家兔脑梗塞模型制作中股动脉穿刺系统改良的探讨

家兔脑梗塞模型制作中股动脉穿刺系统改良的探讨

朱明新1王连峰2张中华3

朱明新1王连峰2张中华3

张家界市人民医院

摘要：目的：应用改良的穿刺系统穿刺家兔股动脉制作急性脑梗塞模型，旨在提高制作过程中股动脉穿刺的成功率。方法：选择成年健康的家兔40只，随机分为两组，A组（实验组）20只，B组（对照组）20只。A组应用改良后的24G静脉留置套管针，采用seldinger法穿刺股动脉，超选择性插管至右侧颈内动脉，经微导管缓慢注入预制自体血栓栓塞颈内动脉制成急性脑梗塞模型。B组切开暴露股动脉18G穿刺针穿刺，引入微导管插管至右侧颈内动脉，与A组同样的办法栓塞右侧颈内动脉。结果：A组1只股动脉穿刺失败，19只股动脉穿刺并右侧颈内动脉均栓塞成功，成功率为95%。B组14只股动脉穿刺失败，6只股动脉穿刺成功并顺利栓塞右侧颈内动脉，穿刺部位渗血均较严重，造模成功率为30%。两组造模成功率统计学差异有显著性。结论：改良穿刺系统穿刺家兔股动脉制作急性脑梗塞模型，具有操作简单、快捷、成功率高、出血少的特点，是一种符合实际应用的技术。

关键词：Seldinger法；股动脉；脑梗塞；动物模型

Abstract：Objective：Applicationofimprovedrabbitfemoralarterypuncturesystempuncturemakeacutecerebralinfarctionmodel，inordertoimprovethesuccessrateoffemoralarterypunctureinproduceprocess.Methods：40healthyadultrabbitswererandomlypidedintotwogroups，groupA（experimentalgroup）20rabbits，groupB（controlgroup）20rabbits.IngroupA，usingamodified24Gintravenouscathetertubetogainafemoralarteryaccessinseldingermethods，super-selectivecatheterizationwasplacedintotherightcarotidartery，theembolismthatthroughmicrocatheterslowlyinjectingthepre-autologousthrombosisintotherightcarotidarterywasusedastheacutecerebralinfarctionmodels.IngroupB，Incisiontheexposedfemoralartery，18Gneedlepuncture，themicrocatheterintotherightinternalcarotidartery，usingthesamewayofgroupAtomaketheembolismofrightinternalcarotidartery.Results：1rabbitingroupAfemoralarterypuncturefailed，19rabbitsfemoralarteryandrightinternalcarotidarteryembolismsuccessfully，thesuccessrateis95%.14rabbitsingroupBfemoralarterypuncturefailure，6rabbitsfemoralarterypuncturesuccessfulandembolismofrightinternalcarotidartery，puncturesitebleedseriously；thesuccessrateofthemodelis30%.Themodelingsuccessrateoftwogroupswasstatisticallysignificantdifference.Conclusion：Improvedrabbitfemoralarterypuncturesystemmakeacutecerebralinfarctionmodel，withsimple，fast，highsuccessrate，lessbleedingcharacteristicsandisarealistictechnologyapplication.

Keywords：Seldingermethod；femoralartery；cerebralinfarction；animalmodel

1.前言

建立一种合适的动物急性脑梗塞模型，对于急性脑梗塞的病理机制探索及新疗法疗效的评价具有重要价值【1】。目前文献报道脑缺血模型广泛采用的是利用自体血栓【2、6、8、17】，栓塞颈内动脉制作动物模型【4、8】，主要用于研究梗塞后溶栓治疗的研究，动物模型各不一样，主要有大鼠、兔、狗制作大脑中动脉局灶性缺血（MCAO）模型，然而各种文献报道的制作方法不一【2、4、7-13】，我们依据文献报道的方法制作动物模型，发现制模成功率低、失血量大，实验动物死亡率高，针对这些问题，我们总结文献结合自己经验，选择并改良股动脉穿刺插管材料，股动脉穿刺成功率大幅提高，为制作理想的动物模型打下基础。现对实验过程中穿刺系统改良及成功率的报道如下。

