糖肾康饮联合厄贝沙坦片对糖尿病肾病的影响

糖肾康饮联合厄贝沙坦片对糖尿病肾病的影响

杨超1，李卓1，杨晓蕾2，赵禹喆1，李晓路1，王烁1，赵晓燕1，张宜默1*

  1齐齐哈尔市中医医院 黑龙江 齐齐哈尔 161005

2 齐齐哈尔医学院 黑龙江 齐齐哈尔 161006

【摘要】目的：本研究通过自拟中药糖肾康饮联合西药厄贝沙坦片联合治疗早期糖尿病肾病，进一步证实中西医结合疗法对糖尿病肾病的疗效及安全性。方法：研究纳入60例患者均为2021年至2022年间在齐齐哈尔市中医医院内分泌科的糖尿病患者，符合早期糖尿病肾病及气阴两虚兼瘀证诊断标准，其中对照组接受基础治疗联合厄贝沙坦片，治疗组在对照组基础上加用糖肾康饮，检测中患者疗效及生理生化指标。同时，建立糖尿病肾病模型大鼠，检测各组尿蛋白及肾脏组织中TNF-α、TGF-β1、IGF-1及CRP水平。结果：与对照组相比，治疗组患者的疗效观察指标以及各生化指标检测（尿微量白蛋白（mAlb）、尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿胱抑素C（尿Cys C）均有所改善。动物试验中发现，糖肾康饮联合厄贝沙坦对于mAlb、TNF-α、TGF-β1及IGF-1等指标的改善作用优于单独使用厄贝沙坦。结论：糖肾康饮联合厄贝沙坦片治疗可以有效治疗早期糖尿病肾病。

【关键词】糖尿病肾病；糖肾康饮：转化生长因子-β1

Effect of Tangshenkang Formula combined with Isbesartan on diabetic nephropathy

Chao Yang1, Zhuo Li1, Xiaolei Yang2, Yuzhe Zhao1, Xiaolu Li1, Shuo Wang1, Xiaoyan Zhao1, Yimo Zhang1*

1 Qiqihar Hospital of Traditional Chinese Medicine, Qiqihar 161005

2 Qiqihar Medical University, Qiqihar 161006

Objective: In this study, we further confirmed the efficacy and safety of integrated Chinese and western medicine on diabetic nephropathy by combining Tangshenkang drink and western medicine irbesartan tablets for early diabetic nephropathy. Methods: 60 diabetic patients were included from the Department of Endocrinology of Qiqihar Traditional Chinese Hospital from 2021 to 2022, who met the diagnosis criteria of early diabetic nephropathy, qi and Yin deficiency and blood stasis. The control group received basic treatment combined with irbesartan tablets, and the treatment group added Tangshenkang drink [1]on the basis of the control group. Patients’ efficacy and physiological and biochemical indicators were tested. Model rats of diabetic nephropathy were established and tested the levels of TNF- α, TGF- β1, IFG-1 and CRP in the urinary protein and kidney tissues of each group.Results: Compared with the control group, the efficacy observation and the biochemical indexes (mAlb, RBP and urinary Cys C) were all improved in the treatment group．In animal trials, it was found that combining Tangshenkang drink and irbesartan improved better for mAlb, TNF-α, TGF-β1 and IGF-1

than irbesartan alone. Conclusion: Tangshenkang drink and irbesartan can effectively treat early diabetic nephropathy.

Keywords:Diabetic nephropathy; Tangshenkang Drink;TGF- β1

糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)表现为体内胰岛素绝对或相对不足，并伴有糖、蛋白质和脂肪代谢障碍，是以慢性高血糖为主要表现的一种全身性疾病，据统计约 20%-40%的糖尿病患者最终发展为糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy, DN），且进入尿毒症期需要透析治疗的病程较慢性肾小球肾炎更短，是糖尿病致死致残的重要原因。一项meta分析研究发现，中国糖尿病肾病的患病率高达21.8%，严重影响了糖尿病患者的生存质量[1]，因此如何有效地防治糖尿病肾病已成为相关领域学者重要的研究方向。目前治疗糖尿病肾病除了生活方式调整外普遍使用ACEI、ARB、他汀类药物干预，但是患者的许多临床症状和尿微量蛋白持续升高无法通过这些治疗有效改善，将西医诊断与中医辨证结合，运用中医药治疗或联合西药治疗，不但能有效改善临床症状，还可以提高治疗效果，早期干预延缓病情进展，减轻患者痛苦，对于降低不良反应控制病情等发挥诸多优势[2,3]。

