胃癌组织中PD-L1蛋白的表达及其临床意义

胃癌组织中PD-L1蛋白的表达及其临床意义

黄魁陈洪李玉震

（1东南大学医学院江苏南京210009）

（2江苏省南京市六合区人民医院江苏南京211500）

【摘要】目的：探讨PD-L1蛋白在胃癌患者癌组织中具体表达情况及研究价值。方法：选择胃癌患者40例，均为我院2015年2月至2017年2月收治，设为观察组，应用胃癌根治术治疗，并对癌组织进行留取，制作石蜡标本；选择同期胃癌患者40例，设为对照组，取与肿瘤组织距离>5cm的癌旁组织，应用免疫组织化学染色技术，对两组病理组织中PD-L1的表达进行检测，就PL-1在胃癌中的表达特点及与病理特征间的关系展开探讨。结果：结合免疫组化研究结果，PD-L1阳性表达多见于细胞质、细胞膜，主要为胞膜处。PD-L1阳性表达率在观察组胃癌组织中为52.5%（21/40），其中7例为中度阳性表达，占17.5%；2例为强阳性表达，占5%。PD-L1阳性表达率在对照组癌旁组织中为22.5%（9/40），未检出阳性表达和强阳性表达的病例。观察组PD-L1阳性表达率明显高于对照组，具统计学差异（P<0.05）。在胃癌患者中，PD-L1蛋白同肿瘤细胞的浸润、分化程度具紧密相关性，差异有统计学意义（P>0.05）。结论：针对临床收治的胃癌患者，对其癌组织中PD-L1进行检测，结果示呈高表达显示，且其高表达同肿瘤细胞的侵润、分化程度等具密切相关性，可作为对胃癌发生侵袭和分化进行反映的指标，为临床治疗方案的制定提供有力参考依据。

【关键词】胃癌组织；PD-L1；表达；价值

【中图分类号】R735.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）36-0040-03

【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionandresearchvalueofPD-L1proteiningastriccancerpatients.MethodsFortypatientswithgastriccancerwereselected.AllofthemweretreatedinourhospitalfromFebruary2015toFebruary2017,andweretreatedasradicalgastrectomy.Gastriccancerpatientsweretreatedbyradicalgastrectomy.Paraffinspecimenswereobtainedfrompatientswithgastriccancer.40caseswereselectedasthecontrolgroup.TheexpressionofPD-L1inthetwogroupswasdetectedbyimmunohistochemicalstaining.TheexpressionofPL-1ingastriccancerwasdetectedbyimmunohistochemicalstainingCharacteristicsandpathologicalfeaturesoftherelationshipbetweentheexplored.ResultsAccordingtotheresultsofimmunohistochemistry,thepositiveexpressionofPD-L1wasmorecommoninthecytoplasm,thecellmembraneandthemaincellmembrane.ThepositiverateofPD-L1intheobservationgroupwas52.5%(21/40),ofwhich7casesweremoderatelypositive,accountingfor17.5%;2caseswerestronglypositive,accountingfor5%.ThepositiveexpressionrateofPD-L1incontrolgroupwas22.5%(9/40),andnopositiveorstrongpositiveexpressionwasdetected.ThepositiverateofPD-L1intheobservationgroupwassignificantlyhigherthanthatinthecontrolgroup,withstatisticaldifference(P<0.05).Inpatientswithgastriccancer,PD-L1proteinwascloselyrelatedtotheinfiltrationanddifferentiationoftumorcells,withstatisticalsignificance(P>0.05).ConclusionsPD-L1wasdetectedincancertissuesofpatientswithclinically-treatedgastriccancer.Theresultsshowedhighexpression,andthehighexpressionofPD-L1wascloselyrelatedtotheinvasionanddifferentiationoftumorcells,Occurrenceofinvasionanddifferentiationtoreflecttheindicatorsfortheclinicaltreatmentprogramtoprovideastrongreference.

