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摘要:转基因技术的应用使得我国的农产品生产产量得到了大幅度提升,同时也降低了生产成本,提高了农作物的抗病害能力,对农作物的储藏和食用安全性作出了极大的贡献,另外它还打破了四季供应的自然规律,使人们在任何季节都能够享受到来自不同季节种植的果蔬食物,大大满足了人们的味蕾享受。鉴于转基因技术和转基因食品的诸多应用优势,本文将在转基因食品检测方法的基础上,对转基因食品的检测方法以及实际应用展开深入研究,以供相关人士参考。
关键词:转基因技术;转基因食品;检测方法;方法研究
近年来,转基因食品在人们生产生活中的存在地位直线升高,随着人们对转基因食品的需求越来越大,使得科研人员加大了对转基因食品检测方法的研究和开发。科研人员以外源DNA和蛋白质两大生物分子着手。应用ELISA技术和生物芯片技术以及PCR技术对当前转基因食品常用的检测方法进行了全面的对比和分析,并通过不断的实践应用,对不同检测方法的应用优缺点进行了深入研究分析,对在后期的转基因食品的检测方法的选择上做出了极大的贡献。
1转基因食品检测方法的类型分析
由于检测对象的不同,在检测方法的选用上也有所不同,我们大致可以将其划分为外源基因代谢产物检测方法、蛋白质检测方法以及核酸检测方法,自重外源基因代谢检测方法由于检测效果的精准性和检测效率存在较大问题,因此现阶段并没有被普遍使用[1]。蛋白质检测方法还可以划分为化学分析方法、凝胶电泳分析方法、酶联免疫分析方法和免疫层试纸条分析方法等。核酸检测方法又可以划分为测序、凝胶电泳和巢式PCR分析方法。从检测原理的角度划分,可以将其划分为外源基因测定技术和外源蛋白质测定技术两大类。其中外源基因测定技术主要针对的是对各类PCR方法的应用,如插入功能基因DNA的PCR检测方法、核算杂交方法和巢式PCR检测方法等。而外源蛋白质测定方法则是以检测免疫反应为基础,检测方法通常包括蛋白质印迹法、酶联免疫吸附法、试纸条法等。从检测对象的检测数量的角度分析,可以将转基因食品的检测方法分为组合检测方法、新型检测方法和常规检测方法等几方面。组合检测方法是通过将生物芯片技术与多重PCR技术进行结合的检测方法,同时还有多重PCR激光诱导荧光检测方法、毛细管电泳检测方法等。新型检测方法主要包括基因芯片技术、PCR-ELISA检测技术、半巢式、巢式PCR检测技术以及荧光定量PCR技术等。
2转基因食品检测方法的应用优势比较
在转基因食品的众多检测方法中,它们各有优势和劣势。如在ELISA法、基因芯片法和PCR法这三种检测方法的优势对比来说。PCR检测方法的检测依据为DNA,因为在各生物系统中都存在核酸物质,因此它受检测材料限制的几率较小,在食品加工检测中被广泛应用,且该检测方法的灵敏性与ELISA法相比高达百倍。而ELISA检测法虽然成本较低,但是所耗费的时间和精力却远远超过检测结果,且由于蛋白质在加热过程中容易发生变形,因此在检测精准度方面也具有较大问题。两者相比,PCR检测技术的应用优势更加显著,在食品安全检测中的应用也较为普遍。DNA芯片检测技术出现于上世纪80年代末期,其检测通量高、自动性能强,且微型化强,对大量的被检测物体能够在1次检测中就能够得到理想的检测效果,检测效率显著。但是该检测方法的应用成本较高,且操作复杂,全面普及的可能性较小。三者相比而言,PCR检测技术的性价比更加适合广泛推广应用。
3转基因食品检测方法PCR技术的具体应用
3.1PCR检测方法的应用
PCR检测技术能够有效监测多种转基因农作物,如RR大豆、Zeneca番茄、DLL25玉米、GA21玉米等。该方法作为市面上对转基因食品进行检测的主要方法在应用过程中具有加大优势[2]。如在RR大豆基因的检测上,由于该检测对象的基因中含有CP4-EPSPS抗除草剂基因、CaMV35S启动子、NOS终止子等成分,因此在对被检测大豆是否是转基因食品时,可以以此为检测标准,有则是,没有则不是转基因食品。除此之外,在水稻、玉米以及加工成品或者半成品的检测方面该方法同样适用,当在以上被检测物体中检测出CaMV35S启动子、NOS终止子时,就说明该食品为转基因食品。
3.2多重PCR检测方法
在使用多种PCR检测方法对转基因油菜、大豆以及玉米进行检测时,需要结合具有高灵敏性的凝胶电泳检测方法进行共同检验,以此来提高检测结果的精准性、灵敏性和有效性,且凝胶电泳法的操作方式简单,检测效率和检测结果都更加完善。在对加工后的转基因食品或者未加工的原材料进行检测时,使用多重PCR检测方法能够使洁厕精度和检测灵敏度得到有效提高。有学者采用该方法对转基因食品(大豆)中的基因序列进行了同时检测,为了将假阴性可能排出,在评价PCR反应效率时,他们将大豆的外源凝集素基因和肌动蛋白基因作为参照。检测结果表明,当转基因大豆的含量在0.15%时,其检测结果的精准度和可靠性依然很高,这说明该检测方法的灵敏性较为显著。
3.3PCR-ELISA检测方法
有学者在大豆DNA的提取以及转基因玉米的优化方面采用了PCR-ELISA检测方法,他们针对转基因食品中CaNV35S启动子、NOS终止子的排列特点,设计出特异性的引物与探针,并建立了大豆外源基因与转基因玉米的快速检测方法,并取得了良好的应用结果。试验表明,PCR-ELISA检测方法的操作简单、测定结果精准度高且灵敏性和特异性显著,在定量或定性的多种转基因食品的检测中均可使用。
结语
随着转基因食品种类的增多,对于转基因食品的检测方法也相应增多,而不同的检测方法对于转基因食品的检测来说具有不同的优势特点,但同时也具有较大差异。基于此,在转基因食品的检测中,相关人员应该根据被检测物的不同科学合理的选择检测方法,以此来提高转基因食品检测的精准性和可靠性,并不断的使检测方法得到完善和创新,为转基因食品的检测提供有力的技术支持。
参考文献
[1]韩玥,郭铮蕾,李伟, 等.食品转基因定性检测的方法验证研究[J].检验检疫学刊,2017,27(1):5-9.
[2]石盼盼,王璐,郝丽花, 等.大豆及其加工食品转基因成分检测技术研究进展[J].食品安全质量检测学报,2019,10(10):3166-3172.