糖肾康饮由黑龙江中医药大学马建教授结合多年临床经验，以益气养阴、活血化瘀为治疗原则所研发的，并在临床应用中获得了较好的治疗效果[4,5]。基于以上，本研究结合临床试验及动物模型，探究糖肾康饮联合厄贝沙坦对糖尿病肾病的治疗效果。

2.资料与方法

2.1 研究对象

研究所选60例患者均为2021年至2022年间齐齐哈尔市中医医院内分泌科的糖尿病患者，符合早期糖尿病肾病及气阴两虚兼瘀证诊断标准。本研究共纳入60例患者，其中治疗组中共纳入30例患者，研究中1人脱落，完成29例；对照组30例患者，完成28例患者，脱落2例。对照组接受基础治疗联合厄贝沙坦片（江苏恒瑞医药股份有限公司，国药准字H20000513，0.15g），治疗组在对照组基础上加用糖肾康饮(由黄芪50g、黄精20g、茯苓20g、山药30g、生地黄20g、苍术20g、水蛭15g、川芎20g、乌梅30g组成)。

SPF级Wistar雄性大鼠30只，8周龄，体重180-200g，其中DN组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦+糖肾康饮组各10只，室内通风及光线良好，温度控制在22-25°C，相对湿度在55%-70%之间，实验期间保证大鼠自由饮水和摄食。

2.2 方法

2.2.1临床观察实验

两组患者接受基础治疗联合厄贝沙坦片0.15g/d晨起口服，治疗组患者口服糖肾康饮（中药由医院制剂室统一煎制）200ml/d早晚分服，所有患者均在治疗前一天及疗程结束后一天分别进行各生化指标检测。主要指标：mAlb、RBP、尿Cys C；次要指标：空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1C）；中医证候疗效：中医临床症状、体征变化情况，证候积分；中医症状疗效：观察主症、兼次症、舌脉象变化，采用积分方法，实验前后各评价一次；安全性指标观察肝肾功能（ALT、AST、Scr、BUN），心电图，血、尿及便常规等。

2.2.2 动物模型建立及实验方法

糖尿病肾病大鼠造模：给予高糖、高脂饲料喂养6周，所有动物禁食12h，第二天糖尿病造模组大鼠一次性空腹腹腔注射50mg/kg链脲佐菌素(STZ)造模(实验时STZ溶于0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中，PH4.5，配制成1%的溶液)。腹腔注射STZ后，大鼠饮用葡萄糖水，以减少早期死亡。造模后72小时，尾静脉采血测血糖，血糖≥16.7mmol/L视为糖尿病造模成功。

厄贝沙坦组每天给予糖尿病肾病大鼠厄贝沙坦(50mg/kg/d)灌胃，厄贝沙坦+糖肾康饮组在厄贝沙坦干的基础上加入糖肾康饮（9.84g/kg/d），DN组以等量生理盐水灌胃。给药8周后，大鼠放入代谢笼，留取24小时尿液，大鼠麻醉后心包采血并剥离肾脏组织，-80℃保存。

各组大鼠24h尿蛋白采用全自动生化分析仪、肾脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1（TGF-β1）、C反应蛋白(CRP)及胰岛素样生长因子（IGF-1）等指标检测采用武汉华美ELISA试剂盒完成，具体操作严格按照说明书完成。

2.3 评价标准

2.3.1糖尿病肾病的疗效判定标准

显效：治疗后mAlb、RBP、尿Cys C下降50%或以上或恢复正常，血糖、糖化血红蛋白下降，肝肾功能正常；有效：治疗后mAlb、RBP、尿Cys C、血糖、糖化血红蛋白等指标有所下降，但不明显，肝肾功能正常；无效：治疗后实验室指标无变化或升高。

2.3.2 中医证候疗效判定标准

临床痊愈：中医临床症状、体征消失或基本消失，证候积分减少

≥95%；显效：中医临床症状、体征明显改善，证候积分减少≥70％；有效：中医临床症状、体征均有好转，证候积分减少≥30%；无效：中医临床症状、体征无明显改善，甚或加重，证候积分减少不足30%。计算公式：[（治疗前证候总积分－治疗后证候总积分）÷治疗前证候总积分]×100％。