【Keywords】Gastriccancer;PD-L1;Expression;Value

临床恶性肿瘤领域，胃癌为常见且严重危及患者生命安全的病理类型，其有极为复杂的病理机制，由多基因、多步骤共同参与，对临床病理特征展开分析，可为治疗方案的制定提供有力参考依据。程序性死亡配体1(PD-L1)在分子生物学层面属B7家族，也可将其称为B7-H1，可在T细胞膜上结合自身受体即程序性死亡受体1（PD-1）,对T细胞增殖和细胞因子的分泌发挥有效的负调节作用，进而为肿瘤细胞提供防护屏障，降低被免疫杀伤风险。临床已有多项研究证实PD-L1在多种恶性肿瘤类型中均呈高达，如食管癌、非小细胞肺癌竺，同病理、预后均具密切相关性[1-2]。本次研究针对所选胃癌病例，探讨PD-L1蛋白在胃癌组织中的表达情况，旨在为临床治疗提供参考依据。

1.资料与方法

1.1一般资料

选择胃癌患者40例，均为我院2015年2月至2017年2月收治，设为观察组，应用胃癌根治术治疗，并对癌组织进行留取，制作石蜡标本；选择同期胃癌患者40例，设为对照组，取与肿瘤组织距离>5cm的癌旁组组，待测。两组均自愿参与本次实验，依据美国癌症癌症联合委员会分期标准行TNM分期。

1.2方法

用10%甲醛对病理组织标本做有效的固定处理，在完成包埋操作后，行规格为4μm连续切片操作。依据此项目具体的实验流程，予以有效的脱蜡水化，在室温条件下，于3%过氧化氢中放置，安排10min的孵育操作，以将内源性过氧化物酶所具有的生物活性有效消除；应用PBS洗液予以清洗操作，共3次，单次用时为5min。后在柠檬酸缓冲液（pH=6）中有效放置，经微波加热，对抗原作合理、精确的修复，待其呈自然冷却状态。再取PBS洗液予以清洗操作，共3次，取免抗人PD-L1单克隆抗体滴加，于4℃条件下，安排孵育过夜；采用BPS洗液完成3次的冲洗操作，滴加二抗，于室温条件下，安排孵育20min；采用BPS洗液完成3次冲洗操作，用DAB显色，取实验用材料苏木素予以有效复染，后用1%氯水完成返蓝环节，在脱水后，于光镜下对组织特征展开细致的观察。

1.3观察指标

单个研究样本对10个高倍视野（×400）做精准选取，单个高倍视野对100个细胞予以有效计数。其中阳性染色为细胞呈棕色及黄色，对1000个细胞所呈现出的阳性细胞率进行统计。阴性染色：阳性细胞率经测定<10%；弱阳性染色：阳性细胞率经测定为10%～30%；中度阳性染色：阳性细胞率经测定为30%～60%；强阳性染色：阳性细胞率经测定>60%。两组相关操作均通过双盲法实施。

1.4统计学分析

涉及数据均输入spss19.0，组间PD-L1在胃癌组织的表达应用Wilcoxon秩和检验，其表达和病理间的关系行χ2检验，P<0.05具统计学差异。

2.结果

2.1胃癌组织中PD-L1表达情况结合免疫组化研究结果，PD-L1阳性表达多见于细胞质、细胞膜，主要为胞膜处。PD-L1阳性表达率在观察组胃癌组织中为52.5%（21/40），其中7例为中度阳性表达，占17.5%；2例为强阳性表达，占5%。PD-L1阳性表达率在对照组癌旁组织中为22.5%（9/40），未检出阳性表达和强阳性表达的病例。观察组PD-L1阳性表达率明显高于对照组，具统计学差异（P<0.05）。

2.2胃癌组织中PD-L1表达及与病理关系在胃癌患者中，PD-L1蛋白同肿瘤细胞的浸润、分化程度具紧密相关性，差异有统计学意义（P>0.05）。而与患者性别、年龄等个人基线资料及肿瘤所处位置、大小等无关，且相较I期、II期，III期、IV期有更高的PD-L1表达(P<0.05)。见表。

