麻叶千里光内异黄酮的提取及测定体会

麻叶千里光内异黄酮的提取及测定体会

张静

黑龙江省大兴安岭地区食品药品检验检测所 药品室 165000

【摘要】目的：就麻叶千里光内异黄酮这一化学成分的提取与测定过程与体会进行分析探讨。方法：据索氏提取温度、索氏提取时间、料液比的设定，明确异黄酮最佳提取参数，并在该参数下利用紫外分光光度计进行异黄酮的测定。结果：异黄酮最佳提取参数为索氏温度80℃，索氏提取时间5.0h，料液比为1:30g/ml，异黄酮测定索氏提取为 0.13495mg/g。结论：通过紫外分光光度法能够有效进行麻叶千里光内异黄酮含量的测定。

【关键词】麻叶千里光；异黄酮；提取；测定；紫外分光光度法

麻叶千里光（Senecio cannabifolius Less．）是一种菊科千里光属植物，是返魂草中的主要类型，又称宽叶返魂草，为干燥全草，具有较好的止咳平喘、清热解毒等效果^[1]，是我国长白山地区的特色药材资源之一。麻叶千里光中含有多种化合物，以黄酮类、生物碱类、酚酸类化合物等为主^[2]，同时含有多糖类成分^[3]，其中酚酸类化合物已被证实抗氧化效果突出，而多糖组分具有较好的提升机体免疫活性的功能。有研究^[4]通过质谱技术对返魂草60％ 醇洗脱部分中的化学成分进行了检测与鉴别，结果共鉴定出黄酮类、生物碱类、酸类等30各化学成分。现阶段对异黄酮这一化合物的研究，主要以大豆异黄酮为主，而大豆异黄酮易被证实在抗癌、免疫调节、雌激素样作用方面发挥着重要价值^[5]，而关于麻叶千里光内异黄酮的提取测定相关研究较少。本文主要结合笔者工作情况，就这一方面的工作开展情况与体会进行分析。

1 材料与仪器

1.1、试验材料与试剂：检测用麻叶千里光产地我国长白山地区，经由实验室鉴定为麻叶千里光。试剂主要包括磷酸、甲醇、染料木素标准品等（生产公司：上海融禾医药科技有限公司）。

1.2、试验仪器与设备：微型植物粉碎机（FZ102型）、紫外分光光度计（UV-1810 型）、微波- 超声波协同萃取仪（CW-2000 型）、电热恒温干燥箱（GZX-DH·600-Ⅱ型）、数显式电热恒温水浴锅、电子天平等。

2、试验方法

2.1、样品制备：将检验用麻叶千里光利用蒸馏水进行反复清洗，并置于干燥箱内干燥处理（60℃），再用粉碎机处理后装瓶。

2.2、异黄酮的提取：精密称定1.000g检验用样品，置于水浴锅，利用甲醇进行提取处理，并通过紫外光谱法进行异黄酮的测定，通过正交实验明确最优提取方案。依据索氏提取温度、索氏提取时间、料液比的设定，就对提取率的影响建立相应的正交表，见表1。

表1 提取条件因素及水平

2.3、异黄酮的测定：①标准溶液制备：精密称定染料木素标准品2.050mg，置入10ml容量瓶，加入适量甲醇获得浓度为0.205mg/ml的储备液，振荡均匀。②紫外光谱法：对照品溶液为精密吸取上步骤制备的储备液2.50ml，置入25ml容量瓶，甲醇定容。分别精密吸取对照品溶液2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，置入10ml容量瓶，甲醇稀释至刻度，振荡均匀。于258nm波长下测定绘图，并获得回归方程。结果显示染料木素于0.0042~0.0122mg之间与吸光度呈良好线性关系。精密称定1.00ml提取物，于250ml容量瓶内定容，进行吸光度测定，或获得检测样品中异黄酮含量。

2 结果

2.1、异黄酮的提取结果分析：在A1B2C2的条件下，异黄酮水平最高，即异黄酮最佳提取参数为索氏温度80℃，索氏提取时间5.0h，料液比为1:30g/ml。

表2 异黄酮的索氏提取正交实验结果分析

2.2、异黄酮的测定结果分析：精密称定6份检测样品各5.00g，于索氏最佳提取条件下，通过甲醇进行提取，提取液经由旋转蒸发后定容置入10ml容量瓶中，利用紫外分光光度计进行异黄酮含量的测定，具体结果见表3。

表2 紫外分光光度计测定结果分析

3 讨论

黄酮类具有低毒、高效抗氧化等特点，是麻叶千里光中的主要化合物之一，药理活性广泛，近年来对其的研究不断深入，已证实黄酮类化合物除却具有抗病毒、抗炎、护肝、抗变态反应等效果外，在抗HIV、抗肿瘤等方面的药理作用也较为显著^[6-7]。麻叶千里光中异黄酮的提取可采用甲醇、乙醇等作为提取溶剂，本研究采用甲醇，其原因为甲醇提取率要优于乙醇。异黄酮的提取采用了索氏提取法，最佳提取参数为索氏温度80℃，索氏提取时间5.0h，料液比为1:30g/ml。而微波－超声波协同提取法在异黄酮提取中也有采用，其具体应用效果还有待进一步研究分析。异黄酮含量的测定采用了紫外分光光度法，具有检测方法便捷、结果准确等优势。

综上所述，麻叶千里光中异黄酮的提取和测定，可分别采用索氏提取法、紫外分光光度法，检测结果较为满意，但因本研究缺乏不同方法的对比分析，故而还需要在未来工作中深入研究。

参考文献

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[4]何忠梅,宗颖,孙佳明,等.千里光中几种黄酮和酚酸类成分的分离与鉴定[J].应用化学,2010, 27(12):1486-1488.

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