miRNA-21对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及作用机制的研究

(整期优先)网络出版时间:2020-09-10
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摘要目的探讨微小RNA-21(miR-21)对肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭能力的影响,并对相应的机制进行探究。方法构建空白组、miR-21高表达质粒空载对照组、miR-21高表达组、miR-21敲减质粒空载对照组、miR-21敲减组。采用荧光定量qRT-PCR检测细胞中miR-21 mRNA表达情况,蛋白质印迹法分析相关通路蛋白表达水平,确定miR-21转染效率。CCK-8试剂盒检测细胞增殖和生长能力。采用Transwell小室模型检测miR-21上调和下调以对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡情况。结果荧光定量qRT-PCR提示,miR-21高表达组miR-21表达水平显著高于空白组和miR-21高表达质粒空载对照组(t=48.56、45.25,P值均<0.01)。CCK-8检测显示miR-21转染48 h及72 h,miR-21高表达组细胞增殖均较其他组强(F=43.061、74.862,P值均<0.01)。Transwell迁移和侵袭实验提示,miR-21高表达组细胞迁移和侯袭能力均较空白组和miR-21高表达质粒空载对照组强(P值均<0.05)。结论miRNA-21促进肺癌细胞增殖并抑制肺癌细胞凋亡。miRNA-21对人肺癌细胞株的增殖、侵袭、转移能力的影响与AKT/P-AKT/Cleaved-Caspsae 3/MMP-2/MMP-9细胞信号通路有关。