T淋巴细胞亚群、EBV-DNA检测在儿童传染性单核细胞增多症的应用

T淋巴细胞亚群、EBV-DNA检测在儿童传染性单核细胞增多症的应用

汤璘珊  ,唐静

镇江市第一人民医院，江苏镇江  212000

【摘要】目的：深入分析与研究T淋巴细胞亚群、EBV-DNA检测在儿童传染性单核细胞增多症当中的实际应用与效果。方法：案例选取我院2018年1月-2022年12月期间诊断为传染性单核细胞增多症的患儿100例作为实验组，同期选择100例在医院进行健康体检的健康儿童设定为对照组。对比分析两组患儿的T淋巴细胞亚群以及EBV-DNA表达情况。结果：与对照组相比，实验组儿童的CD4+和CD4+/CD8+的水平较低，而EBV-DNA阳性表达率和CD8+的水平较高(P均<0.05)。结论：传染性单核细胞增多症的临床诊疗过程中，患儿的T淋巴细胞亚群、EBV-DNA明显升高，通过将其作为临床诊断指标，确实有利于实现对该疾病的早期筛查和诊断，具有重要的临床推广意义和实际参考价值。

【关键词】T淋巴细胞亚群、EBV-DNA；儿童；传染性单核细胞增多症；应用

[Abstract] OBJECTIVE: To analyze and study the practical application and effect of T lymphocyte subpopulation and EBV-DNA testing in children with infectious mononucleosis in depth. METHODS: One hundred children diagnosed with infectious mononucleosis in our hospital from January 2018 to December 2022 were selected as the experimental group, and 100 healthy children who underwent health checkups in the hospital were selected as the control group during the same period. The T-lymphocyte subpopulations and EBV-DNA expression of the children in the two groups were compared and analyzed. RESULTS: Compared with the control group, children in the experimental group had lower levels of CD4+ and CD4+/CD8+, while EBV-DNA positive expression and CD8+ levels were higher (both P < 0.05). CONCLUSION: The T-lymphocyte subpopulation and EBV-DNA in children with infectious mononucleosis are significantly elevated during the clinical treatment of the disease, and by using them as clinical diagnostic indicators, it is indeed beneficial to achieve early screening and diagnosis of the disease, with important clinical promotion significance and practical reference value.

[Key words] T-lymphocyte subpopulation, EBV-DNA; children; infectious mononucleosis; application

传染性单核细胞增多症是由EB病毒急性感染引起的以单个核的淋巴细胞增生为主的感染病[1]。从临床常见的症状来看，临床表现多为发热、咽喉痛、淋巴结和肝脾肿大等症状[2]。传染性单核细胞增多症具有一定的自限性，所以其在后期如果能够得到妥善的治疗与干预，确实可以取得比较良好的效果。但是大量的临床经验也表明，这类疾病临床表现和实验室检查结果都具有多样性，为此误诊或者漏诊也比较普遍。T淋巴细胞亚群、EBV-DNA作为传染性单核细胞增多症的主要临床判定指标，具有一定的疾病诊断意义，但是在其他一些疾病当中，也有可能会呈现出相关指标增高的状况，比如肝炎病毒、风疹病毒等具有严重传染性的疾病，都会存在异型淋巴细胞增高的情况，所以这就会为后期的临床诊断带来较多的困扰。本研究通过针对实验组以及对照组均采用相应的临床检验方式，分析其在传染性单核细胞增多症中的早期诊断的价值，报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院2018年1月-2022年12月期间接诊的100例传染性单核细胞增多症患儿设为实验组，其中：男性患儿56例，女性患儿44例。患儿最大年龄13岁，最小年龄1岁，平均年龄5.59岁。另选择100例同期我院进行健康体检的健康儿童设为对照组，其中：男性患儿62例，女性患儿38例。患儿最大年龄9岁，最小年龄2岁，平均年龄4.28岁。对比上述两组儿童的年龄以及性别，均不存在明显差异 (p>0.05)。

