男宝胶囊中总氮量测定方法研究

男宝胶囊中总氮量测定方法研究

刘文苹1，2张振凌1赵永峰1吴小菲3

刘文苹1，2张振凌1赵永峰1吴小菲3

【摘要】目的对中药男宝胶囊中总氮含量进行测定，为控制中药男宝胶囊的质量标准提供依据。方法采用《中国药典》凯氏定氮法，以总氮量作为男宝胶囊的质量控制指标。结果男宝胶囊总氮量在18.86mg～23.31mg范围内,显良好的线性关系Y=0.802X+17.938（R2=0.99942)，RSD值为0.67%，总氮含量为20.739%。结论该方法稳定、可操作性强，可以为制定中药男宝胶囊中总氮量的限度标准提供依据。

【关键词】男宝胶囊；凯氏定氮法；总氮量；质量标准

Determinationoftotalnitrogencontentinnanbaocapsules.LiuWenping,2ZhangZhenling1ZhaoYongfeng1WuXiaofei3.1.HenanUniversityoftraditionalChinesemedicine,ZhengzhouHenan450008；2.BozhouAnhuifoodandDrugInspectionInstituteBozhouAnhui236800;3.BozhouChinesemedicinescienceandtechnologyschool,Anhui,Anhui236800,BozhouProvince)

【Abstract】ObjectivetototalnitrogencontentintraditionalChinesemedicineNanbaocapsulesweredetermined,asthestandardforqualitycontroloftraditionalChinesemedicineNanbaocapsuleprovidesthebasis.Methodsusingthe"China"PharmacopoeiaoftheKjeldahlmethodtototalnitrogenasthequalitycontrolindexofNanbaocapsules.ResultsNanbaocapsules;totalnitrogencontentinthe18.86mgto23.31mgrange,showedgoodlinearrelationshipY=0.802X+17.938R2=0.99942andRSDvalues0.67%,totalnitrogencontent20.739%.Conclusionthemethodisstable,strongoperability,canprovideabasisforthedevelopmentoftraditionalChinesemedicineNanbaocapsulesintotalnitrogenlimitstandard.

【Keywords】Nanbaocapsules;Kjeldahlmethod;totalnitrogen;qualitystandard.

中药男宝胶囊，是临床上常用的中成药。主要适用于肾阳虚的患者，治疗效果显著，副作用小，且使用方便，深得消费者的认可，市场需求量较大。它的成分是由由海马、驴肾、枸杞子、阿胶、黄芪、当归、肉桂、熟地黄、茯苓、牡丹皮、狗肾、仙茅、人参、杜仲、白术等名贵中药组成。市场上有六十二家医药企业生产中药男宝胶囊，生产量大。但是迄今为止，中药男宝胶囊的质量标准仅在《卫生部药品标准中药成方制剂》第十九册[1]中有收载，标准中除性状及胶囊剂的常规检查外，只有当归的薄层色谱鉴别，没有涉及总氮量的检测，不能较好地控制质量。为了更好的控制质量，选择对该中药中的总氮量为控制指标，并进行了方法学的考察，为控制男宝胶囊的质量标准提供依据。

仪器、试剂与试药

1．仪器

万分之一电子天平（北京赛多利斯天平有限公司，max210g，d0.1mg)，十万分之一电子天平（北京赛多利斯天平有限公司，max13g)，KQ-500DV型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），ATN-300全自动定氮仪（上海华睿仪器有限公司），KDA-04C消化炉（上海华睿仪器有限公司），500mL凯氏蒸馏瓶，锥形瓶，烧杯，酸式滴定管，容量瓶等。

2．试剂与试药

盐酸（分析纯，烟台市双双化工有限公司），硫酸（分析纯，开封市方晶化学试剂有限公司），氢氧化钠(分析纯、天津市瑞金特化学品有限公司），硼酸（分析纯，天津市凯通化学试剂有限公司），硫酸铜（分析纯，天津市四通化工厂），硫酸钾（分析纯，天津市永大化学试剂开发中心），甲基红（崇明县裕安人民公社十六大队综合厂），溴甲酚绿（分析纯，天津市凯通化学试剂有限公司）。中药男宝胶囊（安徽省亳州市华佗国药厂，批号：20141220，20141221,20141222）。

3．试剂的配制

3.10.1mol/L盐酸标准液：将8.4ml盐酸，注入1000ml蒸馏水中，用碳酸钠法标定盐酸。

3.240%氢氧化钠溶液(m/v)：取200g氢氧化钠溶于蒸馏水中配制成500ml的水溶液。

3.32%硼酸溶液(m/v)：称取10g硼酸，溶于蒸馏水中配成500ml水溶液.

