铁岭卫生职业学院 辽宁铁岭 112000
摘要:目的:探讨雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠功能的影响。方法:将SPF级昆明种雌性小鼠200只随机分为5个实验组,每个实验组再随机分为低、中、高剂量(0.1、0.2、0.6g/kg bw)组及对照组。连续灌胃雨生红球藻紫苏籽复合油30天,分别进行迟发型变态反应实验、抗体生成细胞数、小鼠碳廓清实验、NK细胞活性实验。结果:0.2、0.6g/kg bw剂量组能增加小鼠迟发型变态反应能力,能增加小鼠NK细胞活性,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);0.2g/kg bw剂量能增加小鼠抗体生成细胞数,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);3个剂量组对小鼠体重、脾脏/体重比重、胸腺/体重比值、碳廓清吞噬能力均无明显影响(P>0.05)。结论:雨生红球藻紫苏籽复合油具有增强免疫力功能的作用。
[关键词]雨生红球藻油;紫苏籽油;免疫;小鼠
雨生红球藻是一种单细胞淡水绿藻,在分类学上属于绿藻门、绿藻纲、团藻目、红球藻科、红球藻属。雨生红球藻中虾青素的积累量可高达细胞干质量的5%,是其他生物虾青素合成积累量的一到几个数量级。虾青素属酮式类胡萝卜素,是一种帖烯类不饱和化合物[1]。通过整体实验观察,他们还发现虾青素等类胡萝素均显著促进胸腺依赖抗原(TD-Ag)刺激时的抗体产生,分泌IgM和IgG的细胞数增加[2]。紫苏籽含油率为 40%~50% ,90%以上为不饱和脂肪酸,其中ω-3长链多不饱和脂肪酸的前提物质α-亚麻酸占55%~65%。紫苏籽油具有降血压、降低胆固醇、促进视网膜发育、提高记忆力,增强免疫力、延缓衰老等功效。本实验研究二者复合物对免疫的影响。
1 材料与方法
样品 受试样品配制:以雨生红球藻油:紫苏籽油为1:5配制。
1.2 动物 SPF级昆明种雌性小鼠,体重为19.0-21.9g。
1.3仪器 动物台秤;分析天平;离心机;氧化碳培养箱;离心机;恒温水浴锅;酶标仪、显微镜等
1.4动物分组与给药方法 试验动物随机分为5组,每组40只,分别进行小鼠碳廓清试验;迟发型变态反应试验;脏体比值、抗体生成细胞数测定;ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活测定。5组再随机分为低、中、高剂量组(0.1、0.2、0.6g/kg bw)和对照组,每组10只。灌胃体积0.02ml/g BW,对照组给予等体积大豆油,连续灌胃30天。
2 方法
2.1 本实验以0.1、0.2、0.6g/kg bw三个剂量经口给予小鼠一个月,进行小鼠细胞免疫功能、体液免疫、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性测定。方法参照《保健食品检验与评价技术规范》2003版。
2.2 统计学方法 先对数据进行方差齐性检验,若方差齐,采用单因素方差分析进行总体比较,发现差异再用Dunnett-t法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对原始数据进行适当的变量转换,满足方差齐性检验后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到方差齐性,则改用秩和检验,发现总体比较有差异,则采用不要求方差齐性的Tamhane’s T2检验进行两两比较,检验水准为α=0.05。
3 结果
3.1 雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠体重的影响 5组试验小组各剂量组试验初期、试验中期、试验末体重及实验期间体重增长与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
3.2 雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响 雨生红球藻紫苏籽复合油各剂量组对小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1
表1小鼠脏器/体重比值测定结果
组别 | 动物数 (只) | 胸腺/体重 (mg/g) | 脾脏/体重 (mg/g) |
对照组 | 10 | 2.09±0.28 | 5.14±1.18 |
低剂量组 | 10 | 2.12±0.55 | 5.26±1.47 |
中剂量组 | 10 | 2.16±0.39 | 6.02±1.25 |
高剂量组 | 10 | 2.20±0.35 | 5.66±1.14 |
3.3雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
雨生红球藻紫苏籽复合油低剂量组小鼠足跖肿胀度对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。雨生红球藻紫苏籽复合油中、高剂量组小鼠足跖肿胀度大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2
表2雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
组别 | 动物数(只) | 注射后24h足跖肿胀度 |
对照组 | 10 | 0.532±0.064 |
低剂量组 | 10 | 0.554±0.060 |
中剂量组 | 10 | 0.686±0.078* |
高剂量组 | 10 | 0.691±0.092* |
注:*表示与对照组比较P<0.05
3.4雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠抗体生成细胞数的影响
雨生红球藻紫苏籽复合油低、高剂量组小鼠抗体生成细胞数,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。雨生红球藻紫苏籽复合油中剂量组小鼠溶血空斑数增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表3
表3 雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠抗体生成细胞数的影响
组别 | 动物数(只) | 溶血空斑数(脾细胞/106个) |
对照组 | 10 | 109±37 |
低剂量组 | 10 | 142±42 |
中剂量组 | 10 | 176±43* |
高剂量组 | 10 | 157±58 |
注:*表示与对照组比较P<0.05
3.5 雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠单核-巨噬细胞吞噬碳廓清的影响
雨生红球藻紫苏籽复合油各剂量组对小鼠碳廓清能力无明显影响,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表4
表4 雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠单核-巨噬细胞吞噬碳廓清的影响
组别 | 动物数(只) | 吞噬指数(a) |
对照组 | 10 | 5.28±1.63 |
低剂量组 | 10 | 5.50±1.59 |
中剂量组 | 10 | 5.66±1.48 |
高剂量组 | 10 | 5.78±1.35 |
3.6雨生红球藻紫苏籽复合油对小鼠NK细胞活性的影响
雨生红球藻紫苏籽复合油低剂量组小属NK细胞活性与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。雨生红球藻紫苏籽复合油中、高剂量组能增加NK细胞活性,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表5
表5 对小鼠NK细胞活性的影响
组别 | 动物数(只) | NK细胞活性 |
对照组 | 10 | 23.2±5.5 |
低剂量组 | 10 | 27.3±6.1 |
中剂量组 | 10 | 29.5±6.5* |
高剂量组 | 10 | 30.7±8.8* |
注:*表示与对照组比较,P<0.05.
结论
本实验显示,雨生红球藻紫苏籽复合油0.2、0.6g/kg bw剂量组能增加小鼠迟发型变态反应能力、增加小鼠NK细胞活性,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);0.2g/kg bw剂量能增加小鼠溶血空斑数,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。按照《保健食品检验与评价技术规范》2003版“增强免疫力功能”实验,可判断雨生红球藻紫苏籽复合油具有增强小鼠免疫作用。
参考文献
1.王菊芳,吴振强,梁世中.虾青素的生理功能及其应用.食品与发酵工业.
1999年11月,26(2):66-69
2.JyonouchiH.Zhang I, Gross M eta1. Nutr.Cancer.1994,21(1):47
3.许万乐 李会珍 张志军,等.紫苏籽油理化性质测定及脂肪酸组分分析.中国粮油学报.2013年12月,28(12):106-109