lncRNA BLACAT1通过靶基因调控膀胱癌细胞发生发展的机制研究

(整期优先)网络出版时间:2023-03-15
/ 1
摘要目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(lncRNA BLACAT1)通过靶基因调控膀胱癌细胞发生发展的机制。方法采用qRT-PCR法检测正常膀胱细胞SV-HUC-1及膀胱癌细胞SW780中BLACAT1的表达水平;转染siRNA-NC、siRNA-BLACAT1至SW780细胞,设为siRNA-NC、siRNA-BLACAT1组,保留细胞不转染任何质粒设为空白对照组(NC组)。采用CCK-8法检测SW780细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测SW780细胞的凋亡情况,采用双荧光素酶报告基因和qRT-PCR验证lncRNA BLACAT1的靶向基因,采用免疫印迹法检测BAMBI蛋白的表达量。结果LncRNA BLACAT1在膀胱癌细胞SW780中的表达水平显著高于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA-BLACAT1组中lncRNA BLACAT1 mRNA水平均低于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05),而siRNA-NC组中lncRNA BLACAT1 mRNA水平低于NC组(P<0.05);三组SW780细胞的24 h的吸光度(OD)值比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),而三组SW780细胞在48、72 h的OD值比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且siRNA-BLACAT1组在48、72 h时的OD值均低于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05),而siRNA-NC组在48、72 h时的OD值均低于NC组(均P<0.05);siRNA-BLACAT1组中的细胞凋亡率均高于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05);siRNA-NC组的细胞凋亡率高于NC组(P<0.05);lncRNA BLACAT1与BAMBI存在靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验结果显示,与BLACAT1+NC组相比,BLACAT1+BAMBI组的荧光活性明显增加(P<0.05),siRNA-BLACAT1组的BAMBI蛋白水平、BAMBI mRNA的相对表达量低于siRNA-NC组、NC组(均P<0.05),而siRNA-NC组的BAMBI蛋白水平、BAMBI mRNA的相对表达量低于NC组(P<0.05)。结论lncRNA BLACAT1可调控膀胱癌细胞增殖及促进细胞凋亡,其机制与靶向BAMBI有关。