微生物鉴定技术浅谈

微生物鉴定技术浅谈

董劲松

杭州明德生物新技术开发有限公司 浙江省杭州市 310000

摘要：现阶段，随着社会科技的不断研究，微生物鉴定技术也得到了一定的进步，在相关行业的发展中占据着重要的作用，如环境菌种库的建立，微生物污染溯源分析，细胞库或种子批的基因测序，微生物污染预警。鉴于此，本文章介绍了微生物鉴定技术进行分析，促进微生物鉴定技术的发展。

关键词：微生物；鉴定技术

引言

近几年，在社会经济不断提升的基础上，生物科学技术在不同的领域中进行广泛的应用，与人们的生活相连接，提升了人们的生活水平。对此，相关人员对微生物鉴定技术进行了深入的研究，产品质量进行有效提升，为人民安全提供保障。

1微生物鉴定系统

微生物鉴定系统的操作比较简单，在应用方面比较快捷，是一种自动化以及标准化程度较高的仪器。在医院以及疾病防疫等进行广泛的应用，对微生物进行检验。在对微生物的检定中，使用DNA测序鉴定是一种比较先进的方式，通过DNA测序可以对所以的菌种进行使用，较之传统的鉴定方式更加的快速。在微生物的鉴定中包含细菌16srDNA以及真菌ITS鉴定等，在实验中适量的微生物，提升鉴定结果的准确性。

2微生物鉴定技术的介绍

2.1PCR技术

PCR技术通过体外酶的反应促进特定DNA片段的合成，并通过扩增产物使DNA数量呈上升趋势，使微生物种类的鉴定通过荧光条检测变得更加容易。从实际角度出发，在对菌类产品进行检测过程中，对PCR技术的应用要熟练，这种技术具有一定的灵敏性。从理论上讲，在细菌检测时，可以通过使用PCR技术对细菌基因的副本进行检测，然后在有限的时间内进行增菌，通过这种检测方式，对细菌的检测时间进行有效缩短，提升了检测的效率。

2.2基因芯片技术

基因芯片是一种对寡核苷酸进行分类的先进技术以及微处理技术。能够对硅片等材料进行排序，最终的结果是形成一种密集的分类形式，我们将其称为信息检测芯片。在对无菌药品生产的过程中，主要应用的技术有两种：第一种是基因芯片，第二种是微生物检测技术，主要是结合荧光标记技术创造的。微生物检测技术主要分析基因探针与寡核苷酸点之间的杂交，并扫描二者之间的杂交情况。对于荧光的分布情况进行有效解决，最终目标是确定测试样品中微生物的存在或不存在。

基因芯片技术可以通过增加探针来扩大检测范围来实现这一目标。通过对探针技术进行优化与完善，不仅可以扩大探针技术检测的范围，与此同时，还可以对芯片检测的性能进行一定的提升。基因检测的应用如此广泛，甚至可以提高无菌样品生产的检测能力，在实验室中对病原体进行全面的检测。与传统的基因检测技术相对比，现有基因检测技术仍不完善，需要得到进一步的优化与升级，使得自动化程度进行提高。

2.3基因探针技术

基因探针检测技术通过对核苷酸序列的特性进行有效利用，对生物素进行标记，结合机体的特定基因结构，来标记基因和蛋白质结构，达到正确的检测目的。其检测的原理并不复杂，主要是利用荧光标记核苷酸分子杂交的方法，将两者的特异性生物素进行有效的结合，与此同时，携带标记信号，然后检测标记信号。同位素检测通常采用探针标记，但探针标记的特异性非常明显，也是提高微生物检测准确性的重要途径。另外，基因探针检测技术可以大大提高检测率。然而，在检测过程中，标记同位素具有一定程度的污染，所以，在基因探针检测中，相关人员必须要做好防护工作。在检测过程中，还应注意标准化，避免随意处置检测废物，造成不良影响。

2.4基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

激光解吸的飞行时间电离质谱称为MALDI-TOFMS。简单地说，MALDI-TOFMS是一种基于微生物核糖体和外周蛋白的特异性以及保存的细菌鉴定技术。若菌体蛋白和基质的结晶进行电离，首先需要对光线进行吸收，电离后形成不同的离子峰，出现这种现象的原因是真空电场中质荷比不同，电离后，不同的离子峰形成蛋白质指纹图谱。MALDI-TOFMS的检出率非常高，在检测的过程中，一次可采集96个样品，大样本384孔板筛选3分钟后即可得到检测结果。MALDI-TOFMS的检测效率较高，对0.1μL菌液也可以进行有效的识别，在不同的菌株识别中有一定的优势。

然而，MALDI-TOfMS在任何识别方面都没有优势，并存在一定的局限性。特别是对于丝状真菌的鉴定，准确度不高。这是因为丝状真菌的细胞壁被破坏得非常严重，很难分离出细胞蛋白质。为了解决丝状真菌蛋白提取的问题，相关人员发现沙氏的葡萄糖液体培养基SDB在离心前可以通过超声波进行裂解，对之前遇到的难题进行有效解决，使得鉴定的准确性得到了提高。MALDI-TOFMS有时也会误诊菌体，大多数情况下专业人员会将其称为大肠埃希菌，这两种菌体的遗传背景非常相似，它们的DNA序列也非常相似，相关性较高，细菌蛋白峰也有类似的特征，所以，专业人员可以使用生理、生化和血清学测试来确定结果。

结语：综之，在相关行业中对相应的菌类产品进行生产的过程中，要对微生物鉴定技术进行有效应用，确保菌类产品生产过程中的安全。与此同时，对微生物的种类进行全面的了解，通过对数据库的应用，对生产的质量进行保证。微生物鉴定技术的发展逐渐向多功能的方向进行发展，促进微生物鉴定技术在各行各业中的应用。

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