SIRT6对老年人皮肤成纤维细胞迁移能力和增殖能力的影响及机制研究

(整期优先)网络出版时间:2020-08-10
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摘要目的探讨沉默信息调节因子2同源类似物6(SIRT6)对老年人皮肤成纤维细胞迁移能力和增殖能力的影响及机制。方法在山西医科大学第二附属医院泌尿外科取不同年龄患者包皮环切术切取的包皮组织,其中老年组8例,青年组8例。用胶原酶消化法提取人皮肤成纤维细胞,Western印迹法检测不同年龄组人皮肤成纤维细胞中SIRT6和磷酸化p65蛋白(p-p65)的表达,划痕实验检测细胞迁移活性,CCK8法检测细胞增殖活性。将老年组皮肤成纤维细胞分成两组,一组用SIRT6慢病毒感染使其SIRT6表达增高作为SIRT6组,另一组以空病毒感染作为对照组,用上述方法分别检测SIRT6组和对照组细胞迁移活性、增殖活性和p-p65蛋白表达水平,实时PCR检测两组Ⅰ型和Ⅲ胶原蛋白、整合素亚基α3、α5和β1 mRNA的表达。采用GraphPad Prism 5软件进行统计学分析,t检验分析两组之间数据的差异。结果老年组皮肤成纤维细胞SIRT6表达水平(0.434 ± 0.179)显著低于青年组(1.000 ± 0.067,t = 3.040,P = 0.012),p-p65表达水平(1.694 ± 0.148)显著高于青年组(1.000 ± 0.093,t = 2.949,P = 0.015),迁移率(43.81% ± 18.84%)显著低于青年组(94.63% ± 12.32%,t = 5.903,P = 0.003),24、48 h增殖活性也较青年组显著下降(P < 0.05)。老年组成纤维细胞过表达SIRT6后,与对照组相比,p-p65表达显著下降(P < 0.05),迁移能力和增殖能力显著提高(P < 0.05),同时Ⅲ胶原蛋白和整合素亚基α3、α5和β1的mRNA表达水平显著升高(P < 0.05)。结论SIRT6可提高老年人成纤维细胞的迁移能力和增殖能力,其机制可能与抑制NF-κB通路有关。