TMAO与缺血性脑卒中风险的相关性实验研究

TMAO与缺血性脑卒中风险的相关性实验研究

王昕, 崔野 ,李景良

齐齐哈尔建华医院   161000   （黑龙江，齐齐哈尔）

【摘要】目的：探讨观察对急性缺血性脑卒中患者外周血中肠道菌群代谢产物--氧化三甲胺（TMAO）的含量水平情况。方法：对2020年1月~12月间收治的急性缺血性脑卒中患者76例为观察对象，根据发生风险情况分为中危组和高危组各38例，同时选取健康人群为对照组人数为38例，对3组血清TMAO水平进行对比观察。结果：高危组中TG、LDL、空腹血糖、BMI、TCH指标对比明显高于中危组，明显高于对照组，HDL水明高危组明显低于中危组和对照组。TMAO水平情况，高危组TMAO明显高于其它2组，对比差异明显,P< 0.05。

结论：TMAO与缺血性脑卒中发生风险有相关性，TMAO 能够促进动脉粥样硬化的发展,并且能增强血小板的高反应性及血栓形成的风险。

【关键词】TMAO；缺血性脑卒中；发生风险；相关性；

脑卒中是一组以局灶性神经功能缺损为特征的脑血管疾病，脑部疾病能够影响肠道菌群，但是目前尚未明确肠道菌群与脑部疾病之间如何相互影响的。氧化三甲胺（TMAO）为肠道菌群代谢产物，本研究对急性缺血性脑卒中患者TMAO水平同脑卒中发生风险情况相关性进行观察，具体分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料  对2020年1月~12月间收治的急性缺血性脑卒中患者76例为观察对象，中危组38例中，男15例，女23例，年龄 48~71岁，平均年龄（56.2±2.2）岁，伴高血压史14例，糖尿病史2例，高脂血症1例；高危组38例中，男17例，女21例，年龄 49~73岁，平均年龄（56.8±3.4）岁，伴高血压史17例，糖尿病史10例，高脂血症8例；对照组38例，男19例，女19例，平均年龄（55.5±1.2）岁。

1.2方法

1.2.1血清TMAO定量测定

①试剂与仪器

低温离心机：TDL-40B 台式离心机（上海安亭仪器公司）；冷冻高速离心机（USA）；电子天平：ME104 /02(梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；涡旋混匀小精灵 MS-300（莱普特科学仪器（北京）有限公司）；超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（AB SCIEX Q-TRAP 6500，USA）；乙腈，甲酸铵；氧化三甲胺(TMAO)，氘代氧化三甲胺(d9-TMAO)，标准品(TGI)。

②标准应用液的配制及标准曲线的制备称取 2 mg TMAO，用超纯水稀释至 2 ml 得 1000 ppm（ug/ml）的标准储备液，于-40℃下保存，检测前用甲醇稀释配制成不同浓度的标准应用液，以下浓度为初试浓度，需根据具体条件做调整：（200 ppb（ng/ml）、100 ppb、50 ppb、25 ppb、12.5 ppb、6.25 ppb、3.125 ppb、1.5625 ppb）。经检测后得到峰面积与浓度的标准曲线。

③ 内标溶液配制

将 1ml 超纯水加入 5mg 的 d9-TMAO 中配制成 5000 ppm 的内标储备液，于-40℃下保存，使用时用乙腈稀释储备液为 100 ppb（5000 ppm 稀释 10 倍，再稀释 5倍得）的内标应用液。

④样品处理 

抽取血清 100 ul 于 1.5ml 离心管中，加入 10 ul 100 ppb 的 d9-TMAO 溶液，涡旋混匀 30s；再加入 300 ul 甲醇，涡旋混匀 3 min，于 4℃条件下 13400 r/min

1.3 观察指标  本次研究同时对甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、总胆固醇（TCH）、血糖、体重指数（BMI）指标同 TMAO水平进行观察。

1.4数据处理 应用SPSS26.0软件进行数据处理分析，计量以（±s）表示，t检测。存在统计学差异以p<0.05表示。

2 结果

对3组观察指标情况进行对比观察，高危组中TG、LDL、空腹血糖、BMI、TCH指标对比明显高于中危组，明显高于对照组，HDL水明高危组明显低于中危组和对照组。

TMAO水平情况，对照组同中危组患者TMAO水平对无差异性（p>0.05），高危组TMAO明显高于其它2组，对比差异明显,P< 0.05。

表  3组观察指标情况  （±s）

3 讨论

脑卒中是脑血管疾病的主要临床类型，包括缺血性卒中和出血性卒中，是目前导致人类死亡的第二位原因。研究发现越来越多的疾病与肠道菌群及其代谢产物相关。“肠道菌群-肠-脑”轴是最近提出的新概念,肠道菌群代谢产物TMAO在脑血管疾病中的作用有较多的研究报道，研究认为 TMAO 能够促进动脉粥样硬化的发展,并且能增强血小板的高反应性及血栓形成的风险。TMAO可以通过促进巨噬细胞转化为泡沫细胞等途径促进动脉粥样斑块的发生发展，进而导致心、脑血管疾病发生。另外多项研究也证明TMAO血浆浓度的升高往往预示着预后不良。

本研究中，高危组中TG、LDL、空腹血糖、BMI、TCH指标对比明显高于中危组，明显高于对照组，HDL水明高危组明显低于中危组和对照组。TMAO水平情况，高危组TMAO明显高于中危组。

总之，TMAO与缺血性脑卒中发生风险有相关性，TMAO 能够促进动脉粥样硬化的发展,并且能增强血小板的高反应性及血栓形成的风险。

参考文献

[1]黄佳婷,刘会,刘小川,等. 血清中氧化三甲胺对老年急性缺血性脑卒中预后的预测价值[J]. 老年医学与保健,2021,27(3):568-572,585.

[2] 赵小辉,宋志军,杨晶,等. 外周血TMAO、CD62P对老年急性缺血性脑卒中患者预后的预测价值[J]. 标记免疫分析与临床,2021,28(7):1217-1221.

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