(黑龙江省哈尔滨市双城区人民医院第二住院部黑龙江哈尔滨150100)
【摘要】目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者的LE细胞和抗核抗体的检测的临床价值。方法:选取我院2017年1月—2018年6月期间收治的系统性红斑狼疮患者50例,对患者LE细胞及抗核抗体检测,对检测结果进行分析。结果:系统性红斑狼疮(SLE)患者经检测LE细胞阳性26例,阳性率52.0%;抗核抗体(ANA)的阳性46例,阳性率为92.0%;抗双链脱氧核糖核酸(DS-DNA)抗体的阳性37例,阳性率74.0%。结论:LE细胞检查已成为一重要辅助诊断方法,ANA在系统性红斑狼疮中的敏感性较高,特异性不高,DS-DNA抗体为诊断系统性红斑狼疮的特异性抗体,以提高系统性红斑狼疮的诊断准确性。
【关键词】系统性红斑狼疮;LE细胞;抗核抗体;抗双链脱氧核糖核酸
【中图分类号】R593.241【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2019)04-0038-02
系统性红斑狼疮(SLE)多见于青壮年女性,是自身免疫结缔组织病,是自身免疫介导的,以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病[1]。系统性红斑狼疮患者查找LE细胞和自身抗体,探讨系统性红斑狼疮的临床诊断价值。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取我院2017年1月—2018年6月期间收治的系统性红斑狼疮患者50例,期中男10例,女40例,年龄10~76岁,平均36.5±2.5岁。
1.2方法
LE细胞采用毛细玻管法,手指采血,让其自然流入用肝素预先处理过的毛细玻管内(大小为75mm×1mm~2mm)。用不同颜色的胶泥将玻管一端塞上,作好每个标本的标记。离心,使白细胞集中。用带钩的细钢丝放入玻管内,使达白细胞层,转动几次,破坏部分白细胞,再上下移动几次,使破坏的白细胞核与血浆中的LE因子充分混合。室温中放置30min,或37℃15min。离心,浓集白细胞和LE细胞。在白细胞层稍下一点将毛细玻管锯一小槽,折断,将白细胞层滴加在玻片上,以垂直方向盖上另一张玻片,抽动其中一张玻片,则在被抽动的那张玻片上形成白细胞层[2]。
ANA采用间接荧光法,自冰箱中取出抗原片,用记号笔画圈标记。待测血清、阳性血清、阴性血清分别用PBS作l:10稀释,滴加于抗原片上,放湿盒内,37℃温育30min。取出,用流水冲去未结合的血清,置PBS(1、2、3缸)中浸洗,每缸5min,吹干。滴加稀释的FITC标记的抗人IgG抗体,置湿盒内,37℃温育30min。同步浸洗,吹干。加缓冲甘油封片,用荧光显微镜检查。
DS-DNA抗体检测采用免疫印迹法可以进一步地确认阳性结果或鉴别其特异性。实验原理是将经电泳分离的抗原提取物转印到硝基纤维膜上(抗原中的不同组分将按分子量大小在膜上依次排开),加入已经稀释的待测血清,再加碱性磷酸酶标记的抗人抗体,最后加入碱性磷酸酶底物[3]。若标本中含待测的特异性抗体,相应的抗原条带将显色。
2.结果
系统性细斑狼疮患者LE细胞及抗核抗体检测阳性率情况,LE细胞阳性26例,阳性率52.0%;抗核抗体(ANA)的阳性46例,阳性率为92.0%;抗双链脱氧核糖核酸(DS-DNA)抗体的阳性37例,阳性率74.0%。
3.讨论
系统性红斑狼疮(SLE)多见于青壮年女性,是自身免疫结缔组织病,近年来研究较多。本病临床表现较复杂,自从发现红斑狼疮细胞以来,LE细胞检查已成为一重要辅助诊断方法。系统性红斑狼疮病人,LE细胞阳性率一般为70%~90%,对该病的诊断具有一定意义。通常在活动期容易找到,在缓解期不易找到,使用激素后往往消失,病情严重者,在血液、骨髓、胸腹水直接涂片中亦可找到LE细胞。LE细胞的形成为一种抗核抗体的免疫反应,除SLE外,其他自身免疫性疾病,如风湿热、类风湿性关节炎、硬皮病等亦可偶见LE细胞,因次,发现LE细胞,尚须结合临床表现及抗核抗体的检查等,才能确诊为SLE。另外,为找到细胞,并不能否定红斑狼疮的诊断,应进一步作其他有关免疫学检查。
抗核抗体(ANA)是指真核细胞的核的不同成分,作为抗原所产生的各种自身抗体的总称,是自身免疫性疾病最常出现的一种抗体,特别是系统性红斑狼疮,阳性率更高,因此常作为辅助诊断之一。抗核抗体对系统性红斑狼疮的诊断有帮助,但对预后和疗效观察的意义观点不尽一致[4]。一般认为抗核抗体在狼疮活动期阳性率和滴度均增高,在缓解期阳性率和滴度均减低。间接免疫荧光技术是检测ANA最常用的方法。该方法操作简便,敏感,且可定位;但标本不能永久保存,荧光有自然消退现象,须及时观察;同时有非特异性干扰。
系统性红斑狼疮活动期病人几乎都有抗dsDNA,被认为是系统性红斑狼疮的标志性抗体。其滴度一般与系统性红斑狼斑的活动度相平行,滴度升高可先于临床加重病人,常有肾脏损害,多数伴有补体水平下降,抗dsDNA抗体水平升高也可先于肾功能恶化,经有效治疗,抗dsDNA滴度下降,补体水平上升。抗ds-DNA对系统性红斑狼疮来说,几乎是特征性的,其增高的程度与疾病的活动相关。可以用来作为系统性红斑狼疮诊断和疗效观察的一项指标。
本研究中,系统性细斑狼疮患者LE细胞阳性率52.0%;抗核抗体(ANA)阳性率为92.0%;抗双链脱氧核糖核酸(DS-DNA)抗体的阳性率74.0%。对系统性细斑狼疮患者的应用LE细胞和抗核抗体,进行临床判定,提高临床诊断率。
【参考文献】
[1]石平序,张继菊,尉春成.LE细胞检验的形态特点及临床意义[J].华夏医学,2001,14(4):449-450.
[2]李天玲,吴惠联,王惠英.系统性红斑狼疮(SLE)患者的抗核抗体(ANA)测定[J].山东医药,1978(4).
[3]储红颍,杨桂斌,王建华,等.系统性红斑狼疮抗核抗体和抗核抗体谱联合检测及其临床意义[J].国际检验医学杂志,2014(15):2042-2044.
[4]华红,胡海波,李静.抗核抗体与抗核抗体谱联合检测在系统性红斑狼疮中的应用价值[J].中国医药指南,2017,15(11):149-150.