乳糜微粒血浆对仪器法测定HBG的影响及处理

乳糜微粒血浆对仪器法测定HBG的影响及处理

王康椿刘启波

王康椿刘启波

（广东省第二中医院检验科广东广州510095）

【摘要】目的：研究乳糜微粒血浆对全自动血液分析仪测定血红蛋白的影响并提出科学、简便的处理方法，为实验室准确测定血红蛋白、提高血常规结果准确性提供依据。材料与方法：收集2012年1月至2013年12月，2年间我院住院病人标本中肉眼可见脂浊的EDTAK2抗凝全血标本，并剔除有出血症状的患者，共计标本100份，分别对该原标本和经过离心（垂直离心机3000转/1分钟）处理后的乳糜微粒血浆，用BC-5300全自动血细胞分析仪手动全血模式测定HBG，得出相应数据；对上述每份标本的两次测定血红蛋白值利用计算公式计算，并得出校准后的HBG值和MCH值。（校准后的血红蛋白＝原标本血红蛋白值—[乳糜血浆测得的血红蛋白值/（1—原标本HCT值）]；MCH值＝（HBG×100）/RBC，由实验室软件系统自动计算；对原测值的HBG、MCH和校准后的HBG、MCH分别与同一病人输注脂肪乳前的历史结果进行比较。结果：原标本HBG、MCH均明显高于输注脂肪乳前HBG、MCH,差异有统计学意义（P<0.01）；而校准后的血红蛋白、MCH与输注脂肪乳前HBG、MCH结果比较差异无统计学意义。结论：用上述计算公式校准乳糜微粒血浆HBG结果，能够准确消除乳糜微粒对仪器法测定血红蛋白的影响，能够对其进行准确校正。

【关键词】乳糜微粒血浆的血红蛋白浓度、原全血血红蛋白浓度、原全血HCT、校准公式

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）16-0114-02

随着医学检验学科的快速发展，自动化仪器在临床的应用越来越普及，而全自动血细胞分析仪作为检验科最重要、最基本的仪器之一也成为临床检验中的常规武器。全自动血细胞分析仪测定血红蛋白均采用光学比色法测定[1]，因此受到脂血、溶血、胆红素血等影响其结果。脂肪乳作为临床最常用的营养物质之一，在临床上已被常规使用，输注脂肪乳后，短时间内其患者血浆会出现乳白色的血浆，称为乳糜微粒血浆，对临床检验中，光学比色法的检验项目均产生严重的影响，包括生化指标、血红蛋白测定等。目前在各临床实验室中尚无统一的方法解决乳糜微粒血浆对血红蛋白测定带来的影响，据临床调查和文献分析，各大实验室中多数采用等量生理盐水代替乳糜微粒血浆的方法粗劣处理，但从理论上分析这种方法是不科学的，影响因素较多，例如加入的生理盐水的量不能准确代替血浆的量、生理盐水本身产生的基质效应的影响等，因此，笔者认为等量生理盐水替代法对结果影响因素较多，操作方法复杂不适宜临床实验血红蛋白的校准。本研究主要是对乳糜微粒血浆对全自动血细胞分析仪测定血红蛋的影响进行分析，并找出解决方法，为血红蛋白的准确测定提供理论依据。

1材料与方法：

1.1材料：随机收集2012年1月至2013年12月2年间我院住院静脉输注脂肪乳后2小时的病人，并剔除有出血症状的患者，静脉采集EDTAK2抗凝全血100份，经离心后肉眼可见上清血浆呈现不同程度的乳白色标本，其中男性患者40例，女性患者60例，年龄段在50-65岁之间。

1.2方法：

1.2.1仪器和试剂：选用深圳迈瑞公司的BC-5300全自动血细胞分析仪和原装配套稀释液、溶血素、清洁液为试剂，质控全血和校准全血均采用原材配套试剂作质控；离心机用戴安娜血型鉴定专用离心机。

