免疫组化染色技术在穿刺组织病理诊断中的意义

免疫组化染色技术在穿刺组织病理诊断中的意义

王晓宇,王兴兴,白燕 ,张宏志通讯作者

北京市顺义区医院   北京市  顺义区  101300

摘要：目的：分析免疫组化染色技术在穿刺组织病理诊断中的意义，分析其对诊断结果的影响。方法：选择200例超声科实施粗针穿刺的患者切片为研究对象，时间为2018年1月-2022年1月，按照随机对照法分为观察组100例，对照组100例，观察组切片采用HE染色联合免疫组化染色，对照组切片进行HE染色，以手术切除标本病理诊断结果作为标准，对比观察组与对照组的准确性。结果：从数据可见，在类型数量方面比较两组无显著性差异，P＞0.05；观察组诊断准确率高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：在穿刺组织病理诊断中采用免疫组化染色技术能够提高病理诊断的准确性，为患者的病情分析及手术方案制定提供了更好的参考依据，值得推广。

关键词：免疫组化技术；病理诊断

    随着现代诊疗技术的进步，超声引导下穿刺技术为肿瘤组织的诊断提供了非常重要的参考，将超声穿刺技术与病理技术相结合，具有操作方便、创伤小的特点，受到临床医师和患者的青睐。但是临床工作中由于穿刺组织体积小、部分组织易碎裂等特点，对于病理切片染色技术提出了更高的要求，常规HE染色的病理诊断准确率受到一定限制，鉴于此，本实验选择顺义区医院200例实施粗针穿刺的患者切片为研究对象，探讨免疫组化染色联合HE染色在穿刺组织切片中的应用价值，分析免疫组化染色对于病理诊断结果的影响。

1.资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1研究对象

选择北京市顺义区医院2018年1月—2022年1月之间的200例实施超声引导下穿刺患者的切片为研究对象，其中女性89例，男性111例，年龄范围是31-75岁，平均年龄55.12±7.33。按照随机对照法分为观察组100例，对照组100例，观察组切片采用HE染色联合免疫组化染色，对照组切片进行HE染色，分析免疫组化染色对穿刺组织病理诊断结果的影响。

1.1.2仪器设备

樱花全自动脱水机，莱卡半自动切片机，樱花全自动染色封片一体机，莱卡全自动免疫组化染色机。

益利厂家的苏木素，伊红，1%盐酸酒精分化液；北京中杉试剂公司的免疫组化抗体。

1.1.3实验标准

纳入标准：①能够成功穿刺并制作完整的切片；②后期进行手术切除并进行组织病理诊断；③病历资料完整真实。

排除标准：①后期未进行手术切除；②临床资料不完整。

1.2 实验方法

对照组100例采用常规HE染色技术，将患者的穿刺病理组织经过4%中性福尔马林固定后进行取材，脱水机走材后，石蜡包埋制作蜡块，切片时要求4um厚度，制成病理切片，将切片放入染封一体机。染色流程：切片依次置入三个二甲苯中，每个二甲苯浸泡脱蜡10分钟后，依次从无水到75%梯度酒精水化，流水冲洗，进入苏木素染液染色3分钟，流水冲洗后，在1%盐酸酒精中浸泡15秒进行分化，后流水冲洗返蓝，伊红染液中浸泡1.5分钟，流水进行冲洗，并分别进入75%，85%，95%，无水的乙醇中实施梯度酒精脱水，每个酒精5分钟，最后进入三个二甲苯溶液中浸泡透明，每次10分钟。完成HE染色后自动传送到封片机，进行封片。HE制片完成后可进行病理诊断观察。

观察组100例进行常规HE染色制片后，进一步追加免疫组化染色。将4um石蜡切片脱蜡至水，使用PBS缓冲液清洗3min，采用修复液对常规石蜡切片进行修复，在修复方式上选择高压锅热修复，时间为5分钟，随后取出，待其自然冷却。紧接着放入浓度为3%的过氧化氢溶液中浸泡10分钟，并再次使用PBS溶液清洗。可加入特异性一抗，并放在冰箱4℃环境下一晚，再次使用PBS清洗三分钟。可滴加酶标羊抗鼠IgG多聚物，在温室孵育半小时，进行DAB显色。显色完成后自来水清洗，再浸入苏木素染液1~2分钟之后用清水清洗，接着用1%盐酸乙醇分化3-5秒，自来水返蓝。最后则用乙醇脱水以中性树胶进行封片。

1.3 评价标准

以手术切除组织的病理诊断结果作为金标准，对比追加免疫组化染色技术对提高病理诊断准确性的效果。

1.4统计方法

采用统计学软件SPSS 23.0处理数据，t作用是：检验计量资料，其表现形式是（x±s）；组间差异性依次使用χ2检验，检验，作用是：检验计数资料，表现形式是[n（％）]，P＜0.05，差异具有统计学意义。

2 结果

2.1两组数据在类型数量方面比较两组无显著性差异，P＞0.05（表1）

表1 两组不同类型切片比例分析[n（%）]

2.2数据显示，对照组和观察组进行对比，实施穿刺的200例患者的穿刺组织病理诊断结果与手术切除组织病理结果相对比，观察组诊断准确率高于对照组，具有差异性显著（P＜0.05）。（表2）。

表2两组在肝、甲状腺、乳腺以及淋巴结组织片中的诊断准确率分析[n（%）]

3 讨论

    肿瘤属于常见的一种疾病类型，分为恶性肿瘤和良性肿瘤，其中良性肿瘤对人体的伤害较小，恶性肿瘤在早期并没有明显的症状，多数到中晚期才得到确诊，这就会增加患者的病死率，因此提高恶性肿瘤的早期发现率，有助于早期治疗，延长生命期。

随着现代诊疗技术的进步，超声引导下穿刺技术为肿瘤组织的诊断提供了非常重要的参考，将超声穿刺技术与病理技术相结合，具有操作方便、创伤小的优点，但是由于穿刺组织体积小、易碎裂，所以对病理切片染色技术提出了更高的要求，其诊断准确率受到一定限制。随着肿瘤病理学技术的不断发展，通过免疫组化技术能够提升诊断的特异性和敏感度[1]。当下免疫组化技术已经被用于各种肿瘤疾病的诊断中。在进行染色时需要认真观察HE切片，以所观察到的病理结果为基础，依据组织细胞类型的需求和实验室规定来选择抗体，以便于提高诊断的精准度。同时在对阳性结果进行分析的过程中，也要借助细胞形态学来判断[2]。通常情况下免疫组化技术可以辨别细胞的来源和严重程度，形态学也是肿瘤判断的重要指标[3]。在诊断期间需要选择多种抗体进行诊断，而在抗体的选择中也要考虑到成本因素，以实际需求来确认，抗体的特异性也会随着免疫组化使用的样本范围增加而扩大。结合本次调研可见免疫组化技术在肿瘤患者的诊断效果中具有更高的精准度。在检验期间要做好组织固定、烤片、抗原修复等多个过程的工作，确保操作规范。

综上所述，采用免疫组化技术能够为肿瘤患者的病情分析提供准确依据，提高病理诊断的准确性，值得推广。

参考文献

[1]徐晶晶,党启华,孙兴月,姜可,张顺民.免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果比较分析[J].系统医学,2022,7(13):41-44.

[2]段裴.比较免疫组化技术、常规技术在肿瘤病理诊断中的效果[J].临床医药文献电子杂志,2020,7(11):122-123.

[3]唐世峰.免疫组化技术、常规技术应用于肿瘤病理诊断中的效果比较[J].临床医药文献电子杂志,2020,7(11):139+143.