1.2方法

T淋巴细胞亚群检测：进行1ml静脉血采集,用 EDTA试剂抗凝，将1 ml的抗凝血标本滴在载玻片的一端，用适当角度推动载玻片，使其形成一层血膜，厚度适中，头尾分明，长度约3-5 cm。将所制得的血涂片置于染色架上，加瑞氏染液覆盖血膜，放置30秒；将磷酸缓冲液按1:1.2的配比进行滴加，染色时间为10-15分钟；流水冲洗染液，血涂片在自然干燥后，再对其进行显微镜检测，对其血细胞形态进行观测并对其进行计数。

EBV-DNA检测：采用上海宏石SLAN-96S/48P荧光定量PCR仪进行EBV-DNA测定，检测方法为PCR-荧光探针法，试剂采用EB病毒核酸定量检测试剂盒，生产厂家为圣湘生物科技股份有限公司，EBV-DNA若大于103 Copies/ml则设定为阳性，反之则为阴性,阳性者提示存在EB病毒感染。

1.3观察指标

观察两组患儿的血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及EBV-DNA表达情况。

1.4统计学意义

运用统计学软件（spss23.0）处理实验组与对照组的计量数据、计数资料，分别以均值±标准差（±s）与百分比形式表示，检验方式则为t值和，若统计学计算结果为P＜0.05，则组间差异有统计学意义。

2结果

与对照组相比，实验组儿童的CD4+和CD4+/CD8+的水平较低，而EBV-DNA阳性表达率和CD8+的水平较高，数据对比有统计学意义（P＜0.05）。如下面表1所示。

表1  两组T淋巴细胞亚群及EBV-DNA表达情况[±s，n/%]

3讨论

传染性单核细胞增多症多为自限过程，预后良好，主要为对症治疗，但是重症患者可有严重的咽喉病变和水肿，还可能存在神经系统并发症及心肌炎,年龄越大，循环系统并发症、肝功能异常发生率越高[8]，危害患者身体健康及发育，所以早期准确诊断并干预尤为重要。但是传染性单核细胞增多症在临床表现上具有一定的复杂性，并且依据病情的差异往往也存在着轻重程度的差别，所以从临床诊断来看经常存在漏诊或者误诊的情况。

从其发病的原理来看，现阶段对其具体原因并没有完全明确，大体上可以理解为病毒进入到患者口腔之后，先在患者的咽部淋巴组内实现了复制，之后其不断渗出，导致扁桃体发炎。局部的淋巴管受累也会造成淋巴结肿大的情况，从而侵入到了患者的血液循环系统当中，出现了病毒血症，甚至还会侵袭到淋巴系统的各个组织与脏器。其在发病的过程中常呈现出下面几类病症：第一，发热：除了极少数的轻型疾病患者之外，大多数患者都会存在不同程度地发热症状，多在38.5度以上。第二，淋巴结肿大：大量的临床研究结果表明，有将近70%甚至更多的患者出现淋巴结肿大的情况，并且以颈部淋巴结最为显著。第三，咽峡炎：有近50%的患者存在咽部以及扁桃体炎症的情况，其主要表现为充血肿胀，患儿会存在明显的咽喉疼痛或者吞咽困难。第四，肝脾肿大：有10%左右的患者存在肝脏肿大的情况，肝功能异常的患者则可能达到60%-70%左右，还有一些患者存在脾大的状况，按压可能会存在疼痛感且偶尔会发生脾破裂的状况。第五，皮疹：比如斑丘疹、荨麻疹等多种常见的类型，还有一些患者会存在偶发性出血的状况，大多存在于患者的躯干部位。第六，其他及其并发症：除了上述比较具有代表性的临床症状之外，患者也有可能会出现其他方面的症状，比如神经方面的问题：无菌性脑膜炎、脑干脑炎、周围神经炎等，也有一些患者还会合并心肌炎、心包炎等，对其生命安全也会造成一定的威胁。

早期研究显示，传染性单核细胞增多症主要存在于儿童及少年，经EB病毒感染后可成为长期的病毒携带者，可累及淋巴系统的各组织和脏器。有研究[9]表明，传染性单核细胞增多症起病过程中存有细胞免疫表达异常的情况。发病机制为：机体感染EBV后，病毒在细胞内复制，并在细胞分解之后，被释放到血液中， 使B淋巴细胞再次被感染，进而诱导T淋巴细胞产生了大量细胞因子，B淋巴细胞活化后能够刺激CD8