1.2.2测定方法：实验室温度控制在25度，湿度为65%的环境下，对随机收集的EDTAK2抗凝全血，在30分钟内，直接用BC-5300全自动血球仪的开放全血模式，随临床常规标本同时直接测定[2]，得出相应血红蛋白、MCH结果即原标本血红蛋白值、MCH和相应红细胞比积；然后将该标本，用专用离心机离心3分钟（离心机转速为3000转/1分钟），得到相应乳糜微粒血浆，再将此血浆在同样的环境下，用上述仪器测定乳糜微粒血浆的血红蛋白浓度即乳糜血浆的血红蛋白值。最后将原标本血红蛋白值、原标本HCT值和乳糜血浆的血红蛋白值代入公式：校准后的血红蛋白＝原标本血红蛋白值—[乳糜血浆测得的血红蛋白值/（1—原标本HCT值）]得到校准后的血红蛋白浓度和MCH值；最后通过实验室LISH系统查到相应患者输注脂肪乳前3天内的血红蛋白浓度和MCH，并确认该患者无出血的临床表现。最终得到原标本、校准后标本、输注脂肪乳前的标本的血红蛋白浓度、MCH六项指标。

1.3结果统计：将100份原标本血红蛋白值、MCH值和相应校准后血红蛋白值、MCH值及相应历史结果的血红蛋白值、MCH值，计算出相应的均值和标准差，应用方差的统计方法处理，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果：

乳糜微粒全血血红蛋白浓度、MCH和公式校准后的血红蛋白浓度、MCH及输入脂肪乳前的血红蛋白浓度、MCH见下表；原标本血红蛋白浓度、MCH值明显超过输入脂肪乳前的血红蛋白浓度、MCH值，差异有统计学意义（P<0.01）,而校准后的血红蛋白浓度、MCH与输入脂肪乳前的血红蛋白浓度、MCH比较，差异无统计学意义。

乳糜微粒血浆血红蛋白浓度、MCH和校准后的血红蛋白浓度、MCH及输入脂肪乳前的血红蛋白浓度、MCH测定结果比较（x-±S）

注：与输注前血红蛋白浓度、MCH比较，输注后血红蛋白浓度、MCH（P<0.01）

3讨论：

脂血是临床检验中影响检验结果的影响因素之一，绝大多数是由乳糜微粒引起，而在临床上常用的脂肪乳静脉注射在短时间内均会产生不同程度的脂浊，对血红蛋白的测定带来了较大的误差，误导了临床医生，延误了患者病情的诊断和治疗，导致了临床对实验室结果的不信任，因此在临床检验工作中要严格对待。

本实验结果揭示，乳糜微粒全血血红蛋白浓度、MCH显著超过输注脂肪乳前血红蛋白浓度、MCH，差异有显著性（P<0.01），校准公式校准后血红蛋白浓度、MCH与输注脂肪乳前血红蛋白浓度、MCH比较差异无统计学意义，原因是血液中的乳糜微粒对光学方法测定血红蛋白的比色产生了正误差[3]，使测定结果显著升高。从上表可知，乳糜微粒血浆对全动血液分析仪测定血红蛋白产生较大误差，用校准公式校准后的结果与真实结果更加接近，因此可以用上述方法对乳糜微粒血浆进行准确校准，此方法操作简便易行，结果准确。而等量生理盐水替代血浆的方法[4]影响因素较多，操作繁琐，建议使用校准公式校准法代替等量生理盐水替代血浆法对乳糜微粒血浆对全自动血液分析仪测定血红蛋白产生的影响进行校准。

参考文献

[1]罗春丽、刘体全等临床检验基础第二版人民卫生出版社

[2]卫生部全国临床检验操作规程第三版东南大学出版社

[3]徐龙强，刘梦等简易血红蛋白估算方法[j]青岛大学医学院，2004（04）

[4]陆凤科，闭雄杰等高脂血浆对血红蛋白测定的干扰及校正检验医学与临床2013，10（6）738-739