2材料与方法

2.1健康成年家兔40只，体重2.0一3.2kg，雌雄不限，实验动物均来自市场随机采购。

2.2实验器材和药品实验所需器材及药品静脉切开手术器械，改良后的24G静脉留置套管针（附图1），1.7F/2.1F微导管及0.010微导丝，1ml、5ml及10ml注射器，腰穿针数根，兔固定支架（自制），75%乙醇，地西泮注射液，地塞米松注射液，碘海醇。数字减影血管造影（DSA）。

2.3动物模型制作

2.3.1栓塞剂的制备于兔耳缘静脉抽取血液5ml，用腰穿针吸取少量血液并保留在腰穿针管腔中，常温下放置24小时，使用时用空针或针芯推出，剪成大小约0.5mm碎块备用。

2.3.2术前准备与麻醉术前动物禁食、禁饮6小时，将家兔仰卧位固定于自制固定架上，采用复合静脉麻醉，经耳缘静脉缓慢注射地西泮2.5mg/kg，后用32%，乙醇（4ml/kg体重）在3min内从兔耳缘静脉缓慢注射进行麻醉【5】，并静脉静推1mg地塞米松。给药后观察角膜反射、肌肉松弛情况等麻醉程度指标，达到满意麻醉效果进行手术，术中根据动物苏醒情况追加乙醇，双侧腹股沟区备皮、消毒，铺巾后备用。

2.3.324G静脉留置套管针的改造，退出针芯，用钳子取出留置针后端的橡皮塞（见附图），消毒后备用。

2.3.4模型制作方法A组股动脉穿刺及模型制作方法家兔双侧腹股沟常规备皮、消毒，确定股动脉搏动最明显处，应用改良后的24G静脉留置套管针，采用seldinger法穿刺股动脉，穿刺成功后套管在针芯的支撑下，送入血管腔内，退出针芯，引入微导丝，必要时可利用5ml注射器针头作为微导丝导向，然后退出留置针套管，并引入微导管，超选择插管行全脑血管造影，了解双侧颈部及头部动脉走行及分支情况，排除血管异常情况，超选于右侧颈内动脉，经微导管缓慢注入预制自体血栓，栓塞右侧颈内动脉，并DSA造影确认。B组切开腹股沟区皮肤（对侧备用），暴露股动脉，直视下采用18G穿刺针直接穿刺股动脉，置入3F血管鞘【1-4】，在微导丝引导下插入微导管，采用A组同样的办法栓塞右侧颈内动脉。

2.4统计学方法

应用SPSS11.0软件系统，率的检验采用四格表的Fisher确切概率法检验，设定P﹤0.05为有统计学意义。

3结果

股动脉穿刺及栓塞结果A组1只股动脉穿刺失败，19只股动脉穿刺成功，并顺利栓塞右侧颈内动脉，模型制作成功率为95%，且失血量较少少于5ml。B组14只股动脉穿刺失败，6只股动脉穿刺成功，造模成功率为30%，失血量约10-15ml。两组股动脉穿刺成功率比较统计学差异有显著性（P﹤0.01）。