2.4 统计学方法

采用SPSS19.0统计软件进行统计分析处理，计数资料采用卡方检验；计量资料采用t检验及单因素方差分析，其结果以均数±标准差（±S）表示，P <0.05为差异具有统计学意义。

3. 结果

3.1 治疗组与对照组患者的一般状况

本研究对照组纳入30人，其中男性16人，女性14人，平均年龄为：（45.1=±8.2）岁。治疗组纳入30人，男性15人，女性15人，平均年龄为（49.5=±7.3）岁。通过卡方检验，发现两组间的性别组成差异没有统计学意义（p>0.05），此外通过两独立样本t检验未发现两组间的年龄存在统计学差异（p>0.05）。

3.2 治疗组及对照组治疗前后中医证候情况

治疗组患者在治疗前后中医证候得分具有统计学差异（t=16.13, p<0.001），中医体征有所改善。对照组患者在治疗前后中医证候得分无统计学差异（t=1.158, p >0.252），中医体征未见改善。

表1  治疗组治疗前后中医证候总分比较（±S）

通过比较对照组及治疗组患者用药后的疗效发现，治疗组的中医证候症状均有明显的改善，并且两组疗效的差异具有统计学意义(p<0.01)（见表2）。

表2 治疗后两组患者中医治疗有效率情况

3.3 治疗组与对照组患者治疗前后生化指标的情况

治疗组患者在经过治疗后，FPG、RBP、尿Cys C及mAlb的水平均有改善（p<0.01)。对照组患者仅mAlb水平在治疗前后差异存在统计学意义（p=0.04）（见表3）。治疗后，对照组及治疗组中RBP、尿Cys C及mAlb水平差异有统计意义（p<0.01）

表3两组治疗前后生化指标比较（±S）

注：Pa表示治疗后治疗组与对照组生化指标的比较

通过卡方检验发现，治疗12周后，糖肾康饮治疗组的总体疗效优于对照组，两组有效率差异有统计学意义（见表4）。

表4 治疗组与对照组西医疗效比较

3.4安全性评价及不良反应

为了解患者使用糖肾康饮后是否产生不良反应，本研究检测了治疗组患者的ALT、AST、CREA及BUN等安全性指标的水平，并比较了以上指标在治疗前后的差异，结果发现所有的安全性指标在治疗前后差异并不存在统计学意义（p>0.05）(见表5)。与此同时，比较了治疗组及对照组用药前后便常规、血常规、尿常规及心电图的变化情况，结果发现治疗组与对照组的患者治疗前后血、尿、便常规及心电图无明显改变。

表5  治疗组治疗前后安全性指标比较（±S）

3.5 厄贝沙坦联合糖肾康饮对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

通过单因素方差分析发现 ，三组大鼠的体重差异有统计学意义，与DN组相比，厄贝沙坦组及糖肾康饮组大鼠的体重均有降低（p<0.01）, 且糖肾康饮组体重水平低于厄尔沙坦组（

p<0.01）；三组大鼠的尿蛋白水平差异具有统计学意义，与DN组相比，厄贝沙坦组及糖肾康饮组大鼠的尿蛋白水平均有降低（p<0.01）, 且糖肾康饮组尿蛋白水平低于厄尔沙坦组（p<0.01）；与DN组相比，厄贝沙坦组及糖肾康饮组大鼠的TNF-α水平均有降低（p<0.01）, 且糖肾康饮组TNF-α水平低于厄尔沙坦组（p<0.01）；此外，厄贝沙坦组及糖肾康饮组大鼠的TGF-β1及IGF-1水平均有降低（p<0.01）, 且糖肾康饮组与厄尔沙坦组比较差异有统计学意义（p<0.01）。同样与DN组相比，厄贝沙坦及糖肾康饮对CRP的水平均有影响，但其两组之间并无统计学差异。

