泰州 医学院 江苏泰州 225799
摘要:研究茯苓提取物对化学性肝损伤辅助功能。采用酒精性肝损伤模型,选取SPF ICR级雄性小鼠,分别经口给予茯苓提取物11.67mg/kg·d、中剂量组23.33mg/kg·d、高剂量组70.00mg/kg·d,连续灌胃31d,进行各项指标检测及组织病理学检查。结果显示,高剂量组茯苓提取物可显著降低小鼠肝组织中丙二醛、显著升高还原型谷胱甘肽含量(P<0.05),中、高剂量组茯苓提取物可显著降低甘油三酯含量(P<0.05 );中、高剂量组小鼠肝组织病理组织学检查明显评分明显低于模型对照组(P<0.05),对小鼠体重无不良影响。结果表明,茯苓提取物对化学性肝损伤具有辅助保护功能。
关键词:茯苓提取物;酒精;化学性肝损伤
肝脏在人体中发挥着重要的代谢、解毒功能。由于自然环境状况日益恶劣以及人们日常交际活动的大幅增加,我国已逐渐成为一个肝脏疾病高发的国家,近年来,由于酒精性肝损伤被人们所重视,对于解酒护肝药物的研究越来越多,茯苓多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw.)Wolf的干燥菌核,归心、肺、脾、肾经。利水渗湿,健脾,宁心。本实验采用酒精性肝损伤模型研究茯苓提取物对化学性肝损伤辅助功能。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试材 受试物为茯苓提取物,人体每日推荐服用量0.14g,相当于茯苓药材2.1g。经水沸腾提取(6倍量水提取2次,2h/次)、浓缩、喷雾干燥等工艺制成。雄性小鼠(50 只,体重18~22g),SPF ICR级别。
1.1.2 仪器和试剂 紫外可见分光光度计、冰冻切片机、病理显微镜、全自动生化分析仪等。还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒等。
1.2 方法 按照《保健食品检验与评价技术规范(2003 版)》 中“对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法” 方案二的酒精肝损伤模型方法进行。
1.2.1 实验动物分组及给药 小鼠适应性饲养3d,随机分为模型对照组、空白对照组、茯苓提取物低剂量组11.67mg/kg·d、中剂量组23.33mg/kg·d、高剂量组70.00mg/kg·d,每组10只。模型对照组和空白对照组均灌胃等体积的蒸馏水,10mL/kg·d,连续灌胃31d。实验结束,将模型对照组和3个剂量组1次灌胃50%乙醇(以蒸馏水稀释)12mL/kg·d,空白对照组给予同体积蒸馏水。禁食16h后,全部处死,取肝脏,进行各项生化指标检测及组织病理学检查。
1.2.2 数据统计 用SPSS 13软件对试验数据进行均值比较,方差齐时,各组间两两比较用LSD法;方差不齐时,各组间两两比较采用Tamhane's法。P<0.05,
表示差异显著,证明该数据具有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 茯苓提取物对小鼠体重的影响
低、中、高剂量组及空白对照组小鼠体重与模型对照组比较均无显著性差异(P>0.05),表明茯苓提取物对小鼠的体重无不良影响。
2.2 茯苓提取物对小鼠肝组织中MDA、GSH、TG 含量的影响
表1. 对小鼠肝脏中MDA、GSH、TG 含量的影响
组别 | 动物数,只 | MDA,mmol/mg | TG,mmol/g | GSH,mg/g prot |
空白对照组 | 10 | 0.492±0.165 | 0.011±0.001 | 4.55±1.53 |
模型对照组 | 10 | 0.879±0.198# | 0.028±0.006# | 2.92±1.42# |
11.67mg/kg | 10 | 0.763±0.232 | 0.027±0.008 | 3.33±1.26 |
23.33mg/kg | 10 | 0.736±0.189 | 0.016±0.013* | 3.46±1.67 |
70.00mg/kg | 10 | 0.565±0.115* | 0.015±0.011* | 4.12±1.40* |
#与空白对照组比较,P<0.05;*与模型对照组比较,P<0.05
由表1可见,模型对照组 MDA、GSH、TG 的含量与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05),说明模型成立; 高剂量组MDA、GSH含量与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05),中、高 剂量组TG含量与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)。说明茯苓提取物可降低肝组织中MDA、TG,升高GSH含量。
2.3肝脏组织病理学检查结果
表2. 对小鼠肝脏组织病理学的影响
组别 | 动物数,只 | 评价分 |
空白对照组 | 10 | 6±5 |
模型对照组 | 10 | 30±12## |
11.67mg/kg | 10 | 23±13 |
23.33mg/kg | 10 | 19±13* |
70.00mg/kg | 10 | 16±11* |
##与空白对照组比较P<0.01;*与模型对照组比较P<0.05
模型对照组小鼠肝组织病理学检查平均积分与空白对照组比较有极显著性差异(P<0.01),说明模型成立;中、高剂量组肝组织病理学检查平均积分与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)。
3 结果与分析
何绮微[1]等人研究苦参、茯苓两种中药抗肝纤维化的作用及其机制。结论:两种中药均能减缓大鼠肝纤维化的发生,其机制可能与这些中药能减少肝纤维结缔组织沉积有关。田洁[2]等人研究茯苓女贞子复合胶囊对酒精性肝损伤保护作用。结果证实,茯苓具有对急性酒精性肝损伤的保护作用。
本实验通过建立酒精肝损伤模型,研究了茯苓提取物对化学性肝损伤作用。结果显示,高剂量组茯苓提取物可显著降低小鼠肝组织中丙二醛、显著升高还原型谷胱甘肽含量(P<0.05),中、高剂量组茯苓提取物可显著降低甘油三酯含量(P<0.05 );中、高剂量组小鼠肝组织病理组织学检查明显评分明显低于模型对照组(P<0.05),对小鼠体重无不良影响。本实验表明,茯苓提取物对化学性肝损伤具有辅助保护功能。
参考文献:
[1] 何绮微,杨洁.苦参与茯苓对肝纤维化的作用及机制的研究.热带医学杂志.2010,10(8): 930-932.
[2] 田洁,柯翔鸿,田辉等.茯苓女贞子复合胶囊对酒精性肝损伤保护作用的实验研究.公共卫生与预防医学.2012,23(4):106-108.