4讨论

急性脑梗塞动物模型的制作必须具备操作简单、快捷、成功率高、费用低廉的特点，其中股动脉穿刺是一大难点。目前诸多家兔实验均使用18G穿刺针经股动脉穿刺，置入3F或4F血管鞘【15】。本实验对兔股动脉穿刺系统的改良进行探讨及尝试，并建立急性脑梗塞动物模型，A组采用改良后的穿刺系统seldinger法穿刺，19只穿刺成功，其中1只股动脉多次穿刺均未能成功；B组采用切开皮肤、皮下组织显露股动脉，直视下穿刺，但发觉此穿刺法应用很困难，仅有6只穿刺成功并插管行右侧颈内动脉栓塞。家兔本身血管纤细，B组实验兔中采用18G穿刺针较粗大，反复发生血管穿破、难以止血、血肿形成的情况，穿刺成功的股动脉勉强置入3F血管鞘，再经血管鞘引入导管栓塞右侧颈内动脉，成功的6只实验兔，可能是体重较大，均在3kg以上的原因。文献报道18G穿刺针直视下经股动脉穿刺，置入3F血管鞘，但其选择实验兔体重在4至5.5kg【6】，比笔者选用的动物体重基本增加1倍左右，因市场难以购买到4至5.5kg体重家兔，重复其实验过程非常困难。与B组穿刺法相比较后，考虑到所选用家兔中体重较小，血管纤细，遂在A组动物中放弃置入血管鞘，采用改良后的24G静脉留置针行seldinger法穿刺股动脉，直接引入微导丝及微导管行右侧颈内动脉栓塞，13只一次性穿刺成功，4只同侧股动脉穿刺2次成功，2只多次穿刺右侧失败，但改穿左侧时成功，1只穿刺双侧股动脉均失败。预实验当中曾因穿刺方法的欠妥、失血、麻醉、血管刺激等因素导致多次失败，但在反复尝试，改良穿刺器材后，股动脉穿刺成功率逐步提高。所有穿刺插管成功的家兔均采用预制自体血栓栓塞成功，DSA造影证实。

介入手术行股动脉穿刺，韦日明、冯飞玲等报道【14】穿刺点基本选择在腹股沟韧带下方2cm以内，股动脉搏动明显的地方，在实际操作中常出现穿刺点周围血肿或皮下出血，分析其可能原因有：术者操作技术不熟练，穿透动脉壁；反复多次穿刺；穿刺点血管壁的损伤；术后压迫不当。本次实验穿刺点渗血A组较轻，全过程中股动脉穿刺点渗血为较少，纱布加压2分钟即可止血，股动脉周围无血肿形成。在B组实验中，穿刺点出血较严重，多在10-15ml左右。比较两组实验动物，最大的差别是穿刺针不一样，A组穿刺针细，穿刺过程中重复操作次数少，穿刺失败后止血容易，然而B组穿刺针粗，本来实验兔股动脉纤细，难以一次性成功，需要反复穿刺，这样对股动脉损伤大，止血不易。在预实验中行股动脉穿刺，常由于失血过多，导致实验动物死亡，可能原因是实验兔体重较小、血管纤细，另外穿刺针的选择也是一个重要因素，经过反复试验后，选用24G静脉留置针改良后穿刺股动脉，出血明显减少。

5结论

改良穿刺系统穿刺兔股动脉制作急性脑梗塞模型，具有操作简单、快捷、成功率高、出血少的特点，是一种符合实际应用的方法。

参考文献：

[1]张文雷等.兔肾动脉栓塞实验技术的研究[J].中国老年学杂志，2009，29（18）：20～21.

[2]何玉洁，吴清华等.一种介入技术制作的局灶性脑栓塞溶栓实验模型[J].临床放射学杂志，2006，25（9）：873～877.

[3]许卫国，谭国胜，彭秀斌，等.兔肝动脉插管技术的方法学及DSA表现[J].世界华人消化杂志，2009，17（25）：2612-2615.

[4]邓志敏，伍吉云，罗桂根.乙醇加安定对家兔全身麻醉的实验研究[J].四川动物，2007，26（3）：702-703.

[5]赵永生，赵峰，杨淑琴，等.急性脑梗塞的动物实验及临床应用研究[J].中国医学影像技术，2001，17（2）：125-127.

[6]WeiL，RovainenCM，WoolseyTA.Ministrokesinratbarrelcortex.stroke，1995，26：1459-1462.

[7]李雪丽，朱丹.脑缺血动物模型的研究进展[J].中央民族大学学报，2010，19（1）：23-26.

附图（Figure）

24G静脉留置针改良