(滨州医学院 山东 滨州 256603)
[摘要]目的 探讨某品牌蛋白质粉对小鼠的免疫调节作用。方法 依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)增强免疫力功能检验方法,将某品牌蛋白质粉按0.25、0.5、1.5g/(kg·BW)3个剂量灌胃给予实验小鼠,同时设阴性对照组,每天灌胃1次,连续灌胃30d后,进行各项免疫指标的测定。结果 小鼠足跖肿胀度增加明显,在中、高剂量组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。血清溶血素水平检测中,受试物中、高剂量组的溶血素水平高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清指数,受试物各剂量组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。ConA诱导的淋巴细胞转化能力、抗体生成细胞数、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率及吞噬指数、NK细胞活性试验中,各剂量组与阴性对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论某品牌蛋白质粉具有增强免疫力的功能。
[关键词]某品牌蛋白质粉;小鼠;免疫调节
蛋白质是人体的重要物质,是人体赖以生存的最重要的宏量营养素之一。她说构成体内所有细胞和组织的主要成分,能维持细胞的正常功能和新陈代谢,维持长长的消化机能,对增强体质、提高免疫力、保持精力旺盛都发挥着重要作用。人体必须从食物中获取一定量所需的蛋白质,有报道指出人体蛋白质营养不良导致其免疫力下降后出现病症,在补充蛋白质后恢复[[1]]。本实验主要探讨某品牌蛋白质粉的免疫调节作用。
1 材料与方法
1.1 受试物
蛋白质粉由某保健食品有限公司提供,每100g蛋白质粉含浓缩乳清蛋白粉35g、胶原蛋白粉30g、大豆分离蛋白30g,香精等辅料5g,供试验用,以下简称受试物。
1.2 动物
采用SPF级ICR小鼠,雌性,192只,体重18~22 g,济南朋悦实验动物繁育有限公司提供。动物实验使用许可证号:SCXK(鲁)2014-0007。
1.3 主要仪器与试剂
主要仪器设备:酶标仪(美国贝斯特 960)、二氧化碳培养箱(精密科仪 L5410-220)、电子分析天平、半自动生化分析仪、显微镜等。
主要试剂:ConA(Sigma);MTT(Sigma);RPMI1640 培养液(赛默飞世尔);YAC-1细胞(上海素尔生物科技有限公司);DNFB;印度墨汁;绵羊红细胞(SRBC)及补体(豚鼠血清)等。
1.4 实验方法
先将动物随机分组,每48只小鼠为1个免疫群组。每个免疫群组设受试物低 、中 、高剂量组[分别为0.25、0.5、1.5g/(kg·BW)]和阴性对照组。动物灌胃按 0.2ml/(10g·BW)的体积给予,每天灌胃1次,连续灌胃30d。
参照《保健食品检验与评价技术规范》[[2]]“增强免疫力功能检验方法”进行。
1.5统计学方法
采用SPSS软件对数据进行方差分析。
2 结果
2.1 受试物对小鼠体重和脏器/体重比值的影响
受试物各剂量组的小鼠每期体重、体重增重、胸腺/体重及脾脏/体重比值与阴性对照组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),提示受试物对小鼠的体重增长和免疫器官重量无明显影响。
2.2 受试物对小鼠细胞免疫的影响
淋巴细胞增殖能力各剂量组与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠足跖肿胀度增加明显,在中、高剂量组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)
表1细胞免疫功能的检测结果(x±s,n=12)
组别 | 剂量(g/kg.bw) | DTH(mm) | 淋巴细胞增殖能力(OD差值) |
阴性对照组 | / | 0.60±0.16 | 0.152±0.078 |
低剂量组 | 0.25 | 0.72±0.19 | 0.142±0.065 |
中剂量组 | 0.5 | 0.77±0.19* | 0.160±0.067 |
高剂量组 | 1.5 | 0.79±0.16* | 0.156±0.056 |
与阴性对照组比较,*P<0.05
2.3受试物对小鼠体液免疫的影响
抗体生成细胞数检测中受试物各剂量组的溶血空斑数与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清溶血素水平检测中,受试物中、高剂量组的溶血素水平高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。
表2 体液免疫功能的检测结果(x±s,n=12)
组别 | 剂量(g/kg.bw) | 溶血空斑数(×103/全脾) | 血清溶血素(HC50) |
阴性对照组 | / | 178.2±64.1 | 148±24 |
低剂量组 | 0.25 | 175.2±56.4 | 172±52 |
中剂量组 | 0.5 | 180.2±66.3 | 188±49* |
高剂量组 | 1.5 | 182.4±67.0 | 193±29** |
与阴性对照组比较,*P<0.05, **P<0.01
2.4 受试物对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率及吞噬指数增加不明显,与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清指数,受试物各剂量组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)
表3 单核-巨噬细胞吞噬功能的检测结果(x±s,n=12)
组别 | 剂量(g/kg.bw) | 吞噬率(%) | 吞噬指数 | 碳廓清吞噬指数(a) |
阴性对照组 | / | 26.0±6.0 | 0.49±0.10 | 5.83±1.14 |
低剂量组 | 0.25 | 28.0±4.7 | 0.55±0.11 | 6.89±1.44* |
中剂量组 | 0.5 | 30.2±6.0 | 0.58±0.11 | 6.90±1.12* |
高剂量组 | 1.5 | 28.7±7.1 | 0.56±0.10 | 7.03±0.76* |
与阴性对照组比较,*P<0.05
2.5 受试物对小鼠 NK 细胞活性的影响
受试物各剂量组小鼠的NK细胞活性,与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)
表4 NK细胞活性的测定结果(x±s,n=12)
组别 | 剂量(g/kg.bw) | NK细胞活性(%) |
阴性对照组 | / | 39.9±6.8 |
低剂量组 | 0.25 | 41.5±5.4 |
中剂量组 | 0.5 | 42.2±6.3 |
高剂量组 | 1.5 | 42.9±7.5 |
3 讨论
本文通过试验研究某品牌蛋白质粉对小鼠免疫功能的影响,证明某品牌蛋白质粉对小鼠的免疫功能有很好的调节作用。
引用文献
[[1]] 林有坤.蛋白质营养不良症2例[J].广西医科大学学报,2001,18(1):44
[[2]] 《保健食品检验与评价技术规范》2003版