全自动快速微生物质谱检测系统鉴定流感嗜血杆菌及其可靠性分析

全自动快速微生物质谱检测系统鉴定流感嗜血杆菌及其可靠性分析

宋宇

大庆油田总医院 黑龙江大庆 163001

摘要：目的 对流感嗜血杆菌应用全自动快速微生物质谱检测系统鉴定的效果和可靠性进行讨论。方法 以本院1384份生化实验室痰液标本为研究样本，鉴定种属之后，得到42株HI（流感嗜血杆菌）菌株，通过不同试验方式鉴定HI菌株，对比鉴定结果。结果 全自动快速微生物质谱检测系统鉴定准确率和常规生化鉴定系统相比无明显差异（P＞0.05），显著高于M-H琼脂药敏试验（P＜0.05）；全自动快速微生物质谱检测系统鉴定时间较短，操作简单，不会消耗较多成本，可自动显示鉴定结果，具备较大推广优势。结论 全自动快速微生物质谱检测系统鉴定HI菌株准确性较高，且耗时较短，易于操作，可作为HI菌株的主要鉴定方式。

关键词：全自动快速微生物质谱检测系统；流感嗜血杆菌；常规生化鉴定；M-H琼脂药敏试验

流感嗜血杆菌是引发流感常见的病原体，可能引起中耳炎、败血症和化脓性脑膜炎等并发症。为明确疾病病原体是否为流感嗜血杆菌，防止滥用抗菌药物，提高患者耐药性，应当加强检测流感嗜血杆菌，从而针对性选择抗菌药物。相关资料表明，全自动快速微生物质谱检测系统针对流感嗜血杆菌，检测意义重大，基于此，本研究将以本院1384份生化实验室痰液标本为研究样本，进行相关研究，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经本院医学伦理委员会批准，以本院1384份生化实验室痰液标本为研究样本，来源于1384例呼吸道感染患者，男女比例735:649，年龄均值（37.94±5.93）岁。鉴定种属之后，得到42株HI菌株。

1.2 方法

首先分离并对细菌进行培养，在流感失血培养及上接种细菌，培养环境为恒温孵育箱，保证37℃为恒温状态，持续培养2d左右。以16SrDNA检测测序为金标准，借助DNA提取检测试剂盒完成对模板的提取，通过PCR扩增的方式，增加16SrDNA片段，若为阳性检测情况，完成DNA序列的测序，和数据库中的序列资料充分对比。如果相似度接近100%，即可标明为同种细菌。

全自动快速微生物质谱检测系统：应用梅里埃公司生产的全自动快速微生物质谱检测系统，在质谱仪样品鉴定板中鉴定单个菌落，并将基质液滴在菌落上，剂量为1μL。保持180s的静置时长，晾干基质液之后，在质谱仪中鉴定样品板。常规生化鉴定系统：应用细菌鉴定试剂条，鉴定方法选择比色法，依照有关流程完成操作。M-H琼脂试验：检测试验因子选择X、V因子，在培养基上均匀涂抹单菌落，粘贴X、V和X+V，并在二氧化碳培养箱中培养，以7%-11%的浓度控制二氧化碳，培养时间设置在大约24h，获得检测结果。

1.3 观察指标

对比全自动快速微生物质谱检测系统与常规生化鉴定系统，及M-H琼脂药敏试验鉴定准确性，并记录不同鉴定方法特点。

1.4 统计学分析

本组研究采用SPSS 24.0统计学软件处理数据，用χ²检验计数资料，用t检验计量资料，差异具有统计学意义时，P＜0.05。

2 结果

2.1 三种鉴定方法HI菌株鉴定准确率对比

全自动快速微生物质谱检测系统鉴定准确率和常规生化鉴定系统相比无明显差异（P＞0.05），显著高于M-H琼脂药敏试验（P＜0.05）。见表1。

表1 三种鉴定方法HI菌株鉴定准确率对比[n（%）]

2.2 三种鉴定方法使用特征对比

全自动快速微生物质谱检测系统鉴定时间较短，操作简单，不会消耗较多成本，可自动显示鉴定结果，具备较大推广优势。见表2。

表2 三种鉴定方法使用特征对比

3 讨论

流感嗜血杆菌（HI）是人体常见的，引发上呼吸道的病菌，如果人体免疫力较差，或者HI数量有所增长，则会有较大概率引发化脓性感染，极大影响患者生活质量。临床上的主要发病群体为老年人和儿童，和上述群体自身免疫力较差的原因有较大关联。因此，临床需要加强HI的鉴定。研究结果表明，全自动快速微生物质谱检测系统鉴定准确率和常规生化鉴定系统相比无明显差异（P＞0.05），显著高于M-H琼脂药敏试验（P＜0.05）。M-H琼脂药敏试验准确率不高，主要是因为鉴定环境要求相对苛刻，而且琼脂接触、存储时间情况，都会对鉴定准确率造成较大影响。此外，常规生化鉴定系统，操作复杂性较高，获得结果过程时间过长，因此在操作、时间以及成本方面，全自动快速微生物质谱检测系统应用意义较大。

综上所述，全自动快速微生物质谱检测系统鉴定HI菌株准确性较高，且耗时较短，易于操作，可作为HI菌株的主要鉴定方式。

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