表6各组大鼠尿蛋白、TNF-α、TGF-β、IGF-1及CRP水平比较（±S）

注：*与DN组比较，p<0.01；#与厄贝沙坦组比较，p<0.05

4.讨论

古代中医重视“预防医学”，也就是“未病防病、已病防变”，糖尿病肾病如果早期得到积极治疗，疾病进展就可得到有效控制。目前许多临床研究表明传统中医药单用或协同西药治疗糖尿病肾病有显著的优势和疗效，能够有效延缓糖尿病肾病的进展。基于以上，本研究应用糖肾康饮联合厄贝沙坦进行临床观察实验发现，治疗后中医症候情况、疗效观察指标以及FPG、UAE、mAlb、RBP、尿Cys C水平均有所改善，且未对肾脏及其他组织器官造成损害。郑小平研究发现，糖肾康饮可有效改善患者中医症候症状，并能减低患者血液中TNF-α水平延缓DN的进展[6]。这与本研究的结果基本一致，而本研究联合了厄贝沙坦对于DN的控制作用更为明显。此外，本研究的动物实验结果表明，糖肾康饮联合厄贝沙坦对于mAlb、TNF-α、TGF-β1及IGF-1等指标的改善作用优于单独使用厄贝沙坦，这为中西结合治疗糖尿病肾病提供了新的证据。

方永林教授在临床治疗病人时将糖尿病肾病通过辨证分为肺胃气阴两虚证、脾肾虚衰证、阴阳两虚，浊毒弥漫证，治法分别以补益肺胃气阴、健脾益肾利水祛湿、阴阳双补通腑泄浊为根本选方；临床表现兼湿热者，治以清利湿热，配伍滑石、芩连、泽泻、藿香、竹茹、泽兰等；兼有血瘀证表现者，治以活血化瘀，药选桃仁、红花、当归、川芎、赤芍等[6]。本研究以古今中医理论为基础，结合临床自拟方剂糖肾康饮，以健脾益气、养阴生津、活血化瘀的方法治疗气阴两虚兼瘀型糖尿病肾病。糖肾康饮方中药物除中药配伍可起到治疗作用外，许多药物有效成分也被药理证明其治疗作用。血管紧张素受体阻滞剂厄贝沙坦为DN患者的首选药物，通过阻断RAAS系统，扩张肾血管、松弛球内系膜细胞、改善肾小球基底膜滤过性，从而减轻肾小球高灌注和高滤过状态，进而降低2型糖尿病患者的尿白蛋白排泄率、微量白蛋白尿[7,8]。为明确糖肾康饮对肾脏是否存在损害作用，本研究进一步检测了治疗组患者治疗前后ALT、AST、CREA及BUN等安全性指标的水平，并未发现其对肾脏造成损害作用，此外血、尿、便常规及心电图也无无明显改变，综上揭示了糖肾康饮在糖尿病肾病早期治疗的安全性。

为进一步了解糖肾康饮联合厄贝沙坦的疗效，本研究检测了糖尿病肾病模型大鼠治疗后肾脏组织中TNF-α、TGF-β1、IGF-1及CRP的表达水平。TGF-β1是胶原大家族中与组织纤维化关系最密切的细胞因子，参与肾小球硬化和肾小管间质纤维化过程，可促使肾脏细胞肥大、增加系膜细胞外基质的产生，并通过抑制基质降解酶合成而减少细胞外基质的降解[9]。徐园园等[10]研究发现厄贝沙坦联合骨化三醇可减低糖尿病肾病大鼠肾脏组织中TGF-β1的表达水平，这与本研究的结果相一致。IGF-1作为一种活性蛋白多肽物质，是人体内肾细胞及脾细胞等十几种细胞自分泌和旁分泌的产物，目前已有大量人群及动物实验表明，在DN早期IGF-1的水平显著提高，诱发肾脏肥大、肾小球高滤过、肾小球硬化等问题

[11,12]，本研究发现糖肾康饮联合厄贝沙坦恰好能降低DN大鼠肾脏组织中IGF-1的水平。

    综上所述，糖肾康饮联合厄贝沙坦治疗早期糖尿病肾病患者可显著改善患者中医症状并减低FPG、RBP、尿Cys C及mAlb的表达水平的同时未对肾脏造成损害；在动物模型干预治疗后，可降低其肾脏组织中mAlb、TNF-α、TGF-β1、IGF-1及CRP等指标的水平，表明糖肾康饮联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病的原理可能与降低炎症反应存在关联。

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合同编号：GSFGG-2022212

【基金项目】齐齐哈尔市科技计划创新激励项目（CSFGG－2022212）

【作者简介】杨超（1985-10-14），女，黑龙江省齐齐哈尔市人，副主任医师，硕士，研究方向：中西医结合治疗内分泌疾病。

【通讯作者】张宜默，45386343@qq.com