Cyclin D3在原发中枢神经系统淋巴瘤的表达及临床意义

Cyclin D3在原发中枢神经系统淋巴瘤的表达及临床意义

靳红

淄博市妇幼保健院 血液科 山东淄博255000

【摘要】 目的：探讨细胞周期蛋白 D3（Cyclin D3）在原发中枢神经系统淋巴瘤中的表达水平，分析其在原发中枢神经系统淋巴瘤中发生、发展中的可能作用。方法：采用免疫组织化学检测 10例正常脑组织与25例原发中枢神经系统淋巴瘤脑组织中 Cyclin D3 蛋白的表达情况，分析 Cyclin D3蛋白阳性表达率与临床病理特征。结果：与正常脑组织相比，Cyclin D3在原发中枢神经系统淋巴瘤的阳性表达率增高（P<0.05）。在25例原发中枢神经系统淋巴瘤组织中，有脏器转移者的Cyclin D3阳性表达率较高（P<0.05）。结论:Cyclin D3 的过表达可能参与了原发中枢神经系统淋巴瘤的发生和转移。

【关键词】 细胞周期蛋白 D3；原发中枢神经系统淋巴瘤；免疫组织化学；转移

Expression and clinical significance of cyclin D3 in primary central nervous system lymphoma

Abstract：ObjectiveTo investigate the expression level of cyclin D3 in primary central nervous system lymphoma and analyze its possible role in the occurrence and development of primary central nervous system lymphoma. Methods The expression of cyclin D3 protein in 10 normal brain tissues and 25 primary central nervous system lymphoma brain tissues was detected by immunohistochemistry. The positive expression rate of cyclin D3 protein and clinicopathological features were analyzed. Results compared with normal brain tissue, the positive expression rate of cyclin D3 in primary central nervous system lymphoma was higher (P < 0.05). In 25 cases of primary central nervous system lymphoma, the positive expression rate of cyclin D3 was higher in patients with organ metastasis (P < 0.05). Conclusions the overexpression of cyclin D3 may be involved in the occurrence and metastasis of primary central nervous system lymphoma.

Key words  Cyclin D3; Primary central nervous system lymphoma; Immunohistochemistry; Transfer

   中枢神经系统淋巴瘤约占神经系统肿瘤的1%~3%，分为原发性和继发性两种类型,原发中枢神经系统淋巴瘤（primary central nervous system lymphoma，PCNSL）是一种罕见的侵袭性结外非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL），通常局限于大脑、眼睛、脊髓或软脑膜而无全身性受累[1-2]。PCNSL的发病率呈明显上升趋势，可发生于任何年龄段，40~60岁为疾病高发期，且无明显性别差异。患者发病初期以头痛、呕吐为主要表现，可同时伴有性格改变、嗜睡等精神症状，局限性体征以肢体麻木、瘫痪失语和共济失调为主，既可损伤患者的中枢神经系统，也可累及脑、眼等部位，严重威胁患者的生命安全[3-4]。已有研究显示，细胞周期蛋白 D3（Cyclin D3）是细胞 G1/S 期的正调控因子，其与相应的周期蛋白依赖性激酶（CDK）结合成复合物，参与并促进细胞相关基因的表达，从而使细胞通过 G1/S 调控点，进入自主分裂程序，诱发癌变[5]。临床研究表明，Cyclin D 在多种肿瘤中呈现过度表达，但不同亚型表达的情况不一，且受PTEN 等抑癌基因的调控

[6-7]。因此，本研究拟探究是否Cyclin D3 在正常脑组织与PCNSL中存在差异性表达，以及与临床分期的关系。

1材料与方法

1.1标本来源  选取本院2020年4月至2021年8月血液内科住院治疗并经病理证实为原发中枢神经系统淋巴瘤标本25例（男性11例，女性14例）。所有患者HIV抗体检测阴性，薛成功淋巴细胞计数及其占比均在正常范围，均行骨髓穿刺检测排除系统性淋巴瘤。对照组为正常脑组织10例，来自脑外伤行手术治疗的患者。

1.2方法  采用非生物素二步法免疫组织化学染色（免疫组化）法。先用 10% 甲醛固定子宫内膜标本，石蜡包埋后切片厚度约4um，脱蜡、修复抗原；再用3% H2O2去离子水孵育10 min，滴加Cylin D3多克隆抗体（1∶50，奥博森），二氨基联苯胺显色液（罗氏）显色，蒸馏水充分冲洗，脱水，透明树胶封片。以 Cyclin D3阳性的脑组织切片作为阳性对照，使用磷酸盐缓冲液（中杉金桥）代替一抗作为阴性对照。分别记录35例组织的Cyclin D3 阳性表达率，并分析各组间的差异。