3.4混合指示剂：将甲基红溶于乙醇配成0.1%的乙醇溶液，溴甲酚绿溶于乙醇配成0.5%的乙醇溶液，二种溶液等体积混合，阴凉处保存，备用。

实验方法

1．样品的消化

将消化管分别放入消化架的各个孔内，精密称取中药男宝胶囊内容物0.5g，然后将称量纸同内容物一起无损的置入已洗涤烘干的消化管中（不含有氮元素），然后往消化管中依次加入硫酸钾粉末5g和硫酸铜粉末0.25g，用移液管取浓硫酸10ml，沿消化管管壁缓缓加入消化管内。然后放置到消化炉上，开启抽气三通上连接的自来水龙头，使抽气三通处于吸气状态，控制好水流的速度（保证消化管内消化后的产生的气体不向外逸出）。接通电源，在加热初始阶段温度调至200摄氏度左右，需注意观测，防止试样因太过沸腾而导致液体到处飞溅。等待消化稳定后，再升温至480摄氏度。消化结束后（消化液呈澄清透明状），关闭消化装置的电源开关，将消化管架移至冷却架上冷却。然后准备进行下一步的蒸馏操作。空白对照放入同等规格的称量纸和同样量的试剂，同上述方法进行消化[2]。

2．消化液蒸馏以及馏出液吸收

连接好全自动凯氏定氮仪，规定处加入所要求的试剂，开启电源后设定好所需参数，将冷却好的消化管放置到规定的位置开始蒸馏操作。收集蒸馏液，蒸馏结束后蒸馏液不呈碱性，依次放入各个消化管重复上述操作过程。然后关闭电源，等待下一步的滴定。

3．滴定

在蒸馏液中加入事先配好的指示剂，首先记录滴定管的起始刻度用标定后的盐酸溶液进行滴定接收瓶内的溶液，当接收瓶内的溶液由绿色变为淡紫色时，结束滴定，记下滴定后滴定管的刻度。用同样的滴定方法滴定下一个接收瓶并记录下数据[3]。

4．计算

滴定结束计算蛋白质含量(%)=(V2-V1)×C×K×0.014/W×100%

公式中：

作者单位：1236800

V1———滴定空白对照品时消耗盐酸标准溶液的体积(mL)

V2———滴定样品时消耗盐酸标准溶液的体积(mL)

K———氮换算成粗蛋白质的系数

C———标准酸溶液的摩尔浓度（mol/L）

W———称取的药品重量(g)

0.014———氮的毫克当量数

实验结果

1．线性关系考察

精密称取渗漉提取干燥物作为参照物测定总含量，以参照物取样量为横坐标（X），以总氮量为纵坐标（Y）绘制标准曲线，得回归方程Y=0.802X+17.938，R2=0.99942，结果见图1。

图1线性关系考察

结果表明，总氮量在18.86mg～23.31mg范围内，标准曲线线性关系良好，符合测定的要求。

2．取样量考察

取不同重量的样品，按上述总氮量测定方法依次测定不同剂量样品中的总氮量，当取样量大约为1.0g时，在标准曲线范围内，且消耗滴定液的量也较为合适。

3．重复性实验

对批号为20141220的同一批样品，按上述总氮量测定方法独立进行6次测定，计算其相对标准偏差，结果平均值为20.756%，RSD为0.67%，表明方法重复性良好，结果见表1。

讨论与小结

1．由于处方中由鹿茸、海马、阿胶、驴肾、狗肾等大量贵重动物类中药材组成，含有多种包括蛋白质在内的含氮类成分，质量标准不容易控制，制为了控制其质量，建立定性以及含量测定限度标准，保证中药临床用药的安全有效，故通过测定总氮含量，为其药品标准制定提供依据，以便更有效地控制药品的质量。

2．本实验采用凯氏定氮法对男宝胶囊进行总氮量测定，方便便捷简单，稳定性好，为制定男宝胶囊的质量标准提供可靠的依据，对控制男宝胶囊的质量具有一定的意义。

3．本实验仅做了对中药男宝胶囊总氮量的测定，没有对其他成分进行分析，有待进一步的深入研究。

参考文献

[1]卫生部药典委员会?《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册[S]?1998：85.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].2010年版.北京:中国医药科技出版社，2010:附录ⅨL氮测定法.

[3]杨映霞，仇晶，孙玉滨等.鹿哈胶囊中总氮量测定方法研究[J].特产研究,2015,33(2):49-51.