+细胞发生增殖活化，达到一定程度，B淋巴细胞能够与CD8+细胞结合，最终发生凋亡，从而使淋巴细胞的增殖表现为自限性改变。由此推测，CD8+细胞在 EBV感染中发挥了关键作用，同时，CD4+细胞又可以促进B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖分化，从而消灭EBV。EBV感染病程中，细胞免疫发挥着关键性的作用，CD4+/CD8+是反映机体免疫情况的重要指标，其下降水平和免疫功能的损害程度有关。

T淋巴细胞亚群、EBV-DNA在针对传染性单核细胞增多症的临床诊断与检测过程中确实具有一定的指导意义，并且多年来，临床上也利用这些指标作为重要的诊断标准。一般看来，检测阳性的儿童，淋巴细胞总数等相关检测结果均会明显高于正常人群，这主要是因为儿童感染EB病毒之后，机体内的淋巴细胞会出现过度增殖的情况。当然，细菌感染或者是正常人群偶尔的感染也会导致这些数值的增加，但是异型淋巴细胞比例相对较低且不会超过10%。在临床上容易出现漏诊或者误诊，可能和其他几个方面的因素存在密切关系：第一患者处于发病早期阶段，为此相关指标的升高不够明显。第二患者感染EB病毒的数量并不多。第三，传染性单核细胞增多症患者在早期阶段没有得到及时明确的临床诊断，同时相关指标升高之后呈现出了逐步下降的趋势。为此，怀疑是传染性单核细胞增多者的患者往往需要定期进行血常规的复查，同时需要结合细胞形态学的相关检测标准对其进行明确。本研究的结果表明，与对照组相比，实验组儿童的CD4+和CD4+/CD8+的水平较低，而EBV-DNA阳性表达率和CD8+的水平较高，数据对比有统计学意义（P＜0.05），说明进行T淋巴细胞亚群、EBV-DNA检测可作为评判传染性单核细胞增多症的重要指标。

综上所述，在传染性单核细胞增多症的临床诊疗过程中，T淋巴细胞亚群、EBV-DNA检测将其作为临床诊断指标，有利于实现对儿童传染性单核细胞增多症的诊断与治疗，具有重要的临床推广意义和实际参考价值。

参考文献：

[1]林珊,郭三平,江心怡,莫红梅.异型淋巴细胞、EB病毒及TLR7联合检测在儿童传染性单核细胞增多症中的诊断价值[J].检验医学与临床,2023,20(01):32-35+40.

[2]张云,李寿军,周星,卜晓敏.血清LDH、ADA及EBV-DNA对儿童传染性单核细胞增多症的诊断价值分析[J].医学理论与实践,2022,35(24):4262-4264.

[3]赵扬扬,陈欢欢,李娟.T淋巴细胞亚群、EBV-DNA检测在儿童传染性单核细胞增多症诊治中的价值[J].保健医学研究与实践,2022,19(10):98-101+110.

[4]钟志辉,蒙国煌,张岳汉,龙则平.EB病毒抗体联合EBV-DNA载量检测诊断儿童传染性单核细胞增多症的临床价值[J].检验医学与临床,2022,19(18):2562-2565.

[5]宋亚娣,颜维孝．儿童传染性单核细胞增多症并发症特征[J].中外医学研究,2022,20(06):118-121

[6]章婷婷,金速速,等．EB病毒DNA载量在传染性单核细胞增多症中的应用价值[J].温州医科大学学报,2022,52(01):57-60

[7]李巧．传染性单核细胞增多症发病机制研究[J].中国疗养医学.2022,31(02):154-156

[8]李明月,王燕,岳敬卫.丙种球蛋白联合病毒唑治疗儿童传染性单核细胞增多症疗效及对TLR2TLR9和T淋巴细胞亚群的影响[J].河北医学,2022,28(06):1032-1036.

[9]梁少霞.外周血异型淋巴细胞比值联合EBV-DNA载量在小儿传染性单核细胞增多症诊断中的应用研究[J].系统医学,2022,7(10):142-144+155.