用分选色谱法进行分离分析，则可使被分离的组分在固定相与流动相中的溶解达到平衡。

（3）离子色谱。采用离子色谱可以很好地分离出阴阳离子。离子色谱法的原理是离子交换，为了确保离子交换能够顺利实现，必须要知道离子的特性，然后选择最适合的方法来进行离子交换。主要有高效离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱三种，这三种方法使用的材料以及材料的功能存在一定的差异。

（4）分子排阻色谱法。分子排阻色谱法是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经修饰凝胶如葡聚糖凝胶（Sephadex）和聚丙烯酰胺凝胶（Sepharose）等为填充剂，这些填充剂表面分布着不同尺寸的孔径，药物分子进入色谱柱后，它们中的不同组分按其分子大小进入相应的孔径内，大于所有孔径的分子不能进入填充剂颗粒内部，在色谱过程中不被保留，最早被流动相洗脱至柱外，表现为保留时间较短；小于所有孔径的分子能自由进入填充剂表面的所有孔径，在色谱柱中滞留时间较长，表现为保留时间较长；其余分子则按分子大小依次被洗脱。

四、超高液相色谱在药物数据分析中的应用

（1）化学药分析中应用。在化学药品的分析中，由于成分含量低，检测较困难，像止痛药、抗生素药物、抗病毒药物等在生产存放过程中会发生质变，产生其他物质及其杂质，物质含量的高低会直接影响到药物的疗效。因而只有通过检测技术的应用检测药物成分中其他物质的含量，进而判断出产生杂质的条件，控制药物生产存放环境，调整环境使药物存放能够达到相应的条件。高效液相色谱则很好的解决了这个问题；从实际的分析需要来看，浓度越低，分离越困难，应用时间也就越长。按照 HPLC的工作模式，应逐渐提高总的分离速率，减少检测的有效时间。根据技术评价的要求，对其敏感性进行了适当的调整。按配制方法进行操作。经过测试，对真实的线性关系进行分析，对监控的精度进行优化，获得与真实的理论评价需求相一致的数据规范信息，从而对药物的真实质量检测水平进行评价，获得与真实的参考相一致的基本思路。

（2）中药分析中应用。1）中药材成分测定。《中国药典》中收录的中药材和饮片有500多种，300多种采用现代技术测定含量，约70%采用的是HPLC法，典型代表如人参、白芍、大黄、天麻、丹参、甘草、五味子、牛蒡子等，检测既快速又准确。2）中成药质量分析。中成药是采用现代生产工艺，对中药材萃取、提纯、压制后制成的。《中国药典》中收录的中成药制剂有600多种，400多种采用现代技术测定含量，约95%采用的是HPLC法，中成药的成分含量数据透明，质量更加稳定可靠。

（3）高效液相色谱在鉴别上的研究。根据高效液相色谱的实际操作流程，结合药物的识别方法，对试剂的评价进行标准化。高效液相色谱条件与实际操作方法相符，提供精确的控制对比，保证了色谱柱在色谱中的保留时间。在高效液相色谱的分析中，保留时间与化合物的性质有直接的联系，是一种定性的参数分析方法。如地西半注射液分析、曲安奈德注射液分析等方法均能较好地对高效液相色谱进行鉴定。在进行有关药物的检测和分析时，必须对色谱法进行相应的调整。可进行薄层色谱，高效相位色谱，气相色谱，紫外光度法，容量分析法。通过对样品进行快速的高效液相色谱分离，以达到快速分离的目的，优化了优化的测试精度，保证了实际测量的准确性。高效液相色谱在药物分析中更具专业性、操作方便、使用范围广，与临床上的药物分析和定量研究的优点是一致的。由于中药制剂的操作比较繁琐，因此要按照实际的计量要求不断提高。在高效液相色谱的分析中，应结合简化的实际需要，进行快速、可靠、准确的评价，以保证检测的质量和方法的合理、准确和有效。

五、结语

总之，随着我国整体技术水平的提高，人们对药物的重视程度越来越高，传统的药物检测方法越来越重视，高效液相色谱是一种快速分析、取样和分离的方法，具有四高、一广、环保的特点。高效液相色谱环境下的药物检测和分析，以不断优化产品的综合利用价值，以达到药品实际监督评价的技术规范，提高药品生产和药品检验的技术水平，保证实际提供信息和数据的精准有效性。

参考文献：

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