3.讨论

PD-L1在生物学中为一种较为典型的共刺激分子，在直肠癌、非小细胞肺癌、肺质母细胞瘤等多种类型的恶性肿瘤中均有表达。结合本次研究结果示，相较在对照组癌旁组织中的表达情况，PD-L1在观察组胃癌组织中居更高水平，提示恶性肿瘤的形成同PD-L1的表达存在一定相关性，在胃癌的病发、病情进展中可能发挥着较为重要的作用。进一步分析PD-L1同胃癌患者病理特征的关系，也对此结果有所证实。胃癌患者浸润和分化程度不同，在PD-L1阳性表达上也存在较大差异，而肿瘤所处的位置、大小及患者年龄、性别等基线资料同PD-L1阳性表达无明显关联，表明PD-L1可用于对胃癌的侵袭和分化进行反映。需引起重视的是，就临床分期而言，且相较I期、II期，III期、IV期有更高的PD-L1表达(P<0.05)。但因此次选取的样本量有限，无法排除非相关的可能，需临床展开深入的研究，予以更精确的论证[3-4]。

在肿瘤的发生和病程进展中，肿瘤微环境所起作用重大，当将PD-1/PD-L1信号有效阻断后，对肿瘤所具有的免疫微环境具有效的逆转作用，可使机体抗肿瘤免疫效率呈明显增强显示[5-6]。对PD-1/PD-L1信号通路特征展开分析，其含呈相互作用关系的3条性质不同的抑制型分支，有别与抗PD-1抗体，抗PD-L1抗体可将PD-L1蛋白同CD-80、PD-1的结合有效阻断，却不具备将PD-1同PD-L2的结合有效阻断的能力[7]。最新报道指出，MPDL3280A，属于靶向于PD-L1蛋白的一种抗体，在治疗转移性膀胱癌时，效果较为理想，可将肿瘤体积明显缩小，甚至可起到治愈成效[8-9]。

综上，针对临床收治的胃癌患者，对其癌组织中PD-L1进行检测，结果示呈高表达显示，且其高表达同肿瘤细胞的侵润、分化程度等具密切相关性，可作为对胃癌发生侵袭和分化进行反映的指标，为临床治疗方案的制定提供有力参考依据。

【参考文献】

[1]吴圣，邵婧怡，王芳，等.PD-L1和PD-1在胃癌组织中的表达及其临床意义[J].安徽医科大学学报，2015,50(6)：821-824.

[2]DengL,LiangH,BurnetteB,etal.Irradiationandanti-PL-L1treatmentsynergisticallypromoteantitumorimmunityinmice[J].TheJournalofclinicalinvestigation,2014,124(2):687.

[3]邵康，张晨星，赵莉，等.PD-1/PD-L1在系统性红斑狼疮患者外周血表达水平及其临床意义[J].现代免疫学，2014,34(05)：386-390.

[4]JohnLB,DevaudC,DuongCPM,etal.Anti-PD-1antibodytherapypotentlyenhancestheeradicationofestablishedtumorsbygene-modifiedTcells[J].ClinicalCancerResearch,2013,19(20):5636-5646.

[5]ShiSJ,WangLJ,WangGD,etal.B7-H1expressionisassociatedwithpoorprognosisincolorectalcarcinomaandregulatestheproliferationandinvastionofHCT116colorectalcancercells[J].PloSone,2013,8(10):e76012.

[6]张亚，彭成浩.免疫共刺激分子PD-1与PD-L1在乳腺癌中的表达及意义[J].医学综述，2015,22(24)：4547-4549＋17.

[7]韩奕文，徐蓉蔓，陈志红，等.胃癌细胞株及胃癌组织程序性死亡受体-1的表达[J].江苏大学学报（医学版），2016,26(5)：449-451.

[8]MuCY,HuangJA,ChenY,etal.HighexpressionofPD-L1inlungcancermaycontributetopoorprognosisandtumorcellsimmuneescapethroughsuppressingtumorinfiltratingdendriticcellsmaturation[J].MedOncol,2011,28(3):682-8.

[9]刘欣，陈龙.PD-L1和PL-1在胃癌组织中的表达及其临床意义[J].今日健康，2016,15(2)：3-4.