1.3评价标准  以细胞质中出现黄色至棕黄色颗粒为阳性。在光镜下计数400个细胞，采用双评分半定量法：阳性细胞数< 5%评0分，5% ~ 25% 评1分，26% ~ 50% 评2分，> 50% 评3分；显色度评分：细胞核无显色评0分，淡黄色评1分，棕黄色评2分，棕褐色评3分。总分为2项评分相加之和，总分0分为阴性（-）、1 ~ 2分为低表达（+）、3 ~4分为中表达（++）、5 ~ 6分为高表达（+++）。阳性表达率 =（中表达例数+高表达例数）/总例数×100%。

1.4统计学处理  使用SPSS 20.0数据分析，分类资料以例（%）

表示，组间比较采用χ2 检验或Fisher确切概率法。

2 结果

2.1不同脑组织中Cyclin D3的表达特点  Cyclin D3在正常脑组织和原发中枢神经系统淋巴瘤中均呈现阳性表达。其主要在

癌细胞中表达明显，位于细胞浆中，呈淡黄或棕黄色，基质细胞中呈现阴性表达或弱表达，如表1所示。

表1不同脑组织中 Cyclin D3的表达特点（n/%）

组别             例数        阳性        阴性

正常脑组织       10         1（10）     9（90）

PCNSL           25         21（84）   4（16）

2.2  PCNSL中Cyclin D3阳性表达与临床病理特征的关系  25例PCNSL脑组织中，有脏器转移Cyclin D3阳性表达率较高（P < 0.05），见表2。

表2  25例PCNSL中Cyclin D3阳性表达与临床病理特征的关系（n/%）

临床病理特征  分类    Cyclin D3表达        P 值

    阴性       阳性

分化级别       G1   9（64.26）  5（35.71）   0.121

G2    6（60）    4（40）

G3    1（100）   0（0）

分期           Ⅰ    11（78.57） 3（21.43）   0.385

Ⅱ    8（88.89）  1（11.11）

Ⅲ/Ⅳ  1（50）    1（50）

脏器转移       无    13（76.47） 4（23.53）   0.004

有    4（50）     4（50）

3讨论

原发性中枢神经系统淋巴瘤属于高度恶性的非霍奇金淋巴瘤，发病率相对较低，好发于免疫缺陷病毒感染的人群中，常表现为浸润髓及软脑膜等部位的弥漫性病变[8]。原发性中枢神经系统淋巴瘤的发病机制尚未形成明确定论，可能与原位淋巴细胞恶性克隆增生和嗜中枢性淋巴细胞等因素有关，发作时以颅内高压症状、神经系统症状、智力下降和行为异常为主要表现，严重影响患者的正常工作和生活质量[9-10]。

细胞周期调控异常是肿瘤发生的必要环节，最重要的调控点位于G1/S期，当该调控点的抑癌/促癌因子比例或表达失常时，细胞的增殖功能可能失控，使细胞出现恶性增殖，从而发展为肿瘤细胞。Cyclin D是G1/S期转换的重要调控因子，包括D1、D2 及D3三个亚型。已有大量研究证明，Cyclin D3是一种原癌基因，其基因结构和功能异常与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关，主要是通过调控点来调节细胞的分裂、DNA 修复等过程[11]。既往有研究表明，CyclinD亚型在脑组织中均存在表达。因此，本研究检测Cyclin D3 在正常脑组织及原发性中枢神经系统淋巴瘤中的表达情况，结果发现两者均呈现阳性表达，且原发性中枢神经系统淋巴瘤患者中Cyclin D3阳性表达率更高。进一步分析了 Cyclin D3与原发性中枢神经系统淋巴瘤患者临床病理特征的关系，结果显示有脏器转移者的CyclinD3 阳性表达率高于无脏器转移者，但Cyclin D3的阳性表达与患者的病理分化级别、临床分期均无关。这可能肿瘤细胞无限增殖不是一种细胞周期蛋白过度表达的结果，而是多种细胞周期蛋白表达异常的共同结果有关

[12-13]。

综上所述，Cyclin D3 可能参与原发性中枢神经系统淋巴瘤患者的细胞增殖调控，与脏器转移有关，但具体机制还需要进一步的多中心、大样本研究加以证实